论文摘要
番茄黄化卷叶病毒病是近年来在番茄生产上发生的一种毁灭性病害,Ty-1基因是最早发现的抗病基因。本研究以番茄黄化卷叶病毒抗病杂合体（Ty-1/ty-1）、抗病纯合体（Ty-1/Ty-1）和感病纯合体（ty-1/ty-1）为实验材料,根据已发表的与Ty-1紧密连锁的RFLP标记设计特异引物,经PCR扩增获得目的片段,然后利用相应的限制性内切酶进行酶切反应,筛选获得了两个与抗病基因Ty-1紧密连锁的CAPS标记TG97和Mi23,这两个标记都可以区别抗病杂合和抗病纯合基因型材料,是共显性CAPS标记。（1）TG97 CAPS标记:在经PCR扩增和酶切后,抗病纯合基因型材料出现398 bp、303 bp和95 bp三个特异片段;抗病纯合基因型材料出现303 bp和95 bp两个特异片段;而感病纯合基因型的只出现398 bp的片段。其引物序列为TG97 F:5’-TAA TCC GTC GTT ACC TCT CCT T-3’、TG97 R:5’-CGG ATG ACT TCA ATA GCA ATG A-3’,使用的限制性内切酶为Taq I。（2）Mi23 CAPS标记:在经PCR扩增和酶切后抗病杂合基因型材料得到402 bp和354 bp两个特异片段;抗病纯合基因型材料得到402 bp的片段;感病纯合基因型材料得到354 bp的特异片段。其引物序列为Mi23 F:5’-TGG AAA AAT GTT GAA TTT CTT TTG-3’、Mi23 R:5’-GCA TAC TAT ATG GCT TGT TTA CCC-3’,使用的限制性内切酶为Rsal。以15种不同来源和不同遗传背景的番茄为实验材料,对CAPS标记TG97和Mi23进行了验证。得到的结果证明这两个CAPS标记稳定、可靠,有效性高。综合比较发现,TG97 CAPS标记更加清晰和容易辨认,是一个比较理想的共显性标记。利用共显性CAPS标记TG97和Mi23,在苗期对番茄F2代分离群体进行辅助选择,获得了10个抗病基因纯合型的单株,其编号分别为15、20、32、33、35、36、41、43、49和58。将这10个单株种植于田间自交留种,继而对F3株系的抗病性和经济性状进行调查,初步选出优良的株系3个,即:33-1、35-1和43-1。株系33-1为无限生长型、红果、单果重160-180g、坐果率高;株系35-1为无限生长型、红果、单果重130-150g、较硬;株系43-1为无限生长型、红果、单果重110-120g、较硬、商品性好。筛选获得的与抗病基因Ty-1紧密连锁的CAPS标记TG97和Mi23,为抗病育种材料的筛选、鉴定和辅助选择育种奠定了基础。而初步选出的3个抗病优良株系,经过进一步选育有望应用于抗番茄黄化卷叶病毒育种中。
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标签：番茄论文; 番茄黄化卷叶病毒病论文; 基因论文; 标记论文; 分子标记辅助选择论文;