蛴螬酸水解液对大鼠光损伤视网膜变性的保护作用及其机理的探讨

论文摘要

目的：通过观察大鼠视网膜光损伤中组织形态学改变及视细胞凋亡调节因子NF-κB、FasL、TNF-α、Caspase-3的改变,探讨中药蛴螬对视网膜光损伤的防护作用及其机制。方法：SD大鼠48只随机分为正常对照组、模型对照组、加减驻景丸组、蛴螬低剂量治疗组、蛴螬中剂量治疗组、蛴螬高剂量治疗组。各治疗组于光照前2周连续灌胃给药后,光照前先暗适应24小时,在强度为2000±200Lx的白色荧光灯下,光照12小时,再进行暗适应12小时,连续3个循环,光照时间总计为36小时。照射后再连续给药1周。实验结束,处死所有动物,观察光镜和电镜下大鼠视网膜病理形态结构以及超微结构改变及运用免疫组织化学方法测定NF-κB、FasL、TNF-α、Caspase-3凋亡调节因子。结果：（1）组织形态学上,模型对照组视网膜变薄,细胞减少,细胞排列较正常组稀疏,内外节排列紊乱,分界不清；蛴螬中、高剂量治疗组、加减驻景丸组视网膜形态有改善,外核层细胞厚度增加差异有统计学意义（P<0.05）。蛴螬低剂量治疗组较模型组无明显改善。（2）光损伤后,模型对照组视网膜的FasL、TNF-α、Caspase-3表达增强,NF-κB表达减弱,与正常对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。蛴螬中、高剂量治疗组、加减驻景丸组视网膜中FasL、TNF-α、Caspase-3表达减少,NF-κB表达增强,与模型对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：（1）视网膜光损伤与祖国医学“毒邪”致病特征有内在的联系,“光毒”属于中医“毒邪”范畴之一,“光毒”是目前概括光损伤较恰当的中医学名词。（2）视网膜光损伤大鼠模型是研究视网膜光损伤较好的动物模型,凋亡是视网膜光化学损伤中感光细胞丢失的主要原因。视网膜光感受器细胞NF-κB信号传导通路的抑制及细胞调亡死亡受体通路的活化可能是视网膜光损伤的重要发病机制。（3）蛴螬减少了感光细胞凋亡。其通过激活NF-κB信号传导通路,增加NF-κB的表达,减少Fa sL、TNF-α勺表达,延迟并降低Caspase-3的活化,抑制细胞凋亡的死亡受体通路活化,阻断凋亡信号转导,发挥拮抗光感受细胞调亡作用。（4）蛴螬对光损伤视网膜变性具有保护作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词表
• 前言
• 第一部分 光损伤模型的建立及其视网膜形态学的改变
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 试剂与药品
• 1.3 主要仪器
• 2 实验方法
• 2.1 造模方法
• 2.2 分组方法
• 2.3 大鼠一般情况观察
• 3 测试指标及方法
• 3.1 光镜下观察大鼠视网膜形态学改变
• 3.2 电镜下观察视网膜超微结构的改变
• 4 统计分析方法
• 5 实验结果和分析
• 5.1 视网膜HE染色光镜下观察结果
• 5.2 大鼠视网膜外核层厚度变化
• 5.3 电镜下大鼠视网膜光感受器细胞超微结构改变结果
• 6 小结
• 7 讨论视网膜光化学损伤和动物模型的评价及意义
• 7.1 视网膜光损伤分类
• 7.2 视网膜光化学损伤特点
• 7.3 视网膜光化学损伤机制
• 7.4 视网膜光化学损伤动物模型的评价
• 7.5 视网膜光化学损伤的研究意义
• 第二部分 蛴螬酸水解液对大鼠视网膜光损伤的保护作用及其机制的研究
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验仪器
• 1.3 试剂与药品
• 2 实验方法
• 2.1 分组方法
• 2.2 造模方法
• 2.3 给药方案
• 2.4 视网膜切片染色方法
• 3 各项指标检测方法
• 3.1 光镜下观察大鼠视网膜形态学改变
• 3.2 视网膜外核层细胞数量检测
• 3.3 视网膜外核层细胞NF-κB、FasL、TNF-α、Caspase-3的检测
• 3.4 视网膜外核层细胞、NF-κB核转位细胞的计数
• 3.5 电镜下观察视网膜组织
• 4 统计分析方法
• 5 实验结果和分析
• 5.1 光镜下病理形态学观察及半定量检测外核层细胞数
• 5.2 蛴螬对大鼠视网膜外核层厚度的影响
• 5.3 电镜观察大鼠视网膜光感受器细胞超微结构的改变
• 5.4 蛴螬对大鼠视网膜NF-κB表达的影响
• 5.5 蛴螬对大鼠视网膜NF-κB核转位的影晌
• 5.6 蛴螬对大鼠视网膜FasL表达的影响
• 5.7 蛴螬对大鼠视网膜TNF-α表达的影响
• 5.8 蛴螬对大鼠视网膜Caspase-3表达的影响
• 6 小结
• 7 讨论蛴螬对大鼠视网膜光损伤相关疾病的保护作用及其机制的探讨
• 7.1 AMD的中医理论基础及临床研究现状
• 7.1.1 AMD的中医病因病机理论渊源
• 7.1.2 现代中医临床对AMD治疗的研究进展
• 7.2 蛴螬相关的古代文献记载及现代研究
• 7.3 导师对AMD的病因病机认识
• 7.3.1 对"光毒"导致本病的认识
• 7.3.2 对"光毒"致瘀引起AMD的病机认识
• 7.3.3 对AMD的治则治法认识
• 7.4 西医对AMD的认识
• 7.4.1 病因病理方面
• 7.4.2 现代医学对AMD治疗
• 7.5 视网膜光损伤细胞凋亡机制及其防护的研究进展
• 7.5.1 细胞凋亡的研究进展
• 7.5.2 视网膜光损伤感光器细胞凋亡的研究进展
• 7.5.3 视网膜光损伤与核因子-κB（neclear factor-kappa B,NF-κB） 信号通路的研究进展
• 7.5.4 视网膜光损伤的防治
• 7.6 蛴螬对视网膜光损伤的保护作用及机制探讨
• 7.6.1 蛴螬对视网膜光损伤的保护作用
• 7.6.2 蛴螬对视网膜光损伤保护作用的机制探讨
• 结论
• 问题与展望
• 1 问题
• 2 展望
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 综述
• 主要研究成果及发表论文