口蹄疫抗原决定簇融合基因转化水稻的研究

论文题目: 口蹄疫抗原决定簇融合基因转化水稻的研究

论文类型: 硕士论文

论文专业: 细胞生物学

作者: 倪志华

导师: 陈亮

关键词: 口蹄疫抗原决定簇,遗传转化,水稻

文献来源: 厦门大学

发表年度: 2005

论文摘要: 植物疫苗具有生产简单、成本较低、使用安全方便、易贮存等优点,是目前植物基因工程的一个研究热点。本实验目的是将O型和A型口蹄疫的抗原决定簇融合基因O21- O14 -A21-HBcAg通过农杆菌介导法转入粳稻品种日本晴中。目前已建立起高效转化体系,经组织化学及分子生物学方法检测确认获得的再生植株为转基因株系,RT-PCR检测结果表明融合基因已正常转录,并获得了子一代的转基因植株。主要实验结果如下:(1)建立日本晴的遗传转化体系:确定了农杆菌介导的外源基因转入日本晴的最佳转化条件。实验认为在愈伤组织经过干燥预处理,农杆菌液OD600约为0.6,共感染时间为20 min,共培养培养基中AS浓度为50μmol/L的条件下,能够获得较高的转化率。(2)转基因株系的获得:获得207棵再生植株,检测到193棵为转基因株系。再生植株根和叶片经组织化学染色检测到GUS基因的表达,PCR、斑点杂交及Southern杂交证实了外源基因已整合到日本晴基因组中。(3)转录水平的检测:通过RT-PCR检测,判断目的基因已经正常转录。(4)转基因株系子一代的获得:获得52个转基因株系的种子总共892粒,将部分种子萌发,培育成小苗,经组织化学染色和PCR鉴定,证实外源基因已遗传至子一代。

论文目录:

中文摘要

英文摘要

略缩词

1、前言

1.1 口蹄疫研究概况

1.2 转基因植物疫苗研究概况

1.3 口蹄疫植物疫苗的研究进展

1.4 研究转口蹄疫抗原决定簇基因水稻的目的和意义

2、材料和方法

2.1 材料

2.2 方法

2.2.1 日本晴幼胚的组织培养

2.2.2 农杆菌介导的日本晴遗传转化

2.2.3 转化体的筛选鉴定

2.2.4 转基因株系子一代的获得和鉴定

3、结果与分析

3.1 日本晴的组织培养

3.2 农杆菌介导的日本晴遗传转化

3.3 组织化学及分子生物学方法检测

3.4 转基因株系子一代的获得和鉴定

4、讨论

4.1 水稻愈伤组织的诱导和分化

4.2 农杆菌转化效率影响因素

4.3 抗性愈伤的筛选和分化

4.4 转基因株系子一代分析

5、小结

６参考文献

７致谢

发布时间: 2006-12-11

参考文献

[1].农杆菌介导的口蹄疫抗原决定簇融合基因转化胡萝卜的研究[D]. 李文建.厦门大学2005
[2].实时定量逆转录聚合酶链反应检测慢粒bcr/abl融合基因的研究[D]. 章印红.昆明医学院2007
[3].幽门螺杆菌BabA2/UreI融合基因减毒伤寒沙门氏菌重组活载体疫苗的构建与鉴定[D]. 刘东升.南昌大学2007
[4].大肠杆菌毒素融合基因的构建及其表达产物免疫原性研究[D]. 齐翀.吉林大学2005
[5].南非2型口蹄疫病毒样颗粒体外组装及嵌合病毒样颗粒的初步研究[D]. 董虎.中国农业科学院2014
[6].融合基因cry2Aa-gna克隆及表达的研究[D]. 袁淼.华中农业大学2009
[7].肌动蛋白在昆虫细胞中的表达及其在杆状病毒复制和运输中作用的初步研究[D]. 李小青.华中师范大学2003
[8].制备Tet调控BCR-ABL融合基因转基因小鼠的初步研究[D]. 王海洋.扬州大学2008
[9].口蹄疫灭活疫苗中VP1基因分析方法的建立及应用[D]. 赵毅.新疆农业大学2009

口蹄疫抗原决定簇融合基因转化水稻的研究

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