论文摘要
目的：（1）观察β-Catenin基因在散发性结直肠癌（SCRC）中胞浆胞核异常表达特征及突变发生率并探讨其临床病理相关性；（2）检测SCRC标本的微卫星不稳定（MSI）状态，分析其与β-Catenin基因突变的关系；（3）检测SCRC组织及癌旁正常粘膜中β-Catenin mRNA的含量，探讨其与SCRC中的β-Catenin蛋白异常表达以及临床病理学指标间的关系；（4）检测SCRC单细胞的拉曼光谱，以便建立区分癌细胞和正常细胞的诊断识别模型并分析生化改变。方法：（1）用免疫组织化学EnVision二步法检测了90例SCRC和22例散发性结直肠腺瘤标本的β-Catenin基因在胞浆胞核中的异常表达。（2）以PCR扩增和直接测序检测了上述标本中β-Catenin基因第3外显子突变。（3）用PCR扩增和毛细管电泳检测Bat25和Bat26两个微卫星位点。（4）用TaqMan实时荧光定量PCR方法检测了81例SCRC组织和28例癌旁正常粘膜组织的β-CateninmRNA含量。（5）应用光镊拉曼光谱技术（LTRS）检测10例SCRC的单细胞和正常粘膜上皮单细胞的拉曼光谱，经主元分析和逻辑回归分析建立诊断识别模型。结果：（1）正常结直肠粘膜中β-Catenin表达定位于细胞膜上，未见胞浆胞核的异常表达。散发性结直肠腺瘤和腺癌组织出现胞浆和胞核的异常表达，膜表达有不同程度的降低。在SCRC中β-Catenin的胞浆和胞核表达率（分别为88.9％和41.1％）显著高于散发性结直肠腺瘤（分别为59.1％和18.2％）（P＜0.05）。SCRC的β-Catenin异常胞浆表达与肿瘤生长方式、分化程度相关，阳性表达率在溃疡型和浸润型生长、高中分化腺癌分别高于隆起型生长、低分化腺癌（P＜0.05）。SCRC的β-Catenin核表达率在浸润型和溃疡型生长（50.0％）高于在隆起型生长（26.5％）（P＜0.05）。核表达多为灶性分布，主要在肿瘤浸润前沿呈阳性表达。（2）90例SCRC标本中仅有1例在β-Catenin第3外显子发生点突变，为杂合性突变，即41密码子ACC→GCC，苏氨酸变成丙氨酸，突变率约1％。22例散发性腺瘤未发现第3外显子突变。（3）90例SCRC标本中有8例表现高度微卫星不稳定（MSI-H），发生率为9％（8／90），其中一例为β-Catenin突变，而微卫星稳定（MSS）病例中未检测到突变。（4）在散发性结直肠癌组织中β-Catenin mRNA含量（2.5267±2.2839）低于癌旁正常粘膜组织中的含量（5.0029±3.3264），差别有显著性意义。淋巴结转移组的β-Catenin mRNA含量（1.8266±1.2883）低于淋巴结无转移组（3.3592±2.8805），P＜0.05；溃疡型和浸润型生长组β-Catenin mRNA含量（2.2023±2.0351）低于隆起型生长组（3.1083±2.6103），P＜0.05；在β-Catenin胞浆或胞核异常表达组和无胞浆或胞核异常表达组织之间，β-Catenin mRNA含量的差别无显著性意义。（5）我们建立了区分散发性结直肠癌细胞和正常细胞的诊断识别模型，其诊断识别的敏感度和特异度分别达到92.5％和82.5％。光谱分析结果显示，癌细胞中核酸和蛋白质水平高于正常细胞，而脂质含量低于正常细胞。结论：1．在SCRC中β-Catenin胞浆及核内异常表达率达率分别为88.9％和41.1％，其胞浆胞核异常表达率只与结直肠癌的发生阶段、生长方式及分化程度相关。β-Catenin胞核异常表达往往出现在肿瘤的浸润前沿，可能与癌肿的侵袭行为有关。2．在SCRC中β-Catenin突变率很低，推测在SCRC中β-Catenin突变不是β-Catenin胞浆胞核异常表达的主要原因；伴MSI-H的SCRC可能易发生β-Catenin突变。3．在SCRC中β-Catenin mRNA的含量显著低于正常结直肠粘膜中的含量，可能是一种负反馈调节机制所致。SCRC中β-Catenin的胞浆胞核异常表达与β-Catenin mRNA转录水平无明显关联。4．β-Catenin mRNA含量降低与淋巴结转移、溃疡及浸润性生长相关，可作为结直肠癌生物学行为的判断指标之一。5．单细胞拉曼光谱诊断识别模型能敏感地区分SCRC细胞和正常粘膜上皮细胞，具有潜在的临床细胞学诊断价值。单细胞拉曼光谱可提供丰富的有关结直肠癌细胞生化改变的信息。6．激光光镊拉曼光谱分析方法是一种微创、几乎不用试剂而客观的检测方法，在肿瘤单细胞的临床诊断和研究中值得推广。
