一株黄原胶降解菌的筛选与鉴定

一株黄原胶降解菌的筛选与鉴定

论文摘要

黄原胶作为一种生物发酵制造的微生物杂多糖,由于其独特的分子结构,其水溶液具有良好的假塑性和稳定性,已经在食品、石油等行业中得到了广泛的应用,使黄原胶成为一种引人关注的,使用安全的生物材料。同时,近年来从各种途径获取的寡糖产品,由于其具有独特的生物活性,得到了研究者的高度重视。已有研究者尝试用化学或生物方法对黄原胶进行降解以获取寡糖。随着寡糖研究的升温,这项工作在不断的深入。用黄原胶降解获取的寡糖的生物活性引起了人们的广泛关注。已有研究者从土壤中分离到可用于降解黄原胶的菌种,但其降解产物中含有纤维素成分,效果不够理想。本文从另外的途径分离到一株可降解黄原胶的菌,并进行了相应的生理生化研究,该菌可有效降解黄原胶,具有良好的生产寡糖的前景。首先将黄原胶培养基置于室内,以富集黄原胶降解菌,再通过稀释涂平板得到纯菌种,然后将菌体接种于液体培养基,鉴定该菌是否有降解黄原胶的能力,并进行复筛,得到一株降解能力较强的菌XD2-8。通过显微镜观察XD2-8菌株的形态特征,通过大分子水解实验、糖发酵实验、乙酰甲基甲醇实验、柠檬酸盐利用实验、吲哚实验、甲基红实验、接触酶实验,以及碳源的利用实验、氮源的利用实验、需氧性实验,并确定该菌的适宜培养温度和pH、可耐受渗透压,通过这些特征,初步认为该菌为类芽孢杆菌属。测定XD2-8菌的16S rRNA序列,通过BLAST、Clustal软件进行分析,发现该菌与灿烂类芽孢杆菌Paenibacillus lautus的关系最为接近,相似性大于97%,将该菌命名为Paenibacillus lautus XD2-8。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 文献综述
  • 1.1 前言
  • 1.2 黄原胶概况
  • 1.3 研究黄原胶降解的意义
  • 1.4 黄原胶降解的方法
  • 1.5 结论与展望
  • 1.6 本文的主要研究目标及内容
  • 2 黄原胶降解菌XD2-8 的筛选
  • 2.1 前言
  • 2.2 实验材料与方法
  • 2.3 实验结果
  • 3 XD2-8 菌的生理生化特征
  • 3.1 前言
  • 3.2 菌株XD2-8 菌落形态
  • 3.3 菌株XD2-8 革兰氏染色特征
  • 3.4 菌株XD2-8 芽孢染色特征
  • 3.5 XD2-8 菌荚膜染色
  • 3.6 XD2-8 菌的淀粉水解
  • 3.7 明胶试验
  • 3.8 油脂试验
  • 3.9 石蕊牛奶试验
  • 3.10 糖发酵试验
  • 3.11 甲基红(M.R)试验
  • 3.12 乙酰甲基甲醇(V.P.)试验
  • 3.13 柠檬酸盐利用试验
  • 3.14 吲哚试验
  • 3.15 微生物对碳源的同化作用
  • 3.16 微生物对氮源的同化作用
  • 3.17 氧对微生物的影响
  • 3.18 温度对微生物的影响
  • 3.19 渗透压对微生物的影响
  • 3.20 pH 对微生物的影响
  • 3.21 接触酶实验特征
  • 3.22 小结
  • 4 XD 2-8 菌株的 16S rRNA 测定与分析
  • 4.1 引言
  • 4.2 实验材料与方法
  • 4.3 测序结果
  • 4.4 序列分析
  • 5 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读硕士学位期间发表的学术论文
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