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家兔乳房炎模型建立及对机体内抗氧化指标和急性期蛋白表达的影响

2020-12-14阅读(1026)

家兔乳房炎模型建立及对机体内抗氧化指标和急性期蛋白表达的影响

论文摘要

乳房炎是奶牛业生产中危害最大的疾病之一。目前,应用动物模型进行研究是解决细菌性奶牛乳房炎的发病机理和临床症状研究的重要手段。通过动物模型进行乳房炎的研究,不仅可以为疾病的发生、发展以及由此病引发的动物机体组织的改变提供重要线索,而且为新型抗菌药物的开发提供有效信息。为了寻找更为典型廉价、易于建立的乳房炎动物模型,同时也为乳房炎的发病机理研究、诊断、药物治疗效果评价及预后提供科学依据,进行了以下研究：1.家兔乳头管灌注金黄色葡萄球菌和大肠杆菌建立乳房炎动物模型研究48只分娩后7d的健康新西兰泌乳家兔,随机分成空白对照组（T1组）、金黄色葡萄球菌组（T2组）和大肠杆菌组（T3组）。分别按每个乳腺1.5×105CFU/0.5mL量,向家兔乳头管内灌注无菌肉汤、金黄色葡萄球菌菌液和大肠杆菌菌液,于灌注无菌肉汤和细菌前2h,灌注后.24h、48h、72h、5d和7d,测定家兔体温,观察活体家兔乳房临床质地变化,并采集家兔耳缘静脉血和乳腺组织,测定全血中LYM和GRA总数,以及血清中CRP和TNF-α含量与乳腺组织中TNF-α含量,制作乳腺组织病理切片并观察乳腺组织的动态病理变化。结果显示：（1）家兔乳头管灌注两种细菌后体温均出现了升高趋势,血液中WBC、LYM和GRA总数也出现了相应的变化,表明机体出现炎症反应。（2）T2组和T3组血清TNF-α含量在灌注细菌后均呈下降趋势,T2组组织中TNF-α含量在灌注细菌后6h时显著下降（P<0.05）,48h时显著升高（P<0.05）,T3组组织中TNF-α含量在灌注细菌24h时显著升高（P<0.05）；机体炎症出现时,血清中CRP含量相应程度的升高。（3）在家兔乳头管灌注细菌12h后均出现了乳房红肿、质地变硬等临床症状,乳腺组织12h时开始出现大量乳腺上皮脱落和炎性细胞增多等病理变化。上述三点表明成功建立了家兔乳房炎模型。2.家兔乳头管灌注金黄色葡萄球菌和大肠杆菌对血清中SOD、GSH-PX和NOS活性及NO含量的影响在研究1的基础上,测定血清中SOD、GSH-PX和NOS活性及NO含量,分别分析不同细菌感染的乳房炎指标之间的差异性。结果显示：（1）灌注细菌后,T2组血清SOD和GSH-PX活性显著升高（P<0.05）,T3组血清SOD活性显著下降（P<0.05）,而GSH-PX活性显著升高（P<0.05）,T1组血清中SOD活性变化差异不显著（P>0.05）。这表明,家兔感染金黄色葡萄球菌和大肠杆菌性乳房炎时,机体内SOD和GSH-PX活性不同。（2）灌注细菌后,T2组血清NO含量和iNOS活性显著下降（P<0.05）, TNOS活性显著升高（P<0.05）；T3组血清中NO在72h时显著下降（P<0.05）, TNOS活性稍有升高趋势,iNOS活性12h时显著下降（P<0.05）；T1组血清中NO含量和TNOS活性显著下降（P<0.05）,iNOS活性在48h时显著升高（P<0.05）。这表明,在金黄色葡萄球菌和大肠杆菌所引起的乳房炎中,NOS活性不同,对机体的NO含量影响不同。3.家兔乳头管灌注金黄色葡萄球菌和大肠杆菌对血清和组织中HP、SAA及S100A12含量的影响在研究1的基础上,测定血清和组织中SAA、HP和S100A12含量,分别分析金黄色葡萄球菌和大肠细菌感染的乳房炎指标之间的差异性。结果显示：（1）T2组血清和组织中SAA含量在接种细菌后6h时显著升高（P<0.05）；T3组血清中SAA含量接种细菌后6h时显著升高（P<0.05）,组织中SAA含量接种细菌后6h时显著下降（P<0.05）,7d时显著升高（P<0.05）；T1组血清中SAA含量在接种无菌肉汤后稍微升高,组织中SAA含量变化不明显。表明SAA对炎症反应敏感。（2）接种细菌后,T2组血清HP含量组内差异不显著（P>0.05）,组织中HP含量升高；T3组血清中HP含量再接种细菌后6h时显著下降（P<0.05）,7d时显著升高（P<0.05）,组织中先升高,之后缓慢下降；T1组变化不明显。表明机体损伤时组织和血清中HP含量出现相应变化。（3）T2组在接种细菌48h后血清中S100A12含量显著升高（P<0.05）,组织中S100A12含量在12h时显著升高（P<0.05）；T3组在接种细菌后血清中S100A12含量变化不明显,组织中S100A12在48h时显著升高（P<0.05）,T2组和T3组差异显著；T1组血清中S100A12显著升高（P<0.05）,组织中S100A12变化不明显。表明在家兔金黄色葡萄球菌和大肠杆菌引起的乳房炎中,组织和血清中的S100A12含量均出现一定变化,金黄色葡萄球菌组和大肠杆菌组差异显著（P<0.05）。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 符号说明
