腹泻病人感染金黄色葡萄球菌的快速检测

论文摘要

目的:研究腹泻病人感染金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S. aureus）的快速检测。S. aureus能产生各种大量的外毒素,是人类常见致病菌（Pathogenic bacteria）之一,许多严重的院内感染都与其有关。随着广谱抗菌素的运用和耐药葡萄球菌的增加,使得葡萄球菌性肠炎变得非常普遍,特别见于病因不明的医院获得性腹泻病（Diarrheal diseases）。在生物技术和临床诊断中快速检测其病原菌是极为重要的,毛细管电泳（capillary electrophoresis, CE）很早就运用在微生物的研究领域中,但是,用毛细管电泳和紫外线（Ultraviolet,UV）从复杂样品中同时分离和鉴定目的细菌还具有挑战性。方法:以金黄色葡萄球菌为目的菌,通过在电泳缓冲液中加入特异性单克隆抗体（Monoclonal antibody）包被的乳胶颗粒,使细菌与颗粒结合,电泳阻力增加,促使结合有抗体乳胶颗粒的金黄色葡萄球菌与其他菌的分离,用毛细管区带电泳（capillary zone electrophoresis,CZE）可以直接从细菌混合液样品中快速分离和鉴定出金黄色葡萄球菌。结果:优化实验条件,如颗粒与细菌的结合数量和电泳缓冲液条件等,从已经确定的细菌混合物中,包括大肠埃希杆菌（Escherichia coli）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）和肺炎克雷伯菌（Klebsiella peumoniae）,通过特异的电泳图峰值可以区别出金黄色葡萄球菌。用毛细管电泳检测的前后分流液进行培养,通过经典的培养法证实其检测物为金黄色葡萄球菌,其检测下限（ limits of detection , LOD ）低到9.0×105菌落形成单位（colony forming unit/mL,CFU/mL）。利用本技术从模拟腹泻便标本中成功地鉴定出金黄色葡萄球菌。结论: CZE-UV技术适用于快速诊断由于金黄色葡萄球菌引起的肠炎性腹泻,或其他需要从微生物混合物中快速鉴定目的病原菌的相关领域。理论上,只要有相应细菌的特异性抗体胶,本方法适用检测任何目的细菌。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料与方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