论文摘要
苹果褪绿叶斑病毒（Apple chlorotic leaf spot virus, ACLSV）、苹果茎沟病毒（Apple stem grooving virus, ASGV）和苹果茎痘病毒（Apple stem pitting virus, ASPV）是世界仁果类果树上普遍发生的三种潜隐病毒,我国主栽的梨品种的平均带病毒率为86.3%。根据果树病毒病通过嫁接传染等特点,目前主要通过栽培无病毒苗木减轻病毒病的危害。本研究以同时带有这三种病毒的沙梨离体植株为材料,采用变温热处理结合茎尖培养方法进行病毒脱除试验。1.对采集的21个沙梨品种的枝条材料进行病毒检测,结果显示所有材料均带至少一种潜隐病毒,其中ACLSV的带毒率为90.48%, ASGV 85.71%, ASPV 42.86%。通过茎尖培养（诱导分化培养基为MS+0.2mg/L IBA+1.0mg/L 6-BA,琼脂5.4g/L,蔗糖30g/L, pH5.8）方法处理21个沙梨品种251个茎尖,共获得20个沙梨品种366株离体植株。结果显示,不同沙梨品种的诱导分化成活率和茎尖分化系数有异,安农一号、清香、桂冠和丰水等5个品种的成活率最高,达到100%,而金水一号未成活。中梨一号的茎尖分化系数最高,新高其次,桂冠和翠冠最低。对15个品种离体植株79个芽系进行病毒检测的结果显示,ACLSV检出率为67.09%（53/79）, ASGV 86.08%（68/79）, ASPV 32.91%（26/79）.2.采用变温热处理（34℃/40℃,8h/16h交替）结合茎尖（大小约1 mm）培养对8个沙梨品种的1014株带毒离体植株进行病毒脱除处理,共获得8个沙梨品种的69株脱毒材料。结果显示不同品种处理后的成活率和增殖系数有异,成活率中梨一号为14.7%,清香和金秋为9.0%,黄金为2.11%。增殖系数圆黄为2.7,新高为2,丰水、爱甘水和黄金等3个品种没有增殖。通过RT-PCR等方法对8个沙梨品种的65株脱毒材料进行病毒检测的结果显示,有5个沙梨品种的39株离体植株不带病毒,且不同病毒的脱除率有差异,ASGV为70.77%（46/65）, ACLSV 90.77%（59/65）, ASPV 95.38%（62/65）。