印楝油对高原鼠兔的抗生育作用及其毒理学研究

论文摘要

高原鼠兔（Ochotona curzoniae）是一种分布于海拔高度3200-3700 m的高寒草甸草原的动物,属于哺乳纲,兔形目,鼠兔科。鼠害对我国农畜牧业的发展有阻碍作用。由于传统灭鼠药物具有毒副残留作用,对环境的破坏很大,所以传统灭鼠药物逐渐开始向天然灭鼠药物转变。其中运用抗生育机理来控制害鼠的繁殖速度是一种有效的消灭鼠灾而又保护生态环境和生态链的绿色科学灭鼠害方法。印楝（Azadirachta indica A.Juss.）是一种楝科楝属高大乔木,原产于印巴次大陆,印楝油（Neem oil）是一种由印楝种子机械榨取所得到植物油,具有良好的杀螨、抗菌和抗生育等药理活性。本试验将印楝油制备成颗粒制剂应用于草原鼠害防治,研究其对高原鼠兔的摄食系数、最佳作用浓度和抗生育作用,为高原鼠兔的防治提供基础数据；同时系统地研究印楝油的急性毒性、蓄积性毒性、亚急性毒性和亚慢性毒性作用,为实际生产中应用印楝油控制鼠害提供毒理学安全性评价的科学依据。主要研究结果如下：1.印楝油颗粒剂对高原鼠兔的抗生育作用研究：研究主药浓度为30%和40%的印楝油颗粒剂对高原鼠兔的摄食系数,筛选出适口性较好的主药浓度（抗生育剂适口性标准摄食系数≥0.3）,在此基础上探讨最佳主药浓度的印楝油颗粒剂对高原鼠兔的抗生育力和生殖器官的影响,并用免疫组化法检测高原鼠兔输卵管和子宫细胞的凋亡。研究结果表明,30%和40%的颗粒剂对高原鼠兔的摄食系数分别为0.97和1.87;40%的印楝油颗粒剂对高原鼠兔的抗生育力为70%,对高原鼠兔的睾丸、附睾、子宫、输卵管和卵巢均有明显病变影响,并且促进子宫细胞凋亡。该结果显示：40%的印楝油颗粒剂适口性良好,对高原鼠兔具有良好的抗生育作用,有望用于草原鼠害的控制。2.印楝油对小鼠的急性毒性试验研究：将试验小鼠分别给予不同浓度的印楝油,观察14d内小鼠的活动和死亡情况,采用改良寇氏公式计算半数致死量（LD50）和可信限。研究结果表明,印楝油对小鼠的经口LD50为31.95g/kg,属于实际无毒物质。3.印楝油对小鼠的蓄积毒性试验研究：将试验组小鼠采用固定剂量（1/5LD50）连续经口给药28d后,以蓄积系数评价其蓄积毒性,并对各组小鼠心、肝、脾、肺和肾的脏器系数及饲料利用率进行了测定。研究结果表明,印楝油经口蓄积系数k大于5,其对小鼠的饲料利用率与脏器系数无显著影响,此结果表明印楝油几乎不具有蓄积毒性作用。4.印楝油对小鼠的亚急性毒性试验研究：选取健康小鼠80只,随机分为1个对照组和3个试验组,各组小鼠经口分别给予含有0mg/kg,177 （1/180 LD50）mg/kg, 533 （1/60LD50） mg/kg和1600（1/20 LD50） mg/kg的印楝油,连续用药28天。试验期间观察记录各组小鼠的一般临床表现、体重、饲料利用率、血液生理生化指标及心肝、脾、肺和肾的脏器系数,并进行病理学检查。研究结果表明,各试验组小鼠的体重、血液生化指标和脏器系数与对照组相比均无明显变化（P>0.05）；在用药后最后两周,仅1600 mg/kg剂量组的饲料利用率明显下降（P<0.05）。组织病理学检查结果显示,1600 mg/kg的印楝油对各脏器均有不同程度的损伤,主要表现为各实质细胞发生颗粒变性和脂肪变性,上述结果提示：印楝油在高浓度（1600 mg/kg）下对小鼠有轻微的亚急性毒性反应。5.印楝油对小鼠的亚慢性毒性试验研究：选取健康小鼠80只,随机分为1个对照组和3个试验组,各组小鼠经口分别给予含有0mg/kg,177 （1/180 LD50） mg/kg, 533 （1/60 LD50） mg/kg和1600 （1/20 LD50） mg/kg的印楝油,连续90天,停药后继续观察30天。试验第90天和120天后分别观察记录各组小鼠的一般临床表现,测定血液生理生化指标与心、肝、脾、肺和肾的脏器系数,并进行组织病理学检查。