论文摘要
微小RNA是一类单链非编码RNA,大约20-25个核苷酸的长度,在线虫到人类的真核生物中广泛存在。miRNA具有高度的保守性、组织特异性和时序性;生成miRNA的基因并不是随机分布的,从同一个前体RNA加工而来的共表达miRNA存在基因簇集现象。成熟的miRNA通过其5’端的5-8个核苷酸,识别并与目标特异性基因进行不完全互补配对或者完全互补配对,引起目标特异性基因的转录产物的降解或者诱导翻译抑制,从而来调控目的基因的表达。miRNA通过上述的作用原理在基因调控网络中发挥着重要的作用,并且还在对生物体的个体发育、细胞增值、凋亡、分化以及肿瘤的发生等许多方面的研究上具有重要的意义。本课题开展miRNA-125a、miRNA-295、miRNA-181b在小鼠着床前胚胎表达的研究,分析miRNA在着床前胚胎生长发育、细胞分化等方面可能起到的作用。目的:建立小鼠的超排、交配和胚胎收集系统,研究miRNA-125a、miRNA-295、miRNA-181b在小鼠着床前胚胎的表达,探讨miRNA在着床前胚胎发育和细胞分化中的作用和意义。方法:采用miRNA特异RT引物进行反转录,采用SYBR Green实时定量PCR技术,研究miR-125a、miR-295和miR-181b在小鼠着床前胚胎发育过程中表达水平的变化。结果:着床前胚胎发育的各阶段均表达miR-125a、miR-295和miR-181b;随着胚胎的发育,miR-295的表达呈逐渐上升的趋势;miR-125a在卵母细胞到2细胞发育阶段呈下降趋势,以后随发育进程呈逐渐上升趋势。结论:miRNA在小鼠着床前胚胎中表达,其可能对着床前胚胎的发育和分化过程起到调控作用。
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