首页> 正文

植物病毒衣壳蛋白进入叶绿体的离体跨膜运输研究

2020-12-06阅读(104)

植物病毒衣壳蛋白进入叶绿体的离体跨膜运输研究

论文摘要

烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）是烟草花叶病毒属病毒的典型成员,其寄主范围非常广泛。TMV引起的烟草花叶病一直是困扰世界各烟区的主要病害。水稻条纹病毒（Rice stripe virus,RSV）是纤细病毒属（Tenuivirus）的代表成员,曾分布于我国16个省市,至今仍在部分省市暴发流行,给我国水稻生产造成了严重损失。本文利用提纯的烟草花叶病毒和水稻条纹病毒制备了4株抗血清Sv11、Sv21、Mv31和Mv41,其中Sv11、Sv21的效价分别为1:65536、1:16384,Mv41和Mv31的效价为1:8192、1:2048。用Sv11、Sv21和Mv41对水稻、烟草病汁液的ELISA检测结果表明,它们对病叶的检测灵敏度分别为1:16384、1:8192和1:12800,且对健康叶片反应都较弱。在前人研究的基础上,本研究开展了TMV-CP的叶绿体离体跨膜实验,并且研究了时间、TMV-CP浓度对跨膜运输的影响以及TMV-CP跨膜运输的种属选择性。研究结果表明,TMV-CP可以快速地进入离体烟草叶绿体中,超过15min的跨膜时间对进入叶绿体中CP的量没有影响;加入跨膜体系中的TMV-CP的浓度与跨膜后进入叶绿体的TMV-CP的量呈正相关。初步研究表明,TMV-CP的叶绿体离体跨膜运输具有种属选择性,这从一个侧面解释了为什么TMV不能危害水稻等禾本科植物。本研究首次建立了RSV-CP的叶绿体离体跨膜运输体系,同时研究了时间、RSV-CP浓度对跨膜运输效率的影响以及RSV-CP跨膜的种属选择性。研究结果表明,RSV-CP可以快速地进入离体的水稻、小麦叶绿体中,超过15min,跨膜时间对进入叶绿体中CP的量没有影响;加入跨膜体系中的RSV-CP的浓度与跨膜后进入叶绿体的RSV-CP的量呈正相关。初步研究表明,RSV-CP的叶绿体离体跨膜运输具有种属选择性,这从一个侧面解释了为什么RSV不能危害茄科等非寄主植物。比较两种植物病毒衣壳蛋白的叶绿体跨膜运输,我们发现时间和CP浓度对它们叶绿体跨膜效率的影响是相同的,即超过15min,跨膜时间对进入叶绿体中CP的量没有影响,加入跨膜体系中的CP浓度与跨膜后进入叶绿体的CP量呈正相关。此外,两种植物病毒衣壳蛋白的叶绿体跨膜运输都具有种属选择性。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 引言
  • 上篇 文献综述
  • 文献综述
  • 1 烟草花叶病毒研究概况
  • 2 水稻条纹叶枯病研究进展
  • 2.1 水稻条纹叶枯病的症状及寄主
  • 2.2 RSV病原生物学
  • 2.3 RSV基因组的结构与功能
  • 3 植物病毒的致病基因及其致病机制研究进展
  • 3.1 CP与花叶症状的相关性
  • 3.2 病毒侵染对寄主植物亚细胞结构——叶绿体生理形态的影响
  • 3.3 病毒侵染对植物叶绿体电子传递活性的影响
  • 3.4 水稻条纹病毒致病机制研究概况
  • 4 胞质蛋白转运到叶绿体的研究进展
  • 4.1 前导肽——引导蛋白转运和定位的信号
  • 4.2 前体蛋白穿膜运输
  • 4.3 前体蛋白在叶绿体中的加工
  • 参考文献
  • 下篇 研究内容
  • 第一章 TMV和RSV的提纯与抗血清的制备
  • 1 材料与方法
  • 1.1 供试材料
  • 1.2 RSV的提纯
  • 1.3 TMV的提纯
  • 1.4 病毒粒子电镜观察
  • 1.5 提纯病毒紫外检测
  • 1.6 抗血清的制备及效价测定
  • 1.7 抗血清检测灵敏度测定
  • 2 结果与分析
  • 2.1 病毒提纯及紫外检测
  • 2.2 病毒粒子的电镜观察
  • 2.3 抗血清效价测定
  • 2.4 抗血清检测水稻灵敏度的测定
  • 3 结论与讨论
  • 参考文献
  • 第二章 TMV-CP的叶绿体离体跨膜运输的特性及种属特异性
  • 1 材料与方法
  • 1.1 材料
  • 1.2 完整游离的叶绿体的制备
  • 1.3 叶绿体的蛋白酶处理
  • 1.4 TMV-CP的烟草叶绿体的离体跨膜运输
  • 1.5 TMV-CP的水稻叶绿体离体跨膜运输
  • 1.6 Western blotting
  • 2 结果与分析
  • 2.1 TMV-CP的烟草叶绿体的离体跨膜运输
  • 2.2 TMV-CP的烟草叶绿体离体跨膜运输与TMV-CP浓度的相关性
  • 2.3 TMV-CP的叶绿体离体跨膜运输的种属选择性
  • 3 结论与讨论
  • 参考文献
  • 第三章 水稻条纹病毒衣壳蛋白的叶绿体离体跨膜运输体系的建立
  • 1 材料与方法
  • 1.1 材料
  • 1.2 完整游离的叶绿体的制备
  • 1.3 叶绿体的蛋白酶处理
  • 1.4 叶绿体蛋白抽提
  • 1.5 RSV-CP的离体叶绿体跨膜运输
  • 1.6 SDS-PAGE
  • 1.7 Western blotting
  • 2 结果与分析
  • 2.1 完整游离的叶绿体的制备
  • 2.2 健康叶绿体的蛋白分析和病水稻叶绿体中的RSV-CP检测
  • 2.3 RSV-CP的水稻和小麦叶绿体的离体跨膜运输
  • 2.4 不同时间RSV-CP的水稻叶绿体的离体跨膜运输
  • 2.5 RSV-CP的水稻叶绿体离体跨膜运输与RSV-Cp浓度的相关性
  • 2.6 RSV-CP的非寄主植物叶绿体离体跨膜运输
  • 3 结论与讨论
  • 参考文献
  • 全文总结
  • 附录
  • 发表的论文目录
  • 致谢

