胃炎饮对胆汁反流性胃炎模型大鼠胃黏膜—黏液屏障保护作用机制研究

论文摘要

目的:本研究旨在通过观察胆汁反流性胃炎模型大鼠胃黏膜病理形态、胃黏膜氨基己糖、磷脂、前列腺素E2（PGE2）以及血浆6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、血栓素B2（TXB2）等指标的变化,验证胃炎饮的药效,并探讨该药对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜-黏液屏障的保护作用机制。方法第一部分:胃炎饮对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜病理形态学的影响1 HE染色健康wistar大鼠40只,雌雄各半,随机分为5组,每组8只,即正常组、模型组、胃炎饮高剂量组、胃炎饮低剂量组、吗叮啉对照组。胃炎饮高、低剂量组和吗叮啉对照组从造模开始后第二周至第五周造模结束每天给药,正常组同时灌服生理盐水,每日1次,连续28天。除正常组外,其余各组以15ml/kg体重反流液空腹灌胃,每日1次,连续35天。最后一次灌胃后禁食24h,无菌操作剖腹取胃,沿胃大弯剪开,用冰生理盐水漂洗胃内容物,先肉眼观察胃黏膜的大体情况,然后从靠近幽门部剪取一块约1mm3,4%多聚甲醛固定,HE染色,光镜下观察胃黏膜的病理组织学的变化。并且做各组炎症细胞半定量分析。2 AB/PAS染色动物分组、用药同前,每组八只,最后一次灌胃后禁食24h,断头处死。无菌操作剖腹取胃,用冰生理盐水漂洗胃内容物,滤纸吸干。从靠近幽门部剪取一块约1mm3左右的胃黏膜,4%多聚甲醛固定,AB/PAS染色,在光镜下观察胃黏膜病理形态学变化,并用测微尺在光镜100倍下测量胃黏膜AB/PAS阳性层厚度,自窦、体交界500 um处开始,每张切片取平均间隔测量10个部位后取平均值。第二部分:胃炎饮对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏液层磷脂及氨基己糖含量的影响动物分组、用药情况同前,每组8只。最后一次灌胃后禁食24h,断头处死;无菌操作剖腹取胃,用冰冷的生理盐水漂洗胃内容物,滤纸吸干,取1/4胃,用载玻片刮取胃黏膜,称重,取其中1/2供测磷脂,将胃黏膜刮取物加甲醇/氯仿（1︰1）2ml抽提,加塞,振混5min,吸底层液体1ml置消化管内待测;另1/2供测氨基己糖,将胃黏膜刮取物加6mol/L盐酸沸水浴1h,冷却后加4mol/L氢氧化钠中和至pH7.0,3000r/min离心10min,取上清液1ml待测。第三部分:胃炎饮对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜前列腺素E2及血浆6-酮-前列腺素F1α、血栓素B2的影响动物分组、用药情况同前,每组8只。最后一次灌胃后禁食24h,断头处死;无菌操作剖腹取胃,沿胃大弯剪开,用冰生理盐水漂洗胃内容物,滤纸吸干,载玻片刮取胃黏膜组织并称重,冰浴下制备10%组织匀浆,3000r/min离心15min,取上清,-20℃以下保存,留作PGE2检测。大鼠禁食24小时后,断头取血5ml,混匀后注入含有0.2m1的EDTA-2Na（100g/L）的塑料试管内,4℃C、3500r/min离心15分钟,分离血浆和红细胞,吸取血浆装入普通试管,-20℃保存,供血浆6-Keto-PGF1α,TXB2检测。结果第一部分:胃炎饮对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜病理形态学的影响1 HE染色正常组大鼠胃黏膜光滑,未见破损,脱落,极少见炎细胞;模型组大鼠胃黏膜出现明显破损,脱落,黏膜下可见大量炎细胞浸润;与模型组比较,胃炎饮高、低剂量组和吗叮啉组胃黏膜破损,脱落较轻,炎细胞浸润较少,胃炎饮高剂量组效果最佳（Fig. 1-5）。其半定量指标结果显示炎细胞浸润:与模型组比较,胃炎饮高、低剂量组炎细胞浸润明显减轻（P<0.01）;吗叮啉组亦明显减轻（P<0.05）。（Table1）2 AB/PAS染色模型组大鼠胃黏膜AB/PAS阳性层厚度出现明显变薄、甚至缺失。与模型组比较,胃炎饮高、低剂量组和吗叮啉组胃黏膜AB/PAS阳性层厚度变薄、缺失较轻,其中以高剂量组最佳（Fig. 6-10）。与模型组比较,胃炎饮高、低剂量组AB/PAS阳性层厚度明显增加（P<0.01）;吗叮啉组与模型组比较也有明显改善（P<0.01）;与对照组比较,胃炎饮高剂量组AB/PAS阳性层较厚（P<0.01）。