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- [1].医院结直肠癌治疗质量评价指标体系的建立[J]. 中国医院统计 2015(01)
- [2].“吃货”需注意的癌症——结直肠癌[J]. 消费者报道 2015(05)
- [3].不同手术方式治疗结直肠癌腹膜转移患者预后效果分析[J]. 世界最新医学信息文摘 2019(97)
- [4].中国南方结直肠癌平均风险人群低剂量聚乙二醇方案肠道准备质量调查[J]. 广东医学 2019(22)
- [5].不同年龄段结直肠癌患者的临床特点及病理分析研究[J]. 当代医学 2019(35)
- [6].饮食、肠道微生态与结直肠癌[J]. 中华结直肠疾病电子杂志 2019(06)
- [7].结直肠癌健康信念量表的汉化及信效度研究[J]. 中国全科医学 2020(02)
- [8].南昌市结直肠癌高危人群肠镜筛查的依从性研究[J]. 赣南医学院学报 2019(11)
- [9].十大恶性肿瘤影像分级检查推荐方案(1.0版)之结直肠癌[J]. 中国医学计算机成像杂志 2019(05)
- [10].2019年结直肠癌领域治疗进展[J]. 中华结直肠疾病电子杂志 2020(01)
- [11].2014—2017年北京市城市结直肠癌早诊早治项目筛查结果分析[J]. 中国公共卫生 2020(01)
- [12].结直肠癌的治疗进展[J]. 山西医药杂志 2020(05)
- [13].粪便菌落用于筛查结直肠癌的研究[J]. 山西医药杂志 2020(06)
- [14].术前可溶性细胞间黏附分子1及中性粒细胞-淋巴细胞比值与结直肠癌临床病理特征的相关性分析[J]. 中华普通外科学文献(电子版) 2020(02)
- [15].慢性炎症细胞因子表达与结直肠癌相关性分析[J]. 中国实验诊断学 2020(04)
- [16].代谢酶基因多态性与结直肠癌临床病理特征的关系[J]. 中国现代医学杂志 2020(09)
- [17].微卫星不稳定性与结直肠癌的研究进展[J]. 胃肠病学 2020(01)
- [18].遗传性结直肠癌突变基因序列的研究进展[J]. 中国普外基础与临床杂志 2020(05)
- [19].2012—2016年重庆市城市人群结直肠癌筛查结果分析[J]. 中国肿瘤 2020(06)
- [20].通过生物信息学筛选与结直肠癌转移相关的基因及在结直肠癌转移研究中的应用[J]. 赣南医学院学报 2020(04)
- [21].全程优质护理模式对结直肠癌患者术后焦虑抑郁情绪及生活质量的影响观察[J]. 中国医药指南 2020(15)
- [22].左右半结直肠癌根治性切除术后患者的预后差异分析[J]. 吉林医学 2020(05)
- [23].我国结直肠癌筛查的影响因素文献分析及思考[J]. 中国全科医学 2020(23)
- [24].中国结直肠癌骨转移多学科综合治疗专家共识(2020版)[J]. 中华结直肠疾病电子杂志 2020(03)
- [25].2005—2014年云南省肿瘤医院结直肠癌临床流行病学特征变化趋势分析[J]. 中国肿瘤 2020(07)
- [26].结直肠癌造口患者采取微信平台自我管理护理模式的效果观察[J]. 实用临床护理学电子杂志 2020(22)
- [27].前往结直肠癌多学科门诊寻求第二意见的患者特征[J]. 结直肠肛门外科 2020(03)
- [28].结直肠癌远处转移相关miRNA的基因多态性研究[J]. 基因组学与应用生物学 2020(05)
- [29].国内结直肠癌患者支持性照顾需求的研究现状[J]. 中国药物与临床 2019(24)
- [30].幽门螺杆菌感染与结直肠癌相关性分析[J]. 中国药物与临床 2020(05)