本文主要研究内容
作者周伟,卢进鹏,李亚平,杨林玉,胡小蕾,廖飞,杨晓兰（2019）在《磁珠固定化结核分枝杆菌二氢叶酸还原酶及其表征》一文中研究指出：比较Ni2+-NTA磁珠和羧基磁珠固定结核分枝杆菌二氢叶酸还原酶（Mycobacteriumtuberculosis dihydrofolate reductase,Mt DHFR）,探索适合小分子配体混合物库筛选的Mt DHFR固定化方法。重组表达带6×His标签Mt DHFR,纯化后表征酶学性质,比较用Ni2+-NTA磁珠和羧基磁珠固定化时相应固定化容量、保留活性、稳定性及对抑制剂响应。结果表明,Ni2+-NTA磁珠对Mt DHFR固定化容量为（93±12）mg/g磁珠（n=3）,但酶比活保留不超过32%,Ni2+明显抑制酶活性,EDTA与Ni2+呈协同抑制效应,Fe3+无显著干扰。羧基磁珠活化固定Mt DHFR的容量（8.6±0.6） mg/g磁珠（n=3）,固定化酶比活保留（87±4）%（n=3）。在含50 mmol/L KCl的100 mmol/L HEPES （pH 7.0）中,游离和固定化Mt DHFR在0℃保存16 h活性都无显著改变,但在25℃保存16 h,游离酶活性下降近60%而羧基磁珠固定化Mt DHFR活性下降仅35%。甲氨喋呤对游离Mt DHFR和固定化Mt DHFR的IC50无显著差异（P>0.05）。综上,Ni2+-NTA磁珠不适合固定化Mt DHFR;羧基磁珠固定化Mt DHFR能保留活性、热稳定性及对抑制剂的响应,该固定化方法有望用于快速筛选其配体混合物库。
Abstract
bi jiao Ni2+-NTAci zhu he suo ji ci zhu gu ding jie he fen zhi gan jun er qing xie suan hai yuan mei （Mycobacteriumtuberculosis dihydrofolate reductase,Mt DHFR）,tan suo kuo ge xiao fen zi pei ti hun ge wu ku shai shua de Mt DHFRgu ding hua fang fa 。chong zu biao da dai 6×Hisbiao qian Mt DHFR,chun hua hou biao zheng mei xue xing zhi ,bi jiao yong Ni2+-NTAci zhu he suo ji ci zhu gu ding hua shi xiang ying gu ding hua rong liang 、bao liu huo xing 、wen ding xing ji dui yi zhi ji xiang ying 。jie guo biao ming ,Ni2+-NTAci zhu dui Mt DHFRgu ding hua rong liang wei （93±12）mg/gci zhu （n=3）,dan mei bi huo bao liu bu chao guo 32%,Ni2+ming xian yi zhi mei huo xing ,EDTAyu Ni2+cheng xie tong yi zhi xiao ying ,Fe3+mo xian zhe gan rao 。suo ji ci zhu huo hua gu ding Mt DHFRde rong liang （8.6±0.6） mg/gci zhu （n=3）,gu ding hua mei bi huo bao liu （87±4）%（n=3）。zai han 50 mmol/L KClde 100 mmol/L HEPES （pH 7.0）zhong ,you li he gu ding hua Mt DHFRzai 0℃bao cun 16 hhuo xing dou mo xian zhe gai bian ,dan zai 25℃bao cun 16 h,you li mei huo xing xia jiang jin 60%er suo ji ci zhu gu ding hua Mt DHFRhuo xing xia jiang jin 35%。jia an die ling dui you li Mt DHFRhe gu ding hua Mt DHFRde IC50mo xian zhe cha yi （P>0.05）。zeng shang ,Ni2+-NTAci zhu bu kuo ge gu ding hua Mt DHFR;suo ji ci zhu gu ding hua Mt DHFRneng bao liu huo xing 、re wen ding xing ji dui yi zhi ji de xiang ying ,gai gu ding hua fang fa you wang yong yu kuai su shai shua ji pei ti hun ge wu ku 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自生物工程学报的周伟,卢进鹏,李亚平,杨林玉,胡小蕾,廖飞,杨晓兰，发表于刊物生物工程学报2019年03期论文，是一篇关于磁珠论文,固定化论文,二氢叶酸还原酶论文,配体混合物论文,筛选论文,生物工程学报2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自生物工程学报2019年03期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。