早熟禾和黄豆DNA的提取及与苯噻草胺的相互作用研究

论文摘要

在查阅大量国内外文献基础上，用紫外分光光度法研究了苯噻草胺与早熟禾和黄豆DNA的相互作用，提出了新的除草机理。本论文的主要成果如下： 1．优化了用SDS法提取早熟禾DNA的最佳实验条件，细胞提取液用量为4.0 mL，无水乙醇用量为0.4 mL，水浴时间为40 min，饱和NaOAc溶液用量为1.0 mL，苯酚／氯仿／异戊醇溶液用量为样液的体积的0.6倍，氯仿／异戊醇溶液用量为样液体积的0.9倍，异丙醇用量为样液体积的0.7倍。在所选择条件下提取早熟禾DNA，其产率约为381μg／g，A260／A280的值在1.76～1.82之间，纯度高。 2．提取黄豆DNA的最优实验条件是：细胞提取液用量为5.0 mL，无水乙醇的用量为0.5 mL，水浴时间为30 min，饱和KCl溶液用量为1.0 mL，苯酚／氯仿／异戊醇溶液用量为样液体积的0.5倍，氯仿／异戊醇溶液用量为样液体积的0.6倍，异丙醇用量为样液体积的1.0倍。在优化条件下提取黄豆DNA，其产率约900μg／g，A260／A280的值在1.75～1.81之间，纯度高。 3．运用紫外分光光度法研究了苯噻草胺与早熟禾DNA和黄豆DNA的相互作用。当苯噻草胺浓度小于3.08×10-5mol／L时，苯噻草胺几乎不与早熟禾DNA和黄豆DNA作用；当苯噻草胺浓度大于6.16×10-5mol／L时，苯噻草胺与黄豆DNA也发生作用，产生药害。苯噻草胺浓度在3.08×10-5mol／L～6.16×10-5mol／L范围内，苯噻草胺既与早熟禾DNA强烈作用，又几乎不与黄豆DNA作用，可选择性地除草。苯噻草胺可嵌入杂草DNA分子双链中，破坏DNA分子中碱基配对，使DNA双链解开，并且苯噻草胺可进一步与解链后的ss DNA通过氢键结合，形成复合物，这样，便抑制了DNA的复制，从而使杂草死亡。苯噻草胺杀除早熟禾等杂草的合适浓度为3.08×10-5mol／L～6.16×10-5mol／L，最合适的温度范围为25℃～30℃，最合适施药期为一叶期至三叶期。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 酰胺类除草剂的种类及其作用机理
• 1.1.1 酰胺类除草剂的种类
• 1.1.2 酰胺类除草剂的作用机理
• 1.2 大豆生产田杂草防除
• 1.2.1 大豆田杂草种类
• 1.2.2 大豆田杂草防除
• 1.3 除草剂研究开发的新进展与发展趋势
• 1.4 小分子与DNA相互作用
• 1.4.1 DNA检测方法研究
• 1.4.2 抗肿瘤、抗病毒类药物的作用机理研究
• 1.4.3 抗癌药物筛选
• 1.4.4 人工核酸酶的设计与研究
• 1.5 小分子与DNA相互作用模式
• 1.5.1 非共价结合模式
• 1.5.2 共价结合模式
• 1.6 小分子与DNA相互作用的常用研究方法
• 1.6.1 光谱法
• 1.6.2 足印迹分析技术和序列凝胶电泳
• 1.6.3 电化学方法
• 1.6.4 其他方法
• 1.7 DNA的提取
• 1.7.1 细胞的破碎
• 1.7.2 DNA与蛋白质的分离
• 1.7.3 多糖类杂质的去除
• 1.7.4 DNA与RNA的分离
• 1.7.5 DNA的沉淀
• 1.7.6 DNA纯度的鉴定
• 1.7.7 植物DNA的提取
• 1.8 本论文的构思
• 第2章 早熟禾总DNA的提取和条件优化
• 2.1 实验部分
• 2.1.1 主要仪器
• 2.1.2 主要试剂与溶液
• 2.1.3 实验方法
• 2.2 结果与讨论
• 2.2.1 DNA纯度的鉴定
• 2.2.2 DNA的产率
• 2.2.3 条件优化
• 2.2.4 紫外吸收光谱
• 2.2.5 琼脂糖凝胶电泳
• 2.3 小结
• 第3章 黄豆DNA的提取
• 3.1 实验部分
• 3.1.1 仪器与试剂
• 3.1.2 实验方法
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 提取条件的优化
• 3.2.2 黄豆DNA的紫外光谱
• 3.2.3 琼脂糖凝胶电泳
• 3.3 小结
• 第4章 苯噻草胺与DNA作用的紫外吸收光谱
• 4.1 实验部分
• 4.1.1 主要仪器
• 4.1.2 主要试剂与溶液配制
• 4.1.3 实验方法
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 早熟禾DNA和黄豆DNA的紫外吸收曲线
• 4.2.2 苯噻草胺的紫外吸收光谱
• 4.2.3 苯噻草胺浓度对DNA紫外吸收的影响
• 4.2.4 苯噻草胺对变性早熟禾DNA紫外吸收的影响
• 4.2.5 苯噻草胺对不同生长期早熟禾和黄豆DNA紫外吸收的影响
• 4.2.6 温度的影响
• 4.2.7 时间的影响
• 4.2.8 DNA浓度和作用时间对苯噻草胺紫外吸收的影响
• 4.2.9 萘与早熟禾和黄豆DNA的作用
• 4.2.10 2-氨基苯并噻唑与早熟禾和黄豆DNA的作用
• 4.2.11 8-氨基喹啉与早熟禾和黄豆DNA的作用
• 4.2.12 8-羟基喹啉与早熟禾和黄豆DNA的作用
• 4.3 小结
• 结论
• 参考文献
• 致谢