彭万里:恶臭假单胞菌SJTE-1中转化17β-雌二醇的3-酰基-ACP还原酶的鉴定与功能研究(英文)论文

彭万里:恶臭假单胞菌SJTE-1中转化17β-雌二醇的3-酰基-ACP还原酶的鉴定与功能研究(英文)论文

本文主要研究内容

作者彭万里,古丽米娜,郑达宁,梁如冰(2019)在《恶臭假单胞菌SJTE-1中转化17β-雌二醇的3-酰基-ACP还原酶的鉴定与功能研究(英文)》一文中研究指出:【目的】假单胞菌SJTE-1可高效转化17β-雌二醇,但是催化该转化的酶尚不清楚。本文鉴定了该菌株的一个新的3-酮酰基-ACP还原酶(ANI01589.1),并对其进行了功能研究。【方法】首先,我们克隆了该3-酰基-ACP还原酶的编码基因,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中进行了异源表达;利用金属离子亲和层析法,纯化获得了重组蛋白。体外检测了重组蛋白的活性与酶学性质,并利用高效液相色谱法(HPLC)测定了该酶的催化产物。【结果】3-酮酰基-ACP还原酶可被17β-雌二醇诱导表达,重组蛋白纯化量可达19.6mg/L。蛋白序列比对结果表明,该蛋白包含短链脱氢酶/还原酶(SDR)的2个共有区域和多个保守残基。该酶以NAD+为辅助因子,将17β-雌二醇转化为雌酮;其Km值为0.071 mmol/L, kcat值为2.4±0.06/s–1,5 min内可转化超过95.8%的雌二醇。该酶的最佳反应温度为42°C,最佳pH为8.0。不同二价离子对该酶的活性影响不同,Mg2+和Mn2+可增强其酶活性。【结论】这一假单胞菌SJTE-1来源的3-酮酰基-ACP还原酶可高效催化17β-雌二醇的转化,该酶可能在该菌株的雌激素代谢过程中起到重要作用。

Abstract

【mu de 】jia chan bao jun SJTE-1ke gao xiao zhuai hua 17β-ci er chun ,dan shi cui hua gai zhuai hua de mei shang bu qing chu 。ben wen jian ding le gai jun zhu de yi ge xin de 3-tong xian ji -ACPhai yuan mei (ANI01589.1),bing dui ji jin hang le gong neng yan jiu 。【fang fa 】shou xian ,wo men ke long le gai 3-xian ji -ACPhai yuan mei de bian ma ji yin ,zai da chang gan jun BL21(DE3)jun zhu zhong jin hang le yi yuan biao da ;li yong jin shu li zi qin he ceng xi fa ,chun hua huo de le chong zu dan bai 。ti wai jian ce le chong zu dan bai de huo xing yu mei xue xing zhi ,bing li yong gao xiao ye xiang se pu fa (HPLC)ce ding le gai mei de cui hua chan wu 。【jie guo 】3-tong xian ji -ACPhai yuan mei ke bei 17β-ci er chun you dao biao da ,chong zu dan bai chun hua liang ke da 19.6mg/L。dan bai xu lie bi dui jie guo biao ming ,gai dan bai bao han duan lian tuo qing mei /hai yuan mei (SDR)de 2ge gong you ou yu he duo ge bao shou can ji 。gai mei yi NAD+wei fu zhu yin zi ,jiang 17β-ci er chun zhuai hua wei ci tong ;ji Kmzhi wei 0.071 mmol/L, kcatzhi wei 2.4±0.06/s–1,5 minnei ke zhuai hua chao guo 95.8%de ci er chun 。gai mei de zui jia fan ying wen du wei 42°C,zui jia pHwei 8.0。bu tong er jia li zi dui gai mei de huo xing ying xiang bu tong ,Mg2+he Mn2+ke zeng jiang ji mei huo xing 。【jie lun 】zhe yi jia chan bao jun SJTE-1lai yuan de 3-tong xian ji -ACPhai yuan mei ke gao xiao cui hua 17β-ci er chun de zhuai hua ,gai mei ke neng zai gai jun zhu de ci ji su dai xie guo cheng zhong qi dao chong yao zuo yong 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自微生物学报的彭万里,古丽米娜,郑达宁,梁如冰,发表于刊物微生物学报2019年10期论文,是一篇关于酮酰基还原酶论文,雌二醇论文,雌酮论文,酶活论文,转化效率论文,微生物学报2019年10期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自微生物学报2019年10期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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