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鲍鱼菇子实体多糖的分离纯化及其生物活性研究

2020-12-03阅读(721)

鲍鱼菇子实体多糖的分离纯化及其生物活性研究

论文摘要

本研究以鲍鱼菇（Pleurotus abalonus）子实体为材料,经热水提取,95%乙醇沉淀,Sevag法去蛋白,DEAE-sephadex A-25柱层析和Sephadex G-100凝胶柱层析纯化,获得水溶性多糖PPA-2。电泳法鉴定PPA-2为均一组分,红外光谱和紫外光谱扫描结果表明,PPA-2具有多糖的特征吸收峰,不含核酸和蛋白质,Sephadex G-100分子筛层析测得PPA-2相对分子质量约为23KD。同时对PPA-2的生物活性进行了初步研究。本文以瘤重大小判断PPA-2抑瘤效果,以免疫器官指数、巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素IgM水平及迟发型超敏反应（DTH）四项免疫指标检测PPA-2对免疫功能的影响。抑瘤试验结果表明:抑瘤率随PPA-2浓度的增大而增大。低剂量组（50mg/kg）多糖抑瘤效果不显著,中剂量组（75mg/kg）、高剂量组（100mg/kg）多糖表现出非常显著的抑瘤作用（P＜0.01）。说明一定剂量的鲍鱼菇子实体多糖PPA-2能够抑制小白鼠S180肿瘤生长。免疫指标检测结果表明:PPA-2≥50mg/kg能提高荷瘤小白鼠的脾指数（P＜0.01,P＜0.001）,PPA-2≥75mg/kg能提高正常小白鼠的脾指数（P＜0.05,P＜0.01）,PPA-2≥50mg/kg能提高免疫功能低下小白鼠的脾指数（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001）;PPA-2≥50mg/kg能提高正常小白鼠巨噬细胞吞噬率（P＜0.05,P＜0.01）及吞噬指数（P＜0.05,P＜0.001）;PPA-2≥50mg/kg能提高正常小白鼠血清溶血素IgM水平（P＜0.05）;PPA-2≥75mg/kg能增强正常小白鼠迟发型超敏反应（P＜0.05、P＜0.001）。说明一定剂量的鲍鱼菇子实体多糖PPA-2能够增强小白鼠的非特异性及特异性免疫功能。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 中文文摘
  • 目录
  • 第1章 绪论
  • 1.1 食（药）用真菌多糖的提取、分离纯化
  • 1.1.1 食（药）用真菌多糖的提取
  • 1.1.2 食（药）用真菌多糖的分级纯化
  • 1.1.3 食（药）用真菌多糖的纯度鉴定
  • 1.2 食（药）用真菌多糖的测定
  • 1.2.1 食（药）用真菌多糖相对分子质量的测定
  • 1.2.2 食（药）用真菌多糖含量的测定
  • 1.3 食（药）用真菌多糖的生物活性
  • 1.3.1 提高免疫功能
  • 1.3.2 抗肿瘤作用
  • 1.3.3 抗衰老作用
  • 1.3.4 降血糖、降血压、降血脂活性
  • 1.3.5 健胃保肝
  • 1.4 食（药）用真菌多糖的结构及其构效关系
  • 1.4.1 多糖的化学结构
  • 1.4.2 多糖的构效关系
  • 1.5 食（药）用真菌多糖的研究展望
  • 1.6 鲍鱼菇的研究概况
  • 1.7 本研究的意义和内容
  • 第2章 鲍鱼菇子实体多糖的分离纯化及理化性质
  • 2.1 实验材料
  • 2.1.1 材料
  • 2.1.2 主要试剂
  • 2.1.3 主要仪器
  • 2.2 实验方法
  • 2.2.1 鲍鱼菇子实体多糖的分离纯化
  • 2.2.2 PPA-2的糖含量测定
  • 2.2.3 PPA-2的相对分子质量的测定
  • 2.2.4 PPA-2的理化性质定性分析
  • 2.2.5 PPA-2的紫外光谱分析
  • 2.2.6 PPA-2的红外光谱分析
  • 2.3 结果与分析
  • 2.3.1 鲍鱼菇子实体多糖的分离纯化
  • 2.3.2 PPA-2的糖含量
  • 2.3.3 PPA-2相对分子质量的测定
  • 2.3.4 PPA-2的理化性质
  • 2.3.5 PPA-2的紫外光谱分析
  • 2.3.6 PPA-2的红外光谱分析
  • 2.4 讨论
  • 2.5 小结
  • 第3章 鲍鱼菇子实体多糖PPA-2抗肿瘤活性和对免疫功能的影响
  • 3.1 实验材料
  • 3.1.1 材料
  • 3.1.2 实验动物
  • 3.1.3 主要药品
  • 3.1.4 主要试剂的配制
  • 3.1.5 主要仪器
  • 3.2 实验方法
  • 3.2.1 抑瘤试验及荷瘤小白鼠免疫器官指数测定
  • 3.2.2 正常小白鼠免疫器官指数测定
  • 3.2.3 免疫功能低下小白鼠免疫器官指数测定
  • 3.2.4 正常小白鼠巨噬细胞吞噬功能的测定
  • 50)的测定'>3.2.5 正常小白鼠血清溶血素半数溶血值(HC50)的测定
  • 3.2.6 二硝基氟苯诱导的正常小白鼠迟发型超敏反应（DTH）的测定
  • 3.3 结果与分析
  • 3.3.1 PPA-2的抑瘤活性及对荷瘤小白鼠免疫器官指数的影响
  • 3.3.2 PPA-2对正常小白鼠免疫器官指数的影响
  • 3.3.3 PPA-2对免疫功能低下小白鼠免疫器官指数的影响
  • 3.3.4 PPA-2对正常小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
  • 3.3.5 PPA-2对正常小白鼠体内抗体生成的影响
  • 3.3.6 PPA-2对正常小白鼠迟发型超敏反应（DTH）的影响
  • 3.4 讨论
  • 3.5 小结
  • 第4章 结论
  • 4.1 研究结果
  • 4.2 本论文的创新点
  • 4.3 展望
  • 参考文献
  • 攻读学位期间主要科研成果
  • 致谢

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