（Table2）第二部分:胃炎饮对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏液层磷脂及氨基己糖含量的影响1各组大鼠胃黏液层磷脂含量的比较与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜磷脂含量明显下降,具有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较,胃炎饮高、低剂量组和吗叮啉组均可明显升高胃黏膜磷脂含量,具有统计学意义（P<0.01）,胃炎饮高剂量组与吗叮啉组比较,胃炎饮高剂量组可明显升高胃黏膜磷脂含量,具有统计学意义（P<0.05）;2各组大鼠胃黏液层氨基己糖含量的比较与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜膜氨基己糖含量明显下降,具有非常显著性差异（P<0.01）;与模型组比较,胃炎饮高、低剂量组可明显升高胃黏膜氨基己糖含量,具有统计学意义（P<0.01）,吗叮啉组亦可明显升高胃黏膜氨基己糖含量,具有统计学意义（P<0.05）;胃炎饮高、低剂量组与吗叮啉组比较可明显升高胃黏膜氨基己糖含量,具有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。第三部分:胃炎饮对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜PGE2及血浆6-Keto-PGF1α、TXB2的影响1各组大鼠胃黏膜PGE2含量的比较与模型组比较,胃炎饮高、低剂量组和吗叮啉组均可明显升高PGE2含量,具有统计学意义（P<0.01）,与对照组比较,胃炎饮高、低剂量组PGE2含量明显增高,具有统计学意义（P<0.01）。2各组大鼠血浆血栓素B2、6-Keto-PGF1α含量的比较与模型组比较,胃炎饮高、低剂量组、吗叮啉组均可提高6-Keto-PGF1α水平,降低TXB2水平（P<0.01或P<0.05）,与对照组比较,胃炎饮高剂量组6-Keto-PGF1α水平明显高于吗叮啉组,TXB2水平明显低于吗叮啉组,具有统计学意义（P<0.01）。结论1胃炎饮治疗胆汁反流性胃炎的疗效确切,可显著改善胃黏膜AB/PAS阳性层厚度,减轻炎细胞浸润程度从而改善胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜的病理形态学,具有保护胃黏膜-黏液屏障的作用。2胃炎饮能显著升高胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜磷脂及氨基己糖含量增强胃黏液的粘滞性、疏水性,减缓了H+通过黏液层的速度,从而增强胃黏膜抵抗外来因子的侵袭作用,减轻胃黏膜损伤。3胃炎饮能显著升高胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜前列腺素E2（PGE2）和血浆6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)含量,降低血栓素B2（TXB2）含量,增加胃黏膜血流量,从而减轻胃黏膜的损伤。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩写
• 研究论文 胃炎饮对胆汁反流性胃炎模型大鼠胃黏膜-黏液屏障保护作用机制研究
• 引言
• 第一部分 胃炎饮对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜病理形态学的影响
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 第二部分 胃炎饮对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏液层磷脂及氨基己糖含量的影响
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附表
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 第三部分 胃炎饮对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜PGE2 及血浆6-酮-前列腺素F1α、血栓素82的影响
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附表
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 结论
• 综述 中药复方治疗慢性胃炎的实验研究进展
• 致谢
• 个人简历