糠醛对酿酒酵母应激作用的初步分析

论文摘要

本课题测定了不同白酒中的糠醛含量,证明了酱香型白酒中的糠醛含量远高于其它香型酒的糠醛含量。为了探明酱香型酒中糠醛含量显著的来源,本试验又从原料入手,分析不同轮次的发酵周期中酒醅的糠醛含量。实验结果显示,酱香型酒醅中的糠醛含量高于其它香型白酒酒醅中的糠醛含量。鉴于糠醛在酱香型白酒和酒醅中的显著性,我们接着分析了糠醛对酵母产LYCD（Live Yeast Cell Derivative,活性酵母细胞衍生物）的影响,通过单因素实验及完全实验,确定了产生高活性LYCD的最佳条件为:糠醛的浓度为0.30mL/L,作用时间为15min。提取了糠醛最佳应激条件下酵母细胞的总RNA,利用设计合成的引物对RNA进行RT-PCR扩增,最后通过琼脂糖凝胶电泳对HSP70基因在糠醛刺激前后表达情况进行半定量分析。结果显示,糠醛应激后较糠醛应激前,HSP70基因表达量明显较高,说明糠醛应激导致了HSP70基因表达量的增加。

论文目录

• 目录
• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 糠醛和白酒香味成分的基本理论
• 1.1.1 糠醛的生产及应用现状
• 1.1.2 白酒香味成分的分析
• 1.1.3 酱香型白酒中的微量成分分析
• 1.2 活性酵母细胞衍生物
• 1.2.1 活性酵母细胞衍生物
• 1.2.2 活酵母细胞衍生物的应用
• 1.3 热应激蛋白分析的进展与前景
• 1.3.1 HSPs的生物学功能
• 1.3.2 HSPs与疾病
• 1.3.3 HSPs分析展望
• 1.3.4 热激蛋白HSP70的分析及应用
• 1.4 本论文分析的内容、目的和意义
• 1.4.1 分析内容
• 1.4.2 论文分析的目的和意义
• 第二章 糠醛含量与白酒香型之间的关系
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 仪器和器皿
• 2.1.2 试剂
• 2.2 测定方法
• 2.3 试验结果
• 2.3.1 白酒中糠醛标准曲线的绘制
• 2.3.2 不同白酒中的糠醛含量
• 2.4 结果讨论
• 第三章 酒醅中糠醛含量的测定
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 样品来源及采样方法
• 3.1.2 仪器和器皿
• 3.1.3 试剂
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 预处理
• 3.2.2 浓缩抽提
• 3.2.3 用紫外分光光度法进行测定
• 3.3 试验结果
• 3.4 结果讨论
• 第四章 糠醛对酿酒酵母的应激作用
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料菌株
• 4.1.2 培养基
• 4.1.3 仪器和器皿
• 4.1.4 试剂
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 斜面菌种的活化
• 4.2.2 菌体的培养
• 4.2.3 生长曲线的测定方法
• 4.2.4 LYCD的制备
• 4.2.5 LYCD活性的测定
• 4.3 试验结果
• 4.3.1 生长曲线的制定
• 4.3.2 不同的pH值对酵母生长的影响
• 4.3.3 糠醛的作用浓度
• 4.3.4 糠醛的作用时间
• 4.3.5 完全实验
• 4.4 结果讨论
• 第五章 糠醛应激前后酵母HSP70基因表达情况的分析
• 5.1 实验材料仪器
• 5.1.1 实验菌株
• 5.1.2 仪器和器皿
• 5.1.3 试剂
• 5.2 实验方法
• 5.2.1 PCR引物的设计与合成
• 5.2.2 酵母组织细胞的收集
• 5.2.3 酵母总RNA的提取
• 5.2.4 酵母总RNA质量和浓度检测
• 5.2.5 RT-PCR反应和cDNA的扩增
• 5.3 试验结果及分析
• 5.3.1 酵母总RNA的质量检测
• 5.3.2 HSP70基因PCR结果
• 5.3.3 糠醛应激前后HSP70基因表达情况分析
• 5.4 讨论
• 第六章 结论与讨论
• 6.1 结论
• 6.2 论文的创新点
• 6.3 讨论
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 硕士期间发表的论文