益生菌应用雏鸡IBD疫苗免疫后外周血液免疫功能和IL-2及其受体mRNA表达变化

论文摘要

本试验以1日龄雏鸡为研究对象,应用细胞培养技术、MTT检测法、免疫SPA菌体花环法和荧光定量PCR技术全面系统地研究了雏鸡应用益生菌及其联合IBD疫苗和IBD强毒攻击后,外周血液T、B淋巴细胞增殖功能及其数量和IL-2和IL-2R mRNA表达的动态变化。旨在全面系统揭示益生菌及其联合IBD疫苗对雏鸡外周血液细胞和体液免疫功能的影响,为益生菌研发利用提供重要的科学实验依据。研究结果发现:1.雏鸡饲喂益生菌后,其外周血液T淋巴细胞增殖反应于411天均明显增强（P<0.05或P<0.01）;益生菌I组和益生菌II组雏鸡外周血液B淋巴细胞增殖反应分别于饲喂后711天和111天显著高于对照雏鸡（P<0.05或P<0.01）。外周血液T、B淋巴细胞数量和血清IgG、IgM、IgA含量较未饲喂益生菌的对照雏鸡不同程度增加。表明雏鸡应用益生菌后,其外周血液的细胞和体液免疫功能明显提高。2.雏鸡IBD疫苗免疫后,试验雏鸡外周血液T、B淋巴细胞增殖功能及淋巴细胞数量和血清IgG、IgM、IgA均明显高于对照雏鸡,其中,益生菌联合IBD疫苗免疫雏鸡又较IBD疫苗单独免疫雏鸡不同程度升高,表明益生菌与IBD疫苗联合使用能提高机体外周血液细胞和体液免疫水平,可见益生菌增强了外周血液对IBD疫苗的细胞和体液免疫应答,发挥了免疫增强作用。3.益生菌联合IBD疫苗免疫雏鸡后,其外周血液IL-2和IL-2R mRNA表达均明显高于对照雏鸡和IBD疫苗单独免疫雏鸡,表明益生菌和IBD疫苗均可刺激T淋巴细胞增殖和活化,促进IL-2和IL-2R mRNA表达,使外周血免疫调节功能增强,其中益生菌联合IBD疫苗雏鸡免疫效果最明显,可见益生菌能促进细胞因子IL-2和IL-2R的免疫调节功能。4. IBD强毒攻击后,试验雏鸡外周血液T、B淋巴细胞增殖功能及淋巴细胞数量、IL-2和IL-2R mRNA表达均明显高于对照雏鸡,其中,益生菌与IBD疫苗联合使用效果明显,可见,益生菌不但能提高外周血液细胞和体液免疫水平,还能增强外周血液对IBD疫苗的细胞和体液免疫应答,分泌大量细胞因子和特异性抗体,增强IBD疫苗免疫效果。5.上述各免疫指标益生菌II组又略高于益生菌I组,说明益生菌II组的免疫增强效果优于益生菌I组,可能是由于益生菌II比益生菌I含有更多的芽孢杆菌发挥了一定的作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 1 引言
• 1.1 益生菌研究进展
• 1.1.1 益生菌概念及研究现状
• 1.1.2 益生菌分类及其特点
• 1.1.3 益生菌的有益作用机制
• 1.1.4 益生菌在养鸡业中的实际应用
• 1.2 传染性法氏囊病研究进展
• 1.2.1 病毒及其基因组的分子结构特征
• 1.2.2 IBD 流行病学
• 1.2.3 IBD 的免疫防治
• 1.3 禽类免疫系统及IL-2、IL-2R 研究进展
• 1.3.1 禽类免疫系统的特点
• 1.3.2 禽类的免疫细胞
• 1.3.3 禽类的免疫球蛋白
• 1.3.4 鸡IL-2 及IL-2R 的研究
• 1.4 研究的目的与意义
• 2 材料和方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 试验动物
• 2.1.2 益生菌
• 2.1.3 IBD 疫苗和IBD 强毒
• 2.1.4 主要试剂
• 2.1.5 主要仪器设备
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 益生菌微胶囊制备
• 2.2.2 实验动物分组及其处理
• 2.2.3 被检材料采取
• 2.2.4 检测指标及方法
• 2.3 数据处理
• 3 结果与分析
• 3.1 鸡IL-2 和IL-2R mRNA 表达REAL TIME PCR 检测方法的建立及应用
• 3.1.1 总RNA 提取
• 3.1.2 鸡IL-2 和IL-2R mRNA 表达Real Time PCR 检测方法的建立
• 3.2 益生菌雏鸡外周血液免疫功能及IL-2 和IL-2R mRNA 表达变化
• 3.2.1 益生菌雏鸡外周血液IL-2 和IL-2R mRNA 表达变化
• 3.2.2 益生菌雏鸡外周血液细胞免疫功能变化
• 3.2.3 益生菌雏鸡外周血液体液免疫功能变化
• 3.3 益生菌雏鸡IBD 疫苗免疫后外周血液免疫功能及IL-2 和IL-2R mRNA 表达变化
• 3.3.1 益生菌雏鸡IBD 疫苗免疫后外周血液IL-2 和IL-2R mRNA 表达变化
• 3.3.2 益生菌雏鸡IBD 疫苗免疫后外周血液细胞免疫功能变化
• 3.3.3 益生菌雏鸡IBD 疫苗免疫后外周血液体液免疫功能变化
• 3.4 雏鸡IBD 强毒攻击后外周血液免疫功能及IL-2 和IL-2R mRNA 表达变化
• 3.4.1 雏鸡IBD 强毒攻击后外周血液IL-2 和IL-2R mRNA 表达变化
• 3.4.2 雏鸡IBD 强毒攻击后外周血液细胞免疫功能变化
• 3.4.3 雏鸡IBD 强毒攻击后外周血液体液免疫功能变化
• 3.5 IBD 强毒攻击雏鸡后发病及保护情况
• 4 讨论
• 4.1 益生菌对雏鸡外周血液免疫功能的影响及其机制
• 4.1.1 益生菌对雏鸡外周血液细胞免疫功能的影响及其机制
• 4.1.2 益生菌对雏鸡外周血液体液免疫功能的影响及其机制
• 4.2 益生菌联合IBD 疫苗对雏鸡外周血液免疫功能的影响及其机制
• 4.2.1 益生菌联合IBD 疫苗对雏鸡外周血液细胞免疫功能的影响及其机制
• 4.2.2 益生菌联合IBD 疫苗对雏鸡外周血液体液免疫功能的影响及其机制
• 4.3 益生菌及其联合IBD 疫苗对雏鸡外周血液IL-2 和IL-2R mRNA 表达的影响及其机制
• 4.4 菌种对免疫功能的影响
• 5 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文