基于RAA系统探讨复方钩藤降压宁片对2K1C-RHR作用效果的实验及临床研究

论文摘要

目的本课题通过观察复方钩藤降压宁片对原发性高血压阴虚阳亢、瘀血阻滞证患者的临床研究及对二肾一夹肾血管性高血压大鼠（2K1C-RHR）的作用效果的实验研究,来探讨复方钧藤降压宁片可能作用机制。方法临床研究：将诊断为原发性高血压1、2级,危险分层属低、中、高危,中医辨证为阴虚阳亢、瘀血阻滞证患者122例随机分入治疗组及对照组,治疗组给予复方钩藤降压宁片,对照组给予依那普利片,给药4周后观察两组患者症状与体征积分、血压、血压达标率、左室射血分数、左房、左室、AngⅠ、AngⅡ的变化。实验研究（1）分组：采用健康Wister大鼠,随机分为两组,实验组60只和空白组12只,实验组分为手术组48只和假手术组12只；将手术组Wister大鼠单侧肾动脉夹闭,建立两肾一夹肾血管性高血压大鼠模型,假手术组进行同样的手术过程,但不安置银夹造成肾动脉狭窄；手术组大鼠术后2周开始测量血压进行筛选,术后4周尾动脉压升至150mmHg以上的40只大鼠入选,根据血压水平随机分为A组（模型组）、B组（复方钧藤降压宁组）、C组（替米沙坦组）、D组（依那普利组）；E组为假手术组,F组为空白组。（2）各组每周测血压3次,取平均值；观察4周后,采用酶联免疫法测定血浆AngⅠ、AngⅡ,血清ALD、ACE、ET-1、NO含量;观察心、左肾、胸主动脉形态学及超微结构变化；采用酶联免疫法测定心肌中AT1R、AT1R-Ab、AT2R含量,采用PCR检测心肌与胸主动脉中AT1RmRNA、PMCA1 mRNA表达；采用Western blot检测心肌AT2R蛋白的表达统计学处理均采用SPSS 17.0软件分析。结果临床研究结果：复方钩藤降压宁片能够降低原发性高血压阴虚阳亢、瘀血阻滞证患者的血压水平,提高血压达标率,改善患者症状与体征积分,降低AngⅠ、AngⅡ水平。实验研究结果：（1）经二肾一夹造模处理后的手术组大鼠的收缩压（SBP）显著高于空白组、假手术组（P<0.05）；（2）给药4周前后比较,复方钩藤降压宁片能够降低两肾一夹肾血管性高血压大鼠的血压（P<0.05）；治疗后复方钩藤降压宁组与模型组组间比较,在降低AngⅠ、AngⅡ、ALD、ACE、ET-1,升高NO方面差异有统计学意义（P<0.05）；能够降低AT1R、AT1R-Ab、AT2R在心肌中含量；调节AT1R mRNA、PMCA1 mRNA在心肌与胸主动脉中表达；调节AT2R蛋白在心肌的表达。结论复方钩藤降压宁片能够降低原发性高血压阴虚阳亢、瘀血阻滞证患者的血压水平；提高血压达标率,改善患者症状与体征积分；降低AngⅠ、AngⅡ含量。复方钩藤降压宁片对2K1C-RHR具有显著的降压疗效,作用稳定、持久。复方钩藤降压宁片能降低血浆AngⅠ、AngⅡ及血清ALD、ACE含量,具有阻断RAAS的作用及类似ACEI样的降压作用；复方钩藤降压宁片能够使2K1C-RHR血清NO含量增加,ET水平降低,使二者之间的比例趋于平衡。复方钩藤降压宁片能明显降低2K1C-RHR胸主动脉中膜厚度,对2K1C-RHR胸主动脉血管重塑进程有一定的抑制作用。复方钩藤降压宁片能够显著改善2K1C-RHR的血管内皮依赖性舒张功能,抑制血管重构；具有一定抑制心肌肥厚及LVH的作用。复方钩藤降压宁片能够降低心肌中AT1R、AT1R-Ab、AT2R含量,调低AT1R mRNA、PMCA1 mRNA在心肌与胸主动脉中表达,降低AT2R蛋白在心肌的表达,具有类似ARB样的降压作用。

