论文摘要
背景及目的：肝细胞癌（HCC）是世界范围内常见的恶性肿瘤之一,发病率约占人类恶性肿瘤的4%,具有较高的发病率和死亡率,每年至少有315,000名患者死于肝癌。目前的治疗手段以手术切除治疗为主,但是由于其分子生物学和独特的解剖学特性,手术切除率并不高,即使进行手术治疗,术后5年生存率也只有25%-29%,而且术后没有其它较为有效的化疗及其它辅助性治疗手段。目前,肝癌的治疗仍是世界性的难题。研究发现KISS-1和COX-2基因是肿瘤相关性基因,与肿瘤关系密切。其中KISS-1是一种肿瘤转移抑制基因,能编码mestastin蛋白,该蛋白能与G-蛋白偶联受体特异性结合,作用于细胞中的效应分子,改变细胞内信使的含量与分布,通过细胞内信使作用于相应的靶分子,抑制肿瘤细胞的浸润和转移。大量研究发现KISS-1的低表达或表达缺失与多种肿瘤肿瘤侵袭、转移及预后关系密切。如：乳腺癌、食管癌、胃癌、结肠癌等。而COX是合成前列腺素过程中的一个关键限速酶,它有两同工酶COX-1和COX-2。正常状态下,COX-2一般不表达,只有当细胞受到刺激时,COX-2转录翻译才开始增多。在肿瘤细胞中,细胞处在一种非正常状态,COX-2呈高表达。研究显示,COX-2在诸如：胃癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌等组织中呈高表达。它的高表达与肿瘤关系密切。在我国,肝癌的发生一般都伴有肝硬化,大都经历由正常肝脏到肝硬化,最终发展成肝癌的过程。为此,本实验拟采RT-PCR对KISS-1和COX-2从基因的水平检测它们在癌组、癌旁肝硬化组和正常组的表达情况,分析它们在肝癌中发挥的作用及与肿瘤浸润、转移等方面的关系。标本收集与实验方法：1.收集2009年5月—2010年7月间,郑州大学第二附属医院普外科,接受手术治疗的病例标本。收集的全部标本符合实验要求：有详细的临床病历资料和明确的病理诊断,且术前未做过放疗、化疗及其它辅助性的治疗。标本包括肝癌组（39例）（以下简称为肝癌组）、癌旁肝硬化组（30例）（以下简称为癌旁组）和正常肝脏组（10例）。2.采用RT-PCR对KISS-1和COX-2从基因的水平检测它们在癌组、癌旁组和正常组的表达情况,分析它们在肝癌中表达的意义及与临床病理学特征及分级等方面的关系。并对KISS-1和COX-2在癌组中的表达水平进行相关性分析。3.使用SPSS13.0统计学软件,计量数据用x±s,统计学方法使用方差分析、t检验、LSD-t检验和Pearson假设检验。a=0.05,P<0.05有统计学意义。实验结果1.KISS-1mRNA在所有的标本中都有表达。在癌组中的表达水平明显低于肝硬化组和正常组,都有统计学意义（P<0.05）。而癌旁组和正常组之间无统计学意义（P>0.05）。2.COX-2mRNA在正常的肝脏组织中不表达；在癌组中的表达水平明显高于正常组,且有统计学意义（P<0.05）；也高于癌旁组,但没有统计学意义（P>0.05）。而肝硬化组的表达水平明显高于正常组,且有统计学意义（P<0.05）。3.①KISS-1mRNA在肝癌中呈低表达,而且其表达水平与患者的年龄、性别HBsAg及肿物大小等无关,其表达水平的差异没有统计学意义（p>0.05）。但是与甲胎蛋白的水平、有无包膜、门静脉癌栓及Edmenson分级有关（p<0.05）即AFP水平越高、没有包膜、伴癌栓和分级越高,其表达水平越低,反之表达水平越高。②COX-2mRNA在肝细胞癌肿呈高表达,其表达水平与患者的年龄、性别、AFP水平、有无包膜、是否伴门静脉癌栓、HBsAg情况、肿物的大小和Edmenson分级等无关（p>0.05）。4. KISS-1mRNA和COX-2mRNA在肝癌中的表达水平呈负相关（r=-0.215,p<0.05）。结论1.KISS-1mRNA低表达与肝癌的进展密切相关,在肿瘤的浸润转移过程中发挥重要的作用。2.COX-2mRNA的高表达与肝癌密切相关,但与年龄、性别、肿瘤大小、转移与否等临床病理特征和临床分期等参数均无关。3.KISS-1mRNA和COX-2mRNA的表达水平的呈负相关性,两者存在反馈性的调节机制。