研究结果表明,试验第90d和120d后,各试验组小鼠的血液生化指标和脏器系数与对照组相比均无明显差异（P>0.05）。病理学检查结果显示,给药90d后,印楝油在177 mg/kg和533 mg/kg剂量下,对各脏器的组织学病变影响较小,而在1600 mg/kg剂量下,对各脏器有不同程度的损伤,其中损伤较严重的器官主要为肝脏、肾脏和睾丸,主要表现为细胞变性。停药30d天后,各脏器病理改变程度减轻甚至恢复。上述结果提示：印楝油对小鼠的最大无作用剂量为177 mg/kg,毒作用靶器官为肝脏,肾脏和睾丸。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述、选题背景及研究的目的意义
• 1.文献综述
• 1.1 高原鼠兔的危害及目前常用的鼠害防治手段
• 1.3 印楝油的抗生育作用研究现状
• 1.4 印楝油的毒理学研究现状
• 2. 选题背景及研究的目的意义
• 2.1 选题背景
• 2.2 研究的目的意义
• 2.3 主要研究内容和技术路线
• 第二章 印楝油颗粒剂对高原鼠兔的抗生育作用研究
• 1. 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 数据处理
• 2. 结果与分析
• 2.1 高原鼠兔对印楝油颗粒制剂摄食系数的研究
• 2.2 印楝油颗粒剂对高原鼠兔抗生育力的影响
• 2.3 印楝油颗粒剂对高原鼠兔生殖器官的病理学影响
• 2.4 印楝油颗粒剂对高原鼠兔输卵管和子宫细胞凋亡的影响
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 第三章 印楝油对小鼠的急性毒性试验研究
• 1. 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2. 结果与分析
• 2.1 预试验结果
• 2.2 正式试验结果
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 第四章 印楝油对小鼠的蓄积毒性试验研究
• 1. 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 数据处理
• 2. 结果与分析
• 2.1 临床观察结果及蓄积系数的计算
• 2.2 印楝油对小鼠饲料利用率的影响
• 2.3 印楝油对小鼠脏器系数的影响
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 第五章 印楝油对小鼠的亚急性毒性试验研究
• 1. 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 数据处理
• 2. 结果与分析
• 2.1 临床观察结果
• 2.2 印楝油对小鼠体重的影响
• 2.3 印楝油对小鼠饲料利用率的影响
• 2.4 印楝油对小鼠血液生化指标的影响
• 2.5 印楝油对小鼠脏器系数的影响
• 2.6 印楝油对小鼠脏器病理组织学的影响
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 第六章 印楝油对小鼠的亚慢性毒性试验研究
• 1. 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2. 结果与分析
• 2.1 一般临床表现观察
• 2.2 印楝油对小鼠血液生化指标的影响
• 2.3 印楝油对小鼠脏器指数的影响
• 2.4 给药90d后印楝油对小鼠病理组织学的影响
• 2.5 停药30d后印楝油对小鼠病理组织学的影响
• 3. 讨论
• 4. 小结
• 第七章 结论与创新
• 参考文献
• 致谢
• 附图
• 攻读学位期间发表的学术论文目录