论文摘要
目的：在体外试验系统，探讨浏阳霉素乳剂（Liuyangmycin emulsifiable concentrate，LY-EC）对L-02肝细胞抗氧化系统及线粒体能量代谢的影响，为进一步研究浏阳霉素肝损害的毒性机制奠定实验基础。方法：用L-02肝细胞为受试细胞，通过MTT试验检测LY-EC对L-02肝细胞存活率的影响，在＞60％细胞存活率的浓度下设置6个试验组即100mg／L、25mg／L、6.25mg／L、1.56mg／L、0.39mg／L LY-EC处理组和1个对照组，LY-EC处理细胞时间为12h。用化学比色法测定谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）、肝细胞线粒体琥珀酸脱氢（SDH）、细胞膜ATP酶、谷胱甘肽—S转移酶（GST）活性和线粒体膜通透性转运孔（PTP）开放度；用高效液相色谱法检测不同浓度LY-EC对肝细胞中腺苷酸（ATP，ADP，AMP）含量的影响，并分析ATP／ADP比值以及负荷能量（EC）的变化；电镜观察高、中浓度LY-EC对线粒体超微结构的影响。结果：在100mg／L-0.39mg／L处理浓度范围，LY-EC对L-02肝细胞具有明显细胞毒性，其细胞存活指数与LY-EC处理浓度呈负明显相关（r=-0.939）。LY-EC处理的肝细胞与对照组比较，其细胞SOD、SDH、ATP酶与GST活性显著降低（P＜0.05），线粒体PTP开放度与MDA含量明显增加（P＜0.05），并观察到明显的浓度-效应关系。染毒组肝细胞内GSH、总腺苷酸含量（TAN）、ATP／ADP比值与对照组比较显著降低（P＜0.05），LY-EC处理组Ec值与对照组比较明显增加（P＜0.05），但均未观察到明显的浓度-效应关系。电镜观察发现LY-EC高、中浓度染毒组肝细胞胞浆水肿，线粒体肿胀变形，嵴不完整甚至消失，内质网扩张，严重者出现空泡样变，周围积聚大量的溶酶体，发生膜破裂。结论：LY-EC对L-02肝细胞存在氧化损伤作用；对L-02肝细胞线粒体能量代谢存在抑制作用。