绿僵菌粗毒素的提取、分离和结构鉴定及对几种重要害虫的毒性测定

论文摘要

本文选用了五株源于不同采集地、分离自不同种蝗虫的绿僵菌菌株,研究了它们的粗毒素产量以及代谢产物对东亚飞蝗的致死性;研究了两种绿僵菌菌株粗毒素对东亚飞蝗和亚洲玉米螟的致死性;研究了一种绿僵菌菌株粗毒素对小菜蛾的致死性;同时,采用薄层层析法鉴定了五种菌株粗毒素中的绿僵菌素A和B。主要研究结果如下:1、采用种子培养、液体发酵、过滤、萃取、减压浓缩等步骤提取粗毒素,其中粗毒素的产量以LF07菌株的最多,LD04菌株的次之,LB08菌株的最少,单位产量分别为0.728 g/L、0.479 g/L和0.084 g/L。2、5株绿僵菌经真空抽滤后获得的无孢子代谢产物注射到5龄蝗蝻,其致死作用以LF07菌株的效果最好,LD04菌株的次之,平均死亡率分别为76.67%和60%;致死中时LT50分别为3.7545天和6.3232天。LA06菌株代谢产物的毒性最差,平均死亡率仅6.67%。3、菌株LD04和LF07的粗毒素对东亚飞蝗的致死性测定结果表明,LD04和LF07的粗毒素对东亚飞蝗没有触杀活性;在血腔注射实验中,LD04和LF07的粗毒素对5龄蝗蝻的致死中浓度LC50分别为0.0843 g/mL和0.1545g/mL。当LD04和LF07的粗毒素的稀释浓度为0.15g/mL时,5龄蝗蝻的LT50分别为1.7768天和5.8660天;当处理浓度为0.10g/mL时,LT50分别为5.0519天和8.4806天。4、菌株LD04和LF07的粗毒素对亚洲玉米螟的致死测定结果如下:采用浸渍法,在菌株LD04和LF07两种粗毒素分别作用下,玉米螟三龄幼虫的LC50分别为0.0668 g/mL和0.0747g/mL。当处理浓度为0.10g/mL时,LT50分别为1.9249天和4.0513天。5、菌株LD04的粗毒素对小菜蛾的致死测定结果如下:采用浸渍法,小菜蛾三龄幼虫的LC50为3.72mg/mL,当处理浓度分别为8mg/mL,6mg/mL和4mg/mL时,其致死中时LT50分别为0.0144天,0.2695天和3.5573天。6、薄层层析法的鉴定结果表明,菌株LD04和LF07的粗毒素中含有绿僵菌素A和B,其中LD04菌株中的A和B含量分别为0.1 g/L和0.04g/L;LF07菌株中的A和B含量分别为0.07 g/L和0.02g/L。用此方法无法检测到LA06、LB08和LC11这三种菌株中含有绿僵菌素A和B。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1 虫生真菌分泌的毒素分类
• 1.1 低分子毒素
• 1.2 高分子蛋白毒素
• 2 绿僵菌素的分子结构与种类
• 3 绿僵菌素的分离纯化
• 3.1 国内研究进展
• 3.2 国外研究进展
• 4 绿僵菌素对昆虫的生物活性
• 5 绿僵菌素的产量动态
• 6 绿僵菌素的作用机制
• 6.1 绿僵菌素对昆虫器官系统的影响
• 6.2 绿僵菌素对昆虫细胞组织的作用
• 7 展望
• 第二章 五株绿僵菌菌株粗毒素的提取及产量
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 第三章 五株绿僵菌菌株的代谢产物抽滤液对东亚飞蝗的注射毒性研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 第四章 两种菌株LD04 和LF07 的粗毒素对东亚飞蝗的致死性测定
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 第五章 两种菌株LD04和LF07的粗毒素对亚洲玉米螟的致死性测定
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 第六章 菌株LD04 的粗毒素对小菜蛾的致死性测定
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 第七章 薄层色谱法鉴定绿僵菌素A 和B
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 参考文献（References）
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文