论文目录

• 中英文缩略词表
• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 第一部分 临床研究:复方钩藤降压宁片干预原发性高血压阴虚阳亢、瘀血阻滞证患者的临床研究
• 一、资料与方法
• 1. 诊断标准
• 1.1 西医诊断标准
• 1.2 中医证候诊断标准
• 2. 病例纳入标准
• 3. 病例排除标准
• 4. 病例的剔除、脱落及中止试验标准
• 5. 试验药物及给药方法
• 6. 试验方法
• 6.1 病例来源
• 6.2 病例分组
• 6.3 随机化方法
• 6.4 随访
• 6.5 观察指标
• 7. 不良反应处理
• 8. 血压严重超标补救措施
• 9. 疗效判定标准
• 9.1 中医证候疗效判定标准
• 9.2 血压疗效判定标准
• 10. 统计学方法
• 二、结果与分析
• 1. 患者的一般资料分析
• 2. 复方钩藤降压宁片对血压的影响
• 3. 复方钩藤降压宁片对血压达标率的影响
• 4. 复方钩藤降压宁片对原发性高血压阴虚阳亢、瘀血阻滞证患者症状及体征积分的影响
• 5. 复方钩藤降压宁片对原发性高血压阴虚阳亢、瘀血阻滞证患者左室射血分数、左房内径、左室内径的影响
• 6. 复方钩藤降压宁片对原发性高血压阴虚阳亢、瘀血阻滞证患者血清AngⅠ、AngⅡ的影响
• 三、讨论
• 1. 中医古文献论述
• 2. 中医病因病机研究
• 3. 西医认识
• 3.1 高血压的治疗治疗目标
• 3.2 治疗策略
• 3.3 降压药物治疗原则
• 3.4 现有降压药的种类及不良反应
• 4. 中医药
• 5. 现代药理研究
• 6. 原发性高血压与AngⅠ、AngⅡ
• 7. 疗效分析
• 8. 小结
• 第二部分 实验研究:复方钩藤降压宁片对2K1C-RHR降压作用及其机理研究
• 实验一 2K1C-RHR模型的建立及动物分组
• 一、材料与方法
• 1. 实验目的
• 2. 实验材料
• 2.1 实验动物
• 2.2 实验药物
• 2.3 主要试剂
• 2.4 主要仪器
• 3. 实验方法
• 二、结果
• 三、讨论
• 实验二 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR血压及血浆AngⅠ、AngⅡ,血清ALD、ACE、ET-1、NO含量的影响
• 一、材料与方法
• 1. 实验目的
• 2. 实验材料
• 2.1 实验动物
• 2.2 实验药物
• 2.3 主要试剂及试剂盒
• 2.4 主要仪器
• 2.5 统计学方法
• 3. 实验方法
• 3.1 测量血压
• 3.2 ELISA测定血浆AngⅠ、AngⅡ含量;血清ET-1、NO、ALD、ACE含量
• 二、结果与分析
• 1. 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR血压的影响
• 2. 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR血浆AngⅠ、AngⅡ含量影响
• 3. 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR清ALD、ACE、ET-1、NO含量影响
• 三、讨论
• 实验三 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR心、左肾、胸主动脉形态学的影响
• 一、材料与方法
• 1. 实验目的
• 2. 实验材料
• 2.1 实验动物
• 2.2 主要试剂
• 2.3 主要仪器
• 2.4 统计学方法
• 3. 实验方法
• 3.1 心脏组织
• 3.2 左肾组织
• 3.3 胸主动脉
• 二、结果与分析
• 1. 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR的BW、LVM、LVMI影响
• 2. 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR心肌细胞组织学病理影响
• 3. 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR左肾组织学病理的影响
• 4. 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR的肾小球的损伤指数
• 5. 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR胸主动脉的影响
• 6. 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR胸主动脉MT的影响
• 三、讨论
• 实验四 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR心肌中AT1R、AT1R-Ab含量及心肌与胸主动脉中AT1R mRNA、PMCA1 mRNA表达的影响
• 一、材料与方法
• 1. 实验目的
• 2. 实验材料
• 2.1 实验动物
• 2.2 主要试剂及试剂盒
• 2.3 主要仪器
• 2.4 统计学方法
• 3. 实验方法
• 3.1 采用酶联免疫法检测心肌中AT1R、AT1R-Ab含量
• 3.2 PCR检测
• 二、结果与分析
• 1. 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR心肌中AT1R、AT1R-Ab含量的影响
• 2. 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR心肌及胸主动脉AT1RmRNA表达
• 3. 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR心肌及胸主动脉PMCA1-mRNA表达
• 三、讨论
• 实验五 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR心肌组织中AT2R含量及Western blot检测心肌AT2R蛋白的表达的影响
• 一、材料与方法
• 1. 实验目的
• 2. 实验材料
• 2.1 实验动物
• 2.2 仪器与试剂
• 3. 实验方法
• 3.1 采用酶联免疫法检测心肌中AT2R含量
• 3.2 样品制备
• 3.3 蛋白浓度检测
• 3.4 western blot
• 3.5 样本信息
• 3.6 指标相关实验条件
• 二、实验结果
• 1. 上样顺序
• 2. Western blot检测2K1C-RHR心肌中AT2R蛋白表达
• 3. 复方钩藤降压宁对2K1C-RHR心肌中AT2R含量的影响
• 三、讨论
• 结论
• 存在的问题与展望
• 参考文献
• 致谢
• 附录1:附图
• 附录2:文献综述
• 参考文献
• 附录3:博士研究生在读期间论文发表及科研课题
• 附件