论文摘要
【目的】探讨钙离子载体(CI)对慢性髓系白血病细胞株K562 细胞表面B7 分子表达的上调作用以及CI 能否诱导K562 细胞分化成DC 样细胞。【方法】第一部分中将生长状态良好的K562 细胞在含CI(375 ng/ml)的RPMI1640 培养基中培养,以不含CI 培养的K562 细胞作对照组。培养0h、48h、96h 时台盼蓝拒染法检测细胞数和细胞存活率,流式细胞仪检测含CI组和未含CI 组培养前及培养96h 后细胞表面B7 分子的表达情况,MTT 比色法检测其刺激同种异体T 细胞增殖的作用。第二部分将生长状态良好的K562 细胞分成三组培养:第一组加1000U GM-CSF/ml 和500U IL-4/ml;第二组加CI(375ng/ml)及1000U GM-CSF/ml 和500U IL-4/ml;第三组仅加完全培养基。光镜下观察各组细胞的形态,流式细胞仪检测各组细胞表面免疫表型的表达情况,MTT 比色法检测其刺激同种异体T 细胞增殖的作用。【结果】K562 细胞表面B7 分子缺如或低表达;用含CI 的培养基培养96h 后,可显著上调其B7 分子的表达,且能刺激同种异体T 淋巴细胞增殖。培养前后细胞形态无明显变化。含CI 培养的K562 细胞较不含CI 培养的细胞生长缓慢。单经1000U GM-CSF/ml + 500U IL-4/ml 培养96h 后K562 细胞形态同样无明显变化,CD80、CD83、CD86 的表达量与未处理组无显著性差异,不能明显刺激同种异体T 淋巴细胞增殖;而经375ng/ml CI + 1000UGM-CSF/ml + 500U IL-4/ml 培养48h 后即可见细胞形态呈多形性,有些细胞可见突起;96h 后CD80、CD86 的表达率较未处理组、单纯细胞因子组及单独CI 处理组明显提高,24h 时DC 的特征性标志CD83 新表达,96h 时CD83无表达,96h 后刺激同种异体T 淋巴细胞增殖的作用较单纯CI 组更明显。
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