论文摘要
一、研究目的1.以含不同浓度D-葡萄糖的培养基处理人脐动脉内皮细胞（HUAEC）建立动脉内皮细胞梯度浓度高糖模型；2.探讨全长sirturin-3（sirt3）蛋白在细胞内的定位；3.观察细胞质中全长sirt3在上述模型中蛋白水平的表达,探讨高糖及高脂刺激对动脉内皮细胞细胞质全长sirt3蛋白水平表达的影响。4.评价高糖和高脂对对动脉内皮造成的损伤与全长sirt3之间的关系。二、实验方法1.培养HUAEC,选择生长状态良好的细胞株。2.将指数生长期的HUAEC随机分为正常对照组、11mmol/L D-葡萄糖组、22mmol/L D-葡萄糖组、44mmol/L D-葡萄糖组及40ug/ml ox-LDL组。3.将上述细胞分别给予梯度浓度D-葡萄糖及ox-LDL处理48小时。4.以蛋白免疫印迹法（Western blot, WB）检测各组全长sirt3细胞质蛋白水平的表达；5.采用统计学软件SPSS19.0进行统计学处理。三、结果1.加用梯度浓度D-葡萄糖刺激48小时后,随D-葡萄糖浓度提高,可见细胞生长速度减慢,表现为以同等密度接种的细胞在加用处理条件48小时时细胞密度较小；细胞死亡增多。2.在正常对照组人脐动脉内皮细胞细胞质中可检测出全长sirt3蛋白。3.受到梯度浓度D-葡萄糖刺激所引起的应激时人脐动脉内皮细胞细胞质中均可检测出全长sirt3蛋白。4.各组间tublin蛋白表达量无显著性差异（P>0.05）5.各梯度浓度D-葡萄糖处理组与正常对照组相比,细胞质全长sirt3蛋白表达量均存在显著性差异（P<0.05）。各梯度浓度D-葡萄糖处理条件下各组细胞质全长sirt3蛋白表达量存在显著性差异（P<0.05）,且随D-葡萄糖浓度增高,细胞质全长sirt3蛋白表达量有升高趋势。6.加用ox-LDL刺激48小时后,可见细胞生长速度减慢,表现为以同等密度接种的细胞在加用处理条件48小时时细胞密度较小；细胞死亡增多,表现为培养基中漂浮细胞增多。7.受到ox-LDL糖刺激所引起的应激时人脐动脉内皮细胞细胞质中可检测出全长sirt3蛋白。8. ox-LDL处理条件下各细胞质全长sirt3蛋白表达量较正常对照组显著增加（P<0.05）。四、结论1.正常人脐动脉内皮细胞细胞质中存在全长sirt3蛋白。2.受到高糖短暂刺激后人脐动脉内皮细胞细胞质中全长sirt3蛋白表达量显著增高,且随D-葡萄糖浓度增高,细胞质全长sirt3蛋白表达量显著增加。sirt3蛋白可能参与抵抗高浓度D-葡萄糖对内皮细胞的损伤应激机制。3.受到ox-LDL短暂刺激后人脐动脉内皮细胞细胞质中全长sirt3蛋白表达量显著升高。sirt3蛋白可能参与抵抗ox-LDL对内皮细胞的损伤应激机制。4. sirt3蛋白可能参与内皮细胞对不利因素损伤的应激机制,且这一反应为非特异性的。5.本实验构建人脐动脉内皮细胞高糖模型及ox-LDL模型,成功模拟了体内高糖及ox-LDL对内皮细胞的直接损伤,提示全长sirt3参与内皮细胞损伤的相关保护机制,为全长sirt3与动脉粥样硬化间的相关研究奠定了实验基础。
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- [30].醋酸铅对人股动脉内皮细胞凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3表达的影响[J]. 职业与健康 2011(02)