  • 目录
  • 第一章 文献综述
  • 1 乳房炎动物模型研究现状
  • 2 SOD和GSH-PX的抗氧化损伤作用
  • 2.1 超氧化物歧化酶
  • 2.2 谷胱甘肽过氧化物酶
  • 3 NO的基本功能及NOS的合成调节
  • 3.1 一氧化氮
  • 3.2 一氧化氮合酶
  • 4 急性期蛋白在乳房炎中的应用
  • 4.1 结合珠蛋白
  • 4.2 血清淀粉样蛋白A
  • 5 钙粒结合蛋白-C
  • 第二章 乳房炎动物模型的建立
  • 1 试验材料
  • 1.1 试验动物
  • 1.2 主要仪器
  • 2 试验方法
  • 2.1 菌液配制及灌注方法
  • 2.2 血样和乳腺组织的采集
  • 2.3 乳腺组织匀浆的制备
  • 2.4 测定指标及方法
  • 2.4.1 灌注菌液前后体温测定和乳房临床变化观察
  • 2.4.2 灌注菌液前后全血白细胞（WBC）、淋巴细胞（LYM）、中性粒细胞（GRA）总数测定
  • 2.4.3 血清和组织中TNF-α含量测定
  • 2.4.4 C反应蛋白（CRP）含量测定
  • 2.4.5 灌注菌液前后乳腺组织病理学检查
  • 2.5 数据统计分析
  • 3 结果与分析
  • 3.1 临床和生理指标时相的变化
  • 3.1.1 家兔的体温和乳房临床变化
  • 3.1.2 母兔血液白细胞（WBC）、淋巴细胞（LYM）和中性粒细胞（GRA）
  • 3.2 血清和组织中TNF-α含量的动态变化
  • 3.3 血清中CRP含量的动态变化
  • 3.4 家兔乳腺组织病理变化
  • 3.4.1 金黄色葡萄球菌组家兔乳腺组织病理学变化
  • 3.4.2 大肠杆菌组家兔乳腺组织病理学变化
  • 4 讨论
  • 5 小结
  • 第三章 家兔乳头管灌注金葡球菌和大肠杆菌对SOD、GSH-PX、NOS活性和NO含量的影响
  • 1 试验材料
  • 1.1 试验动物
  • 1.2 主要试剂
  • 1.3 主要仪器
  • 2 试验方法
  • 2.1 菌液配制及灌注方法
  • 2.2 血样的采集
  • 2.3 测定指标及方法
  • 2.3.1 血清SOD活性的测定
  • 2.3.2 血清GSH-PX活性的测定
  • 2.3.3 血清NO含量的测定
  • 2.3.4 血清一氧化氮合酶（NOS）活力的测定
  • 2.4 数据统计分析
  • 3 结果与分析
  • 3.1 母兔血清中SOD、GSH-PX活性变化
  • 3.2 血清中NO含量和NOS活性变化
  • 4 讨论
  • 5 小结
  • 第四章 家兔乳头管灌注金葡球菌和大肠杆菌对HP、SAA和S100A12含量的影响
  • 1 试验材料
  • 1.1 试验动物
  • 1.2 主要试剂
  • 1.3 主要仪器
  • 2 试验方法
  • 2.1 菌液配制及灌注方法
  • 2.2 血样和乳腺组织的采集
  • 2.3 乳腺组织匀浆的制备
  • 2.4 测定指标及方法
  • 2.4.1 血清淀粉样蛋白A（SAA）含量测定
  • 2.4.2 结合珠蛋白（HP）含量测定
  • 2.4.3 钙粒结合蛋白C（S100A12）含量测定
  • 2.5 数据统计分析
  • 3 结果与分析
  • 3.1 血清和组织中SAA的含量
  • 3.2 血清和组织中HP的含量
  • 3.3 血清中S100A12的含量
  • 4 讨论
  • 5 小结
  • 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 附图

    • 相关论文文献

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