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红花籽粕中阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺富集工艺研究

2020-12-02阅读(271)

红花籽粕中阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺富集工艺研究

论文摘要

红花籽粕中阿魏酰5-羟色胺（FS）和香豆酰5-羟色胺（CS）具有抗氧化、抗肿瘤和消炎抑菌作用,可应用于食品、医药、化妆品等领域,具有广阔的开发前景。本文系统研究了红花籽粕中阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺的富集工艺。通过单因素试验及正交实验优化确定苯丙烯酰5-羟色胺化合物提取工艺为:提取溶剂60%乙醇,提取时间90min、提取温度65℃、料液比1:20,原料粉碎过筛35目;苯丙烯酰5-羟色胺化合物得率为0.784%,粗提物得率为9.96%,粗提物中苯丙烯酰5-羟色胺化合物纯度为7.87%,阿魏酰5-羟色胺（FS）、香豆酰5-羟色胺（CS）、香豆酰色胺单葡萄糖苷（CSG）、阿魏酰色胺单葡萄糖苷（FSG）含量分别为3.82、2.58、0.53和0.94 %。对60%乙醇溶液提取红花籽粕苯丙烯酰5-羟色胺化合物动力学过程进行了分析,以Fick第一定律为基础得到了提取缩芯模型,确定溶解的苯丙烯酰5-羟色胺化合物通过红花籽粕颗粒通道向颗粒表面扩散为控制速率步骤,且提取时间t与成线性关系,结果表明该模型适用于预测、设计和优化。采用β-葡萄糖苷酶对粗提物中苯丙烯酰5-羟色胺配糖物进行水解,通过单因素试验和响应面分析得到酶解优化条件为:粗提物浓度为3.3g/L,pH=5.9,47℃,加酶量3.00%（g/g粗提物）,水解10.5h,FSG和CSG的转化率分别达到94.6%和90.0%,转化物中FS和CS含量分别达到3.46%和4.30%,提高了样品中FS和CS的含量。采用D818弱碱性大孔阴离子交换树脂对酶处理液中FS、CS进行富集,最佳吸附和解吸条件:进样液中FS、CS的浓度分别为30-50、25-41μg/mL,pH=9.1,吸附流速1.5mL/min;洗脱剂为pH3.2的80%乙醇,洗脱流速1.0mL/min,FS、CS的收率分别为86.3%和85.6%,FS、CS含量分别达到23.6%和19.4%,达到了富集目的。采用XDA-1大孔吸附树脂对离子交换柱解吸物进行纯化,得到FS和CS混合物粗品,其中FS和CS的含量分别为32.2%和25.9%,收率分别为85.4%和83.3%。采用硅胶柱层析,石油醚/丙酮体系梯度洗脱,空塔流速0.074cm/min,进样量0.012g/g硅胶,得到FS和CS纯度分别为49.3%和40.2%。混合物,收率分别为91.3%和92.7%。HPLC-ELSD、红外光谱和质谱表明,富集纯化过程没有改变FS和CS的结构。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 绪论
  • 1.1 红花概述
  • 1.2 红花籽中的苯丙烯酰5-羟色胺化合物及其它主要植物化学成分
  • 1.3 阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺研究进展
  • 1.3.1 阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺的分布
  • 1.3.2 阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺的检测方法
  • 1.3.3 红花籽阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺的提取方法
  • 1.3.4 阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺的生物转化
  • 1.3.5 红花籽阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺的分离纯化
  • 1.3.6 阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺的生物活性
  • 1.4 立题依据及意义
  • 1.5 主要研究内容
  • 第二章 红花籽粕苯丙烯酰5-羟色胺化合物的提取工艺及其缩芯提取模型
  • 2.1 引言
  • 2.2 材料与仪器
  • 2.2.1 材料与试剂
  • 2.2.2 实验仪器
  • 2.3 实验方法
  • 2.3.1 红花籽粕苯丙烯酰5-羟色胺化合物HPLC 分析方法
  • 2.3.2 红花籽粕苯丙烯酰5-羟色胺化合物的提取
  • 2.3.3 提取溶剂的选择
  • 2.3.4 单因素实验
  • 2.3.5 正交实验
  • 2.4 结果与分析
  • 2.4.1 红花籽粕苯丙烯酰5-羟色胺化合物HPLC 分析
  • 2.4.2 提取溶剂的影响
  • 2.4.3 单因素实验
  • 2.4.4 正交实验
  • 2.4.5 验证实验
  • 2.5 红花籽粕苯丙烯酰5-羟色胺化合物缩芯提取模型
  • 2.5.1 模型假设及建立
  • 2.5.2 模型的求解
  • 2.5.3 模型的验证
  • 2.6 本章小结
  • 第三章 红花籽粕苯丙烯酰5-羟色胺配糖物酶水解工艺研究
  • 3.1 引言
  • 3.2 材料与仪器
  • 3.2.1 材料与试剂
  • 3.2.2 实验仪器
  • 3.3 实验方法
  • 3.3.1 苯丙烯酰5-羟色胺的分析检测方法及转化率的计算
  • 3.3.2 缓冲液体系的选择
  • 3.3.3 单因素实验
  • 3.3.4 响应面法实验设计
  • 3.4 结果与讨论
  • 3.4.1 缓冲液体系的确定
  • 3.4.2 单因素实验
  • 3.4.3 响应面分析优化苯丙烯酰5-羟色胺配糖物酶水解工艺
  • 3.5 本章小结
  • 第四章 弱碱性大孔阴离子交换树脂富集阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺工艺研究
  • 4.1 引言
  • 4.2 材料与仪器
  • 4.2.1 材料与试剂
  • 4.2.2 实验仪器
  • 4.3 实验方法
  • 4.3.1 样品处理
  • 4.3.2 阴离子交换树脂预处理和再生
  • 4.3.3 苯丙烯酰5-羟色胺化合物分析检测方法
  • 4.3.4 静态实验
  • 4.3.5 动态实验
  • 4.4 结果与讨论
  • 4.4.1 树脂的选择
  • 4.4.2 吸附pH 值的确定
  • 4.4.3 静态吸附平衡时间
  • 4.4.4 吸附等温曲线
  • 4.4.5 穿透曲线
  • 4.4.6 进样浓度对吸附效果的影响
  • 4.4.7 吸附流速对离子交换的影响
  • 4.4.8 解吸流速对离子交换的影响
  • 4.4.9 优化工艺验证
  • 4.5 本章小结
  • 第五章 大孔吸附树脂和硅胶柱层析纯化阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺
  • 5.1 引言
  • 5.2 材料与仪器
  • 5.2.1 材料与试剂
  • 5.2.2 实验仪器
  • 5.3 实验方法
  • 5.3.1 样品处理
  • 5.3.2 XDA-1 大孔吸附树脂纯化
  • 5.3.3 硅胶柱纯化阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺
  • 5.3.4 阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺的纯度分析和鉴定
  • 5.4 结果与讨论
  • 5.4.1 XDA-1 大孔吸附树脂纯化
  • 5.4.2 硅胶柱纯化阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺
  • 5.4.3 阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺单体的纯度分析及鉴定
  • 5.5 本章小结
  • 主要结论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附录

    • 相关论文文献

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