XRCC2、XRCC5基因多态性与肺癌的关联研究

论文摘要

目的:肺癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,大约占肿瘤整体死亡人数的17%。尽管在过去几十年中,肺癌的诊断及治疗方面已取得巨大进展,但对于肺癌患者总的预后仍未有明显改善,其5年生存率低于15%,所以预防和早期诊断是提高肺癌患者存活率的关键。目前,除了吸烟是明确的影响因素外,肺癌遗传易感性所起的作用也逐渐为人们所重视,而基因的单核苷酸多态性是遗传易感的重要物质基础。随着分子生物学技术的发展,单核苷酸多态性已经能够作为生物学标记物进行检测,这就使得我们能利用这些标记物来筛检肺癌易感人群,从而为肺癌的预防和早期诊断提供依据。DNA双链断裂修复基因具有高度多态性。DNA双链断裂修复基因的多态性可使机体修复DNA双链断裂的能力有所不同,从而导致基因的稳定性和细胞的癌变率有所改变。研究表明,DNA修复能力低于一般人群平均水平的个体对肿瘤易感。DNA修复基因多态性引起的DNA修复能力的差异,可能是决定肺癌遗传易感性的重要因素。因此,对DNA双链断裂修复基因多态性与肺癌发生、发展关系的研究将对肺癌的预防和治疗具有重要指导意义。本研究旨在探讨中国北方人群中DNA双链断裂修复基因XRCC2 C41657T、G4234C多态性和XRCC5基因C74468A、G74582A多态性与肺癌易感性的关系。方法:采用基于医院的病例-对照研究方法,收集271例肺癌患者（107例鳞癌、80例腺癌、32例腺鳞癌、52例小细胞癌）和280例健康对照个体,采集静脉抗凝血5ml,同时记录其病史及个人相关资料。以蛋白酶K消化-饱和氯化钠盐析法提取外周血白细胞DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP）和引物引入限制性内切酶分析-聚合酶链反应（primer-introduced restriction analysis- polymerase chain reaction, PIRA-PCR ）方法检测XRCC2 C41657T、G4234C多态位点和XRCC5 C74468A、G74582A多态位点的基因型,比较肺癌组与健康对照组之间等位基因及基因型分布。数据统计分析采用SPSS 11.5版软件包（SPSS Company, Chicago, Illinois, USA）进行, P<0.05认为有统计学意义。比较各位点基因型频率的观察值与预期值并进行χ2检验行Hardy-Weinberg平衡分析（http://www.kursus.kvl.dk/shares/ vetgen /Popgen/ genetik/applets/kitest. htm）。病例组与对照组的等位基因和基因型分布比较采用R×C表χ2检验。单体型频率分析采用EH软件（1.2 version,Rockefeller University,New York）。以非条件Logistic回归法计算经性别、年龄、吸烟状况校正的相对风险度的比值比（odds ratio, OR）及其95%可信区间（confidence interval, CI）。结果:1肺癌组吸烟个体的比例（65.7%）明显高于对照组（42.9%） （χ2=28.9,P<0.05） ;吸烟可显著增加肺癌的发病风险（经年龄、性别校正OR=3.47,95% CI =2.28～5.29）。2在健康对照组中,XRCC2 C41657T多态性位点的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡（P>0.05）。XRCC2 C41657T多态性位点的T等位基因频率在肺癌组为20.8%,显著高于健康对照组的12.9%（χ2=12.59,P<0.05）。两组之间的3种基因型（C/C、C/T、T/T）分布亦有显著性差异（χ2=12.20,P<0.05）。与C/C基因型相比,C/T基因型和携带T等位基因的基因型（C/T+T/T）可显著增加肺癌的发病风险（经性别、年龄和吸烟校正OR分别为1.66和1.77,95%CI分别为1.12～2.48和1.21～2.60）。根据肺癌病理类型进行分层分析发现:XRCC2 C41657T多态可能与肺腺癌的发病风险相关;与C/C基因型相比,C/T基因型和携带T等位基因的基因型（C/T+T/T）可显著增加肺腺癌的发病风险（经性别、年龄和吸烟校正OR分别为2.51和2.59,95%CI分别为1.43～4.39和1.51～4.45）。根据个体吸烟情况进行分层分析发现:XRCC2 C41657T多态位点可能与不吸烟人群的肺癌发病风险相关;与C/C基因型相比,C/T基因型和携带T等位基因的基因型（C/T+T/T）可显著增加不吸烟人群患肺癌的风险（经性别和年龄校正OR分别为2.56和2.46;95%CI分别为1.41～4.68和1.38～4.38）。3在健康对照组中,XRCC2 G4234C SNP的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡（P>0.05）。G4234C多态位点的G/G、G/C、C/C基因型和G、C等位基因分布与健康对照组相比均无显著性差异（P>0.05）。根据肺癌病理类型进行分层分析发现:XRCC2 G4234C多态可能与肺小细胞癌的发病风险相关;与G/G基因型相比,携带C等位基因的基因型（G/C+C/C）可使个体患肺小细胞癌的风险增加约2倍（经性别、年龄和吸烟校正OR为1.92,95%CI为1.03～3.60）。4应用EH软件对XRCC2基因两个SNP位点联合分析发现,肺癌组与健康对照组的4种单体型分布具有显著性差异（χ2=12.90, P<0.05）,其中41657T/4234G单体型频率在肺癌组为17.8%,显著高于健康对照组的11.0%（χ2=10.80,P<0.05）。与41657C/4234G单体型相比,41657T/4234G单体型可显著增加肺癌的发病风险（OR=1.79,95%CI=1.26～2.53）。5健康对照组中的XRCC5基因两个多态性位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡（P>0.05）。XRCC5基因C74468A SNP基因型和等位基因型总体分布在肺癌组和健康对照组之间均无显著性差异（P>0.05）。根据病理类型和吸烟状况进行分层分析,未发现XRCC5 C74468A多态对肺癌发病风险的影响。6 XRCC5基因G74582A SNP基因型和等位基因型总体分布在肺癌组和健康对照组之间均无显著性差异（P>0.05）。根据病理类型和吸烟状况进行分层分析,亦未发现XRCC5 C74468A多态对肺癌发病风险的影响。7应用EH对XRCC5基因C74468A和G74582A SNP位点进行的联合分析显示,人群中最常见的单体型是74468C/74582A,其在健康对照组中的频率为52.5%。在肺癌组及健康对照组中,4种单体型分布无显著性差异（P>0.05）。结论:1吸烟显著增加肺癌的发病风险。2 XRCC2 C41657T多态与肺癌的发病风险相关,进一步分析发现,这种作用在肺腺癌组更加明显。C/T基因型和携带T等位基因的基因型（C/T+T/T）可显著增加肺癌尤其是肺腺癌的发病风险。3 XRCC2 C41657T多态位点的C/T基因型和携带T等位基因的基因型（C/T+T/T）可显著增加不吸烟人群患肺癌的风险。4 XRCC2 G4234C多态与肺小细胞癌的发病风险相关,携带C等位基因的基因型（G/C+C/C）可显著增加肺小细胞癌的发病风险。5 XRCC2 C41657T、G4234C两个多态位点联合分析显示:41657T/4234G单体型可显著增加肺癌的发病风险。6 XRCC5 C74468A、G74582A多态性与肺癌易感性之间无相关性;XRCC5基因这两个多态位点的联合分析亦未发现其单体型与肺癌易感性相关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 XRCC2、XRCC5 基因多态性与肺癌的关联研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 非同源末端连接及其基因多态性与肿瘤关系的研究进展
• 致谢
• 个人简历