促红细胞生成素及其受体在蕈样肉芽肿患者皮损中的表达

论文摘要

前言促红细胞生成素（erythropoietin，Epo）的基本功能是促进红系祖细胞增生和分化，Epo与其受体（erythropoetin receptor，EpoR）结合发挥作用。近些年的研究发现EpoR除在红系祖细胞表达外，还可在多种非造血组织中表达，这表明Epo的作用并不局限于造血组织，因此Epo是很可能一种作用广泛和多效的细胞因子。近来的研究发现Epo和EpoR在多种类型的恶性肿瘤细胞及其来源的细胞系表达，并发现恶性肿瘤内存在的自分泌或旁分泌Epo-EpoR信号与恶性肿瘤的生物学行为改变有关，如促进肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤细胞凋亡和降低肿瘤细胞对放化疗的敏感性。目的目前对Epo和EpoR在蕈样肉芽肿（mycosis fungoides，MF）患者皮损中淋巴细胞的表达国内外尚未有研究报道，本文拟采用免疫组化方法（S-P法）对MF患者皮损中淋巴细胞Epo及EpoR的表达情况进行初步研究。方法一、临床标本的选择选取MF和炎症性皮肤病（inflammatory dermatosis，ID）病例活检标本，MF组16例，包括早期（斑片或斑块期）12例和肿瘤期4例；ID组15例，包括银屑病6例、湿疹4例和扁平苔藓5例。所有入选病例均由3位皮肤病理医生阅读HE染色切片后明确诊断。入选患者均无明显心、脑、肝及肾等脏器病变和外周血异常，两组病例在年龄和性别构成比方面具有可比性。二、免疫组化方法（S-P法）将入选标本蜡块切成5μm厚切片，经过二甲苯和梯度酒精脱蜡后在PH值为6.0的柠檬酸缓冲液中进行抗原修复，然后用3％H2O2溶液孵育以消除内源性过氧化物酶活性，准备染色。主要试剂为：Epo抗体（兔源性多克隆抗体，H-162，1：200稀释；Santa Cruz biotechnologies）、EpoR抗体（兔源性多克隆抗体，C-20，1：400稀释；Santa Cruz biotechnologies）、免疫组化染色试剂盒（美国ZYMED公司生产SP-9000）和显色剂DAB（北京中杉生物技术有限公司提供），按照用法指导操作。免疫组化染色后用苏木素复染，塑胶封片待观察。三、免疫组化染色对照以侵袭性恶性黑素瘤标本作为阳性对照，以PBS代替Epo和EpoR抗体作为阴性对照。四、结果判定使用共览显微镜（Olympus BX50）观察HE切片及免疫组化染色结果。1、判定标准Epo染色标本，细胞胞浆表达为阳性；EpoR染色标本，细胞胞浆或胞膜表达均为阳性。2、评分标准采用盲法，由3位病理医生对2组免疫组化染色切片进行半定量评分。淋巴细胞无着色记为0分，胞浆局部细小颗粒着色视为轻度表达并记为1分，胞浆中等细小颗粒着色或局部粗大颗粒着色视为中度表达并记为2分，胞浆弥漫性细小颗粒着色或明显粗大颗粒着色视为强表达并记为3分。每个视野（×100）的淋巴细胞染色积分=1×轻度表达％+2×中度表达％+3×强表达％，每张切片随机选取3个视野，取其平均值为其积分。五、统计方法采用SPSS 11.5统计分析软件处理数据，P≤0.05认为有统计学差异。结果MF早期病例组（n=12）与ID组（n=15）相比，淋巴细胞Epo及EpoR表达水平明显增强，p值分别为0.021和0.013，有统计学差异；MF组（n=16）与ID组（n=15）相比，淋巴细胞Epo及EpoR表达水平显著增强，p值分别为0.005和0.003，有显著统计学差异。结论Epo-EpoR信号可能参与了MF的发病过程。

论文目录

• 一、摘要
• 中文论著摘要
• 英文论著摘要
• 二、英文缩略语
• 三、论文
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 四、本研究创新性的自我评价
• 五、参考文献
• 六、附录
• 综述
• 在学期间科研成绩
• 致谢
• 个人简介