神经节苷脂致敏兔后其抗体及细胞因子的动态变化

论文摘要

目的 探讨在格林-巴利综合征（GBS）动物模型-实验性变态反应性神经炎（EAN）的发病过程中Th1和Th2类细胞反应的作用。 方法 ①实验动物随机分三组（FKG组、FK组、FG组）,分别用神经节苷脂（GM1）、弗氏佐剂（FCA）、血蓝蛋白（FKH）三种免疫物以皮下注射的方式免疫实验动物（新西兰大白兔）,免疫间隔时间为每20天免疫一次。共免疫3次。每10天记录动物肌力和收集血液标本1次。②采用ELISA法测定GM1抗体,采用反转录基因扩增一步法试剂盒（德国QIAGEN公司生产）进行反转录多聚酶链反应（RT-PCR）测定IFN-γ和IL-10的mRNA表达水平。③资料统计应用单因素方差分析、t检验的方法分别比较FKG、FK组、FG组各组内的差别、相同取血时间点各组之间,以及不同组间细胞因子表达量的差别。P<0.05,说明统计学上有差异;P<0.01说明统计学上有显著差异。 结果 动物出现一过性肌力下降,神经节苷脂滴度在免疫后逐渐增加,在40天左右达到高峰。细胞因子IFN-γ的表达量在免疫反应后逐渐增加,在免疫后的第40天左右达到高峰（疾病症状的最严重阶段）,之后出现下降趋势,FKG组与FK组比较无差异,两组与FG组比较有差异;细胞因子IL-10表达量从免疫后逐渐开始增加.免疫早期FKG组与FK组无差异,但均与FG组有差异;免疫晚期KFG组与FK组有差异,FKG组的表达量较FK组略增高。 结论 Th1和Th2类细胞反应参与了实验性变态反应性神经炎（EAN）的发病过程。蛋白类载体可参与了Th1和Th2类细胞反应,而多糖类抗原也参与Th2类细胞反应。蛋白载体在GM1抗体产生中起重要作用。

论文目录

• 引言
• 第一章 实验资料
• 1.1 主要仪器设备
• 1.2 主要试剂
• 1.3 玻璃器皿、塑料用品的准备
• 1.4 实验动物
• 第二章 实验方法
• 2.1 动物模型的建立
• 2.2 临床症状评分标准
• 2.3 抽血提取淋巴细胞
• 2.4 RNA的纯化提取
• 2.5 RNA浓度的检测
• 2.6 RT—PCR系统的建立
• 2.7 抗GM1抗体滴度的测定（ELISA间接法）
• 2.8 统计学方法
• 第三章 实验结果
• 3.1 实验动物的症状评分
• 3.2 神经节苷脂抗体（Ab-GM1）滴度测定函数转换)
• 3.3 IFN—γ的表达
• 3.4 IL-10的表达
• 第四章 讨论
• 4.1 动物模型分析
• 4.2 简述格林—巴利综合征和变态反应性神经炎的发病机制
• 4.3 GM1抗体的滴度
• 4.4 细胞因子与格林巴利综合征和实验性变态反应性神经炎
• 4.5 本实验的神经因子分析
• 4.6 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明