论文摘要
背景:我国是胃癌高发地区,其死亡率居各类癌症死亡之首。手术、放疗、化疗等传统的胃癌治疗方法效果不理想,5年生存率低、肿瘤复发率高仍是治疗上的难题。许多研究表明环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）在胃癌组织中表达增多,并且与胃癌的生长和转移有密切关系。大量试验研究显示,长期服用非甾体抗炎药（nonsteroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs）可以通过抑制COX-2的活性抑制胃癌的发生发展过程。近年来RNA干涉（RNA interference,RNAi）作为一种崭新的实验方法被广泛应用于基因功能的研究,如能应用特异性小分子干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）抑制胃癌细胞COX-2基因表达,则可抑制胃癌的发生发展,进而为肿瘤的基因治疗提供新的策略和途径。 目的:观察瞬时转染特异性siRNA对胃癌细胞COX-2表达和细胞增殖与凋亡的影响,进而探讨COX-2在胃癌发生中的作用和RNAi对肿瘤的治疗作用。 方法:以胃癌细胞系SGC7901为研究对象,培养后瞬时转染特异性siRNA,转染后72小时用RT-PCR法分别检测RNAi组、无意义组与对照组COX-2 mRNA的表达,用免疫组化法检测三组COX-2蛋白质的表达,流式细胞仪检测三组胃癌细胞周期和凋亡的变化,转染后1周内每天同一时间用MTT法检测三组存活的癌细胞数并计算RNAi组与无意义组的癌细胞相对生存率。 结果:瞬时转染siRNA对癌细胞COX-2 mRNA有明显抑制作用,COX-2蛋白表达下降,癌细胞增殖受到抑制,凋亡增加,但细胞周期无明显变化。 结论:RNAi可有效抑制COX-2的表达,抑制胃癌细胞的增殖,促进肿瘤细胞凋亡;本研究进一步证实COX-2在胃癌的形成中具有重要作用。
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