携载羟基喜树碱酸度敏感聚合物微球的研究

论文摘要

羟基喜树碱（HCPT）具有较广抗肿瘤谱,但因其不溶于水及生理上可接受的有机溶剂,并易转变为抗肿瘤活性低且有严重副作用的羧酸盐形式,从而限制了HCPT的临床应用。利用肿瘤部位的微酸性环境,使用酸度敏感聚合物作为抗癌药物制剂的载体材料,同时利用肝癌细胞表面含有大量的去唾液酸糖蛋白受体构建含靶向基团的纳米级微球制剂,将药物选择性富集于肿瘤部位,以提高药物的生物利用度和抑制肿瘤生长的效果。在静电喷射技术制备载药微球中,运用正交实验法,获得了影响载药微球的粒径和HCPT包裹效率的主次因素,建立了纳米微球粒径和HCPT包裹效率与主要因素的回归方程,验证实验表明计算值与实验结果有较好的一致性。采用采用优化的工艺条件,以聚乙二醇与聚乳酸共聚物（PELA）、含缩醛结构的酸度敏感聚合物（PBELA）和含半乳糖基的酸度敏感聚合物（PGBELA）为载体材料；制备了载HCPT纳米微球。结果表明微球形态规整,大小均一,平均粒径约为250 nm。荧光显微镜图片显示大部分药物包裹到微球当中,微球的载药量在1.3%左右,药物包裹效率达到40%以上。分别在pH 7.4,6.0,5.0的缓冲液中,从微球失重、分子量降低和分子量分布变宽等几方面考察三种聚合物微球的降解行为和药物释放情况。结果表明PBELA和PGBELA微球在酸性条件下降解速度要远高于中性条件下的降解,而PELA微球在酸性条件下则显得相对稳定,体现出PBELA和PGBELA微球的酸度敏感性,且PGBELA微球的酸度敏感性更为明显。三种聚合物载药微球的释放行为都表现为前期的突释和后期的缓慢释放,同时基于PBELA和PGBELA微球的酸度敏感性,其突释量和最终的累计释放量都大幅增加。在中性和酸性条件下考察三种聚合物载药微球的细胞毒性和细胞吞噬情况。在pH6.8环境下HCPT/PBELA和HCPT/PGBELA微球表现出较高的抑制肿瘤细胞生长的效果,IC50接近中性环境下的50%,而HCPT/PELA微球则无明显差别。细胞吞噬实验结果表明,HepG-2细胞对HCPT/PGBELA微球的吞噬要远高于其他两种载药微球。通过瘤内注射载药聚合物微球,基于肿瘤生长曲线、动物死亡曲线和肿瘤的组织学分析等结果,表明三种聚合物空白微球和生理盐水都没有对肿瘤产生抑制效果,而三种聚合物的载药微球则表现出良好的肿瘤抑制效果,且抑制效果都优于自由HCPT。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• 第1章 绪论
• 1.1 癌症及癌症治疗
• 1.1.1 癌症的现状
• 1.1.2 癌症的治疗方法
• 1.1.3 癌症化疗的研究现状
• 1.2 药物控制释放体系
• 1.2.1 药物控释体系的释放机制
• 1.2.2 药物控释体系的靶向机制
• 1.2.3 抗癌药物控释体系的研究现状
• 1.3 酸度敏感聚合物
• 1.3.1 酸度敏感聚合物的特点及种类
• 1.3.2 酸度敏感聚合物在药物控释体系中的应用
• 1.4 喜树碱类药物及其剂型研究
• 1.4.1 喜树碱类药物的特点
• 1.4.2 喜树碱类药物控释剂型的研究现状
• 1.5 纳米微球药物制剂
• 1.5.1 纳米微球制剂的特点
• 1.5.2 纳米微球制剂的制备方法
• 1.5.3 静电喷射法制备纳米微球的研究现状
• 1.6 课题的研究意义、内容及创新
• 1.6.1 课题的研究目的和意义
• 1.6.2 课题的研究内容
• 1.6.3 课题的创新点
• 第2章 正交设计法研究静电喷射微球的工艺参数
• 2.1 实验部分
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 交试验设计
• 2.1.3 微球的制备
• 2.1.4 微球的表征
• 2.2 结果与讨论
• 2.2.1 微球的表征
• 2.2.2 极差分析
• 2.2.3 方差分析
• 2.2.4 交互作用分析
• 2.2.5 回归分析
• 2.2.6 验证实验
• 2.3 本章小结
• 第3章 携载羟基喜树碱微球制剂的研究
• 3.1 实验部分
• 3.1.1 实验材料
• 3.1.2 酸度敏感聚合物的制备及表征
• 3.1.3 载药微球的制备
• 3.1.4 载药微球的表征
• 3.1.5 微球中羟基喜树碱的包裹效率及载药量
• 3.1.6 微球的体外降解
• 3.1.7 微球降解的表征
• 3.1.8 载药微球的体外释放
• 3.1.9 统计学分析
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 酸度敏感聚合物的表征
• 3.2.2 载药微球的表征
• 3.2.3 载药微球的包裹效率及载药量
• 3.2.4 微球的体外降解行为
• 3.2.5 载药微球的体外释放行为
• 3.3 本章小结
• 第4章 携载羟基喜树碱微球制剂的抗肿瘤活性研究
• 4.1 实验部分
• 4.1.1 实验材料
• 4.1.2 纯HCPT的细胞毒性试验
• 4.1.3 载药微球的细胞毒性试验
• 4.1.4 载药微球的细胞吞噬试验
• 4.1.5 载药微球的瘤内注入
• 4.1.6 载药微球的抗肿瘤效果评价
• 4.1.7 统计学分析
• 4.2 结果讨论
• 4.2.1 纯HCPT的细胞毒性试验
• 4.2.2 载药微球的细胞毒性试验
• 4.2.3 载药微球的细胞吞噬试验
• 4.2.4 载药微球体内抑制肿瘤生长的效果
• 4.3 本章小结
• 全文总结
• 致谢
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的论文