本文主要研究内容
作者左园园（2019）在《红汁乳菇中麦角甾醇含量测定及其对微生物活性初步研究》一文中研究指出：食用菌分布广泛,次级代谢产物丰富,表现出多种良好的生理活性。而麦角甾醇作为真菌中的主要甾醇由于良好的抗炎、抗肿瘤和免疫调节作用受到了人们的认可。本文对湖南特色药食两用红汁乳菇从原料测序,麦角甾醇含量检测,分离提纯到对微生物作用试验进行了完整的研究。首先采用ITS测序分析方法对采集样品进行种属鉴定。提取样品的DNA利用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计进行检测和定量。以ITS2为目标区域设计相应引物,进行PCR扩增。Miseq为平台完成测序,并最终确定所检测的7种产地样品中,红色的5种样品为红汁乳菇Lactarius hatsudake,白色的2种样品为橙色乳菇Lactarius akahatsu。通过HPLC分析,建立食用菌中麦角甾醇含量检测方法,并检测了湖南省内30种不同产地红汁乳菇中麦角甾醇的含量。在流动相为甲醇,流速1 mL/min,检测波长282 nm的条件下,麦角甾醇浓度在5～400 μg/mL范围内呈良好的线性关系,回归方程为:Y=32529·X+6006.6,R2=0.9999。所建立方法中麦角甾醇理论塔板数大于5000,分离度大于2,拖尾因子小于2,检测限为30ng/mL,信噪比S/N>3,定量限为100 ng/mL,信噪比S/N>10。该方法回收率在98～101%范围内,回收率的相对标准偏差RSD小于2%,重复性、重现性和精密度良好,是一种可靠有效的食用菌中麦角甾醇含量检测方法。利用该方法对湖南省内红汁乳菇进行检测,结果显示麦角甾醇含量在2 mg/g左右,不同产地红汁乳菇中麦角甾醇含量有所差异。通过对提取剂、提取次数、超声时间和料液比的单因素实验确定了超声波提取红汁乳菇中麦角甾醇的最佳条件为:料液比1:40,甲醇超声提取90min,提取次数1次。采用溶剂结晶法纯化除杂得到麦角甾醇的粗结晶,再利用制备型高效液相色谱最终制备得到纯度较高的单体化合物。经过紫外、红外、质谱等分析手段,将制备得到的物质与麦角甾醇标准品进行比较,确定该化合物即为麦角甾醇单体化合物,纯度在90%以上。通过打孔法试验证明了麦角甾醇对3种肠道细菌(大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌)和4种真菌(寄生曲霉、红曲霉、青霉、黄曲霉)均没有明显的抑制作用。二倍稀释法试验结果表明麦角甾醇对结核杆菌H37Ra也没有明显的抑制效果。但是转化实验证明四种细菌都能对麦角甾醇进行利用和转化,其中金黄色葡萄球菌和结核杆菌H37Ra的转化作用比较显著,金黄色葡萄球菌对麦角甾醇24小时利用了 27.88%±3.88%,48小时后转化率升高到36.51%±8.36%,而沙门氏菌的利用率较低,24 h和48 h的利用率分别是10.36%±5.10%和22.36%±4.47%,大肠杆菌的转化率最低,培养24h后麦角甾醇的含量只减少了3.70%±±.00%,到48h后也只是转化了16.37%±3.89%。而结核杆菌生长周期较长,在培育6天后,麦角锴醇的转化率也达到了26.56%±5.58%。金黄色葡萄球菌和结核杆菌对麦角甾醇的转化利用作用更加明显,结合已有的研究推测这一结果的原因可能是麦角甾醇极难溶于水,金黄色葡萄球菌作为革兰氏阳性菌,细胞表面含有更多亲脂成分,这使得其对麦角甾醇的利用率更高。而结核杆菌细胞壁肽聚糖外包裹着大量的脂质,也有利于它对麦角甾醇的接触和利用。
Abstract
shi yong jun fen bu an fan ,ci ji dai xie chan wu feng fu ,biao xian chu duo chong liang hao de sheng li huo xing 。er mai jiao zai chun zuo wei zhen jun zhong de zhu yao zai chun you yu liang hao de kang yan 、kang zhong liu he mian yi diao jie zuo yong shou dao le ren men de ren ke 。ben wen dui hu na te se yao shi liang yong gong zhi ru gu cong yuan liao ce xu ,mai jiao zai chun han liang jian ce ,fen li di chun dao dui wei sheng wu zuo yong shi yan jin hang le wan zheng de yan jiu 。shou xian cai yong ITSce xu fen xi fang fa dui cai ji yang pin jin hang chong shu jian ding 。di qu yang pin de DNAli yong qiong zhi tang ning jiao dian yong he zi wai fen guang guang du ji jin hang jian ce he ding liang 。yi ITS2wei mu biao ou yu she ji xiang ying yin wu ,jin hang PCRkuo zeng 。Miseqwei ping tai wan cheng ce xu ,bing zui zhong que ding suo jian ce de 7chong chan de yang pin zhong ,gong se de 5chong yang pin wei gong zhi ru gu Lactarius hatsudake,bai se de 2chong yang pin wei cheng se ru gu Lactarius akahatsu。tong guo HPLCfen xi ,jian li shi yong jun zhong mai jiao zai chun han liang jian ce fang fa ,bing jian ce le hu na sheng nei 30chong bu tong chan de gong zhi ru gu zhong mai jiao zai chun de han liang 。zai liu dong xiang wei jia chun ,liu su 1 mL/min,jian ce bo chang 282 nmde tiao jian xia ,mai jiao zai chun nong du zai 5～400 μg/mLfan wei nei cheng liang hao de xian xing guan ji ,hui gui fang cheng wei :Y=32529·X+6006.6,R2=0.9999。suo jian li fang fa zhong mai jiao zai chun li lun da ban shu da yu 5000,fen li du da yu 2,tuo wei yin zi xiao yu 2,jian ce xian wei 30ng/mL,xin zao bi S/N>3,ding liang xian wei 100 ng/mL,xin zao bi S/N>10。