论文摘要
目的:建立抗Ⅰ型超敏反应药物体外细胞筛选模型,用于天然药物Q不同提取物的抗Ⅰ型超敏反应作用筛选。针对筛选出的Q活性提取物,进一步探讨其对Th1/Th2平衡的影响。方法:（1）应用MTT法检测阳性药色甘酸钠和天然药物Q对RBL-2H3细胞增殖和原代大鼠肥大细胞（RPMC）生长的影响,检测地塞米松和Q对小鼠脾细胞增殖的影响。（2）应用酶学法检测色甘酸钠和Q对RBL-2H3细胞和RPMC脱颗粒释放β-己糖胺酶的影响。（3）应用ELISA法检测Q3、Q4对致敏小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4和IFN-γ的影响。结果:（1）MTT法实验结果表明,阳性药色甘酸钠和Q在给药浓度范围为1～100μg/mL时,分别对RBL-2H3细胞增殖和原代大鼠肥大细胞（RPMC）生长有抑制作用,其抑制率均小于50%,初步确定此浓度范围可用于肥大细胞酶学实验。小鼠脾淋巴细胞增殖实验中,阳性药地塞米松和Q3、Q4在浓度范围为1100μg/mL时对淋巴细胞增殖的抑制率均小于50%,此药物浓度范围可用于ELISA实验。（2）两个细胞模型（RBL-2H3细胞和RPMC脱颗粒反应模型）基本建立,阳性药色甘酸钠可抑制RBL-2H3细胞和RPMC脱颗粒释放β-己糖胺酶（与模型组比较,P<0.01）。（3）应用RBL-2H3细胞和RPMC脱颗粒反应模型筛选天然药物提取物Q1Q4,得到可能具有抑制肥大细胞脱颗粒反应活性的提取物Q3、Q4。（4）ELISA实验中,Q3、Q4均可同时下调小鼠淋巴细胞因子IL-4和IFN-γ水平（与模型组比较,P<0.01）,可能参与Th1/Th2平衡的调节。结论:本课题实验探讨了不同来源肥大细胞（RBL-2H3细胞和RPMC）脱颗粒反应在抗Ⅰ型过敏反应药物筛选方面的相似性,初步建立了两个抗Ⅰ型超敏反应药物体外细胞筛选模型,同时应用这些模型筛选天然药物Q的不同提取物Q1Q4。Q3和Q4抑制RBL-2H3细胞和RPMC脱颗粒释放β-己糖胺酶,可能为Q植物抗Ⅰ型超敏反应活性部位。Q3和Q4抑制致敏小鼠分泌IL-4和IFN-γ,可能参与调节Th1/Th2平衡。
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