阿胶及驴胶补血颗粒中多种氨基酸含量测定方法的研究

论文摘要

目的：通过异硫氰酸苯脂柱前衍生RP HPLC法建立阿胶中多种氨基酸的含量测定方法,并对十批以上药材进行指纹图谱相似度评价；建立驴胶补血颗粒中多种氨基酸的含量测定方法,并对十批以上制剂进行指纹图谱相似度评价。方法：将样品置于安瓿瓶中,加6mol/L盐酸水解并用0.1mol/L盐酸溶液定容后,用异硫氰酸苯脂衍生化,采用HPLC法测定。色谱柱为Hypersil ODS2 C18色谱柱（4.6mm×200mm,5μm）；以乙腈-0.1mol/L醋酸钠溶液（3：97）为流动相A,以乙腈-水（4：1）为流动相B,梯度洗脱；检测波长为254nm；流速：1.0mL/min；柱温为30℃；进样量：5μL。定位样品中各峰,测定L-谷氨酸、L-羟脯氨酸、甘氨酸、L-丙氨酸、L-精氨酸、L-脯氨酸的含量,并采用国家药典委员会开发的中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版,对10批以上药材或制剂的HPLC指纹图谱进行相似度评价,构建对照指纹图谱。结果：1.我们通过异硫氰酸苯脂柱前衍生RP HPLC法建立了阿胶及驴胶补血颗粒中氨基酸的含量测定方法,选择了6种主要的氨基酸进行含量测定能较好地反映阿胶中蛋白质及氨基酸的情况。阿胶中含有17种氨基酸,其中L-谷氨酸、L-羟脯氨酸、甘氨酸、L-丙氨酸、L-精氨酸、L-脯氨酸6种氨基酸平均含量之和阿胶为64.33%，驴胶补血颗粒为5.900%。2.分析得到阿胶、驴胶补血颗粒HPLC指纹图谱及各项技术参数,10批阿胶指纹图谱相似度都在0.998以上,17批驴胶补血颗粒指纹图谱相似度都在0.999以上。结论：本研究试验方法操作相对于用氨基酸分析仪检测简便、稳定、适用性广,精密度好,准确可靠。扩展了能同时测定的氨基酸的种类,建立了阿胶及驴胶补血颗粒中氨基酸的含量测定方法,可用于阿胶及驴胶补血颗粒的质量控制。

论文目录

• 英文缩写对应中文
• 中文摘要
• abstract
• 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 材料与仪器试剂
• 1.1.1 实验材料
• 1.1.2 主要仪器设备
• 1.1.3 主要试剂
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 色谱条件与系统适用性试验
• 1.2.2 氨基酸色谱峰定位
• 1.2.3 溶液制备
• 1.2.4 方法学考察
• 1.2.5 含量测定
• 1.2.6 数据处理
• 2 结果与分析
• 2.1 17种氨基酸定位
• 2.2 阿胶中六种氨基酸的含量测定
• 2.2.1 线性及范围
• 2.2.2 精密度（重复性）
• 2.2.3 准确度试验
• 2.2.4 耐用性
• 2.2.5 十批阿胶六种氨基酸含量测定
• 2.3 阿胶的HPLC指纹图谱研究
• 2.3.1 测定条件的选择
• 2.3.2 阿胶药材的指纹图谱及各项技术参数
• 2.3.3 方法学研究
• 2.3.4 相似度计算
• 2.4 驴胶补血颗粒中六种氨基酸的含量测定
• 2.4.1 线性
• 2.4.2 专属性
• 2.4.3 精密度（重复性）
• 2.4.4 准确度试验
• 2.4.5 耐用性
• 2.4.6 十七批驴胶补血颗粒成品六种氨基酸含量测定
• 2.5 驴胶补血颗粒的HPLC指纹图谱研究
• 2.5.1 测定条件的选择
• 2.5.2 驴胶补血颗粒的指纹图谱及各项技术参数
• 2.5.3 方法学研究
• 2.5.4 相似度计算
• 3 讨论
• 3.1 本研究的创新之处
• 3.2 实验中涉及的一些问题
• 3.3 优化色谱条件以分离多种氨基酸
• 结论
• 1.阿胶中氨基酸种类及部分氨基酸含量
• 2.驴胶补血颗粒中氨基酸的含量测定标准草案
• 3.指纹图谱
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 附录1 阿胶及驴胶补血颗粒中多种氨基酸含量测定方法的研究文献综述
• 参考文献
• 附录2 攻读硕士学位期间参与科研项目及发表论文情况
• 附录3 附图