gai fang fa hui shou lv zai 98～101%fan wei nei ,hui shou lv de xiang dui biao zhun pian cha RSDxiao yu 2%,chong fu xing 、chong xian xing he jing mi du liang hao ,shi yi chong ke kao you xiao de shi yong jun zhong mai jiao zai chun han liang jian ce fang fa 。li yong gai fang fa dui hu na sheng nei gong zhi ru gu jin hang jian ce ,jie guo xian shi mai jiao zai chun han liang zai 2 mg/gzuo you ,bu tong chan de gong zhi ru gu zhong mai jiao zai chun han liang you suo cha yi 。tong guo dui di qu ji 、di qu ci shu 、chao sheng shi jian he liao ye bi de chan yin su shi yan que ding le chao sheng bo di qu gong zhi ru gu zhong mai jiao zai chun de zui jia tiao jian wei :liao ye bi 1:40,jia chun chao sheng di qu 90min,di qu ci shu 1ci 。cai yong rong ji jie jing fa chun hua chu za de dao mai jiao zai chun de cu jie jing ,zai li yong zhi bei xing gao xiao ye xiang se pu zui zhong zhi bei de dao chun du jiao gao de chan ti hua ge wu 。jing guo zi wai 、gong wai 、zhi pu deng fen xi shou duan ,jiang zhi bei de dao de wu zhi yu mai jiao zai chun biao zhun pin jin hang bi jiao ,que ding gai hua ge wu ji wei mai jiao zai chun chan ti hua ge wu ,chun du zai 90%yi shang 。tong guo da kong fa shi yan zheng ming le mai jiao zai chun dui 3chong chang dao xi jun (da chang ai xi shi jun 、jin huang se pu tao qiu jun 、shu shang han sha men shi jun )he 4chong zhen jun (ji sheng qu mei 、gong qu mei 、qing mei 、huang qu mei )jun mei you ming xian de yi zhi zuo yong 。er bei xi shi fa shi yan jie guo biao ming mai jiao zai chun dui jie he gan jun H37Raye mei you ming xian de yi zhi xiao guo 。dan shi zhuai hua shi yan zheng ming si chong xi jun dou neng dui mai jiao zai chun jin hang li yong he zhuai hua ,ji zhong jin huang se pu tao qiu jun he jie he gan jun H37Rade zhuai hua zuo yong bi jiao xian zhe ,jin huang se pu tao qiu jun dui mai jiao zai chun 24xiao shi li yong le 27.88%±3.88%,48xiao shi hou zhuai hua lv sheng gao dao 36.51%±8.36%,er sha men shi jun de li yong lv jiao di ,24 hhe 48 hde li yong lv fen bie shi 10.36%±5.10%he 22.36%±4.47%,da chang gan jun de zhuai hua lv zui di ,pei yang 24hhou mai jiao zai chun de han liang zhi jian shao le 3.70%±±.00%,dao 48hhou ye zhi shi zhuai hua le 16.37%±3.89%。er jie he gan jun sheng chang zhou ji jiao chang ,zai pei yo 6tian hou ,mai jiao kai chun de zhuai hua lv ye da dao le 26.56%±5.58%。jin huang se pu tao qiu jun he jie he gan jun dui mai jiao zai chun de zhuai hua li yong zuo yong geng jia ming xian ,jie ge yi you de yan jiu tui ce zhe yi jie guo de yuan yin ke neng shi mai jiao zai chun ji nan rong yu shui ,jin huang se pu tao qiu jun zuo wei ge lan shi yang xing jun ,xi bao biao mian han you geng duo qin zhi cheng fen ,zhe shi de ji dui mai jiao zai chun de li yong lv geng gao 。er jie he gan jun xi bao bi tai ju tang wai bao guo zhao da liang de zhi zhi ,ye you li yu ta dui mai jiao zai chun de jie chu he li yong 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中南林业科技大学的左园园，发表于刊物中南林业科技大学2019-09-29论文，是一篇关于红汁乳菇论文,麦角甾醇论文,提取纯化论文,微生物论文,中南林业科技大学2019-09-29论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中南林业科技大学2019-09-29论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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