    • 相关论文文献

    • [1].基于实验改进的“物质跨膜运输的实例”教学设计[J]. 生物学通报 2019(10)
    • [2].“物质跨膜运输的方式”一节基于理性思维的教学设计[J]. 生物学通报 2018(05)
    • [3].通道蛋白介导的跨膜运输[J]. 生物学教学 2014(09)
    • [4].“物质跨膜运输的实例”一节的教学设计[J]. 生物学教学 2016(12)
    • [5].知识迁移在“物质跨膜运输的实例”教学中的体现[J]. 生物学教学 2017(08)
    • [6].“物质的跨膜运输方式”教学中图的运用[J]. 生物学教学 2008(05)
    • [7].“物质跨膜运输的方式”一节的教学设计[J]. 生物学教学 2011(05)
    • [8].物质跨膜运输方式深度学习的教学设计[J]. 求学 2020(27)
    • [9].希沃白板在“物质跨膜运输”模型建构教学中的应用[J]. 课程教育研究 2020(37)
    • [10].“物质跨膜运输”典例评析与备考难点突破[J]. 广东教育(高中版) 2020(09)
    • [11].《物质跨膜运输的方式》教学反思[J]. 读写算 2018(22)
    • [12].物质跨膜运输方式之剥茧抽丝[J]. 中学生物教学 2013(Z1)
    • [13].围绕生物学重要概念进行课堂教学——以“物质跨膜运输的方式”一节为例[J]. 中学生物教学 2016(24)
    • [14].对“物质跨膜运输的方式”几个问题的探讨[J]. 中学生物教学 2017(Z1)
    • [15].从“跨膜运输”看概念教学[J]. 中学生物教学 2017(Z1)
    • [16].对比中美高中生物教材,初探生命观念——以“物质的跨膜运输”一章为例[J]. 中学生物学 2017(05)
    • [17].例谈2016年高考题中的“膜蛋白”家族[J]. 中学生物教学 2017(06)
    • [18].抽象知识形象化教学在高中生物教学中的应用——以“物质跨膜运输的方式”教学为例[J]. 中学生物学 2017(07)
    • [19].基于“用教材教”而非“教教材”的教学设计——以“物质跨膜运输的实例”一节为例[J]. 中学生物教学 2017(12)
    • [20].“物质跨膜运输的方式”教学设计[J]. 中学生物教学 2017(16)
    • [21].抽象知识形象化施教——以“物质跨膜运输的方式”教学为例[J]. 中学生物学 2015(05)
    • [22].“物质跨膜运输的实例”第1课时渐进式教学设计[J]. 中学生物教学 2016(14)
    • [23].再论胞吞、胞吐是否属于跨膜运输——对2016年高考理综全国卷和北京卷的探讨[J]. 中学生物教学 2016(19)
    • [24].“物质跨膜运输的实例”教学设计与案例[J]. 中学生物学 2010(06)
    • [25].“物质跨膜运输的方式”判定[J]. 中学生理科应试 2017(12)
    • [26].四法判断“物质跨膜运输方式”[J]. 教学考试 2018(33)
    • [27].关于“物质的跨膜运输”一节公开课的反思[J]. 广西教育 2016(38)
    • [28].在自主探究中实现自能教育——以“物质跨膜运输的实例”为例[J]. 中学课程辅导(教师通讯) 2017(11)
    • [29].“物质跨膜运输的方式”一节的互动教学设计[J]. 中学时代 2014(02)
    • [30].物质跨膜运输的几个“再生”问题[J]. 知识窗(教师版) 2011(12)

    标签：;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

    植物病毒衣壳蛋白进入叶绿体的离体跨膜运输研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢

    © 2024 毕速过 版权所有 鄂ICP备12018319号-5