OATP1B1基因位点388G→A的突变对匹伐他汀在中国人体内药代动力学特征的影响

论文摘要

背景匹伐他汀是由OATP1B1转运进入肝细胞内发挥药效和代谢转化的新型他汀类药物。OATP1B1为肝脏特有的转运蛋白,其底物广泛,在肝脏摄取与转运药物中有着极其重要的作用。诸多研究表明OATP1B1基因的遗传多态性与个体间药物转运及代谢的差异密切相关,而OATP1B1基因突变是否影响匹伐他汀在国人体内的处置尚属未知。因此,探究OATP1B1基因位点多态性对匹伐他汀的药代动力学特征的影响,对基于基因导向的个体化用药具有十分重要的临床价值和意义。目的研究中国人体常见OATP1B1基因位点388G→A的突变对匹伐他汀药代动力学的影响,为临床参考遗传多态性特征来确立匹伐他汀正确合理的给药方案提供理论和试验依据。方法1.建立血浆中匹伐他汀的LC-MS测定方法,并按生物样本分析要求实施全面的方法学考察。2.以30名健康受试者为对象,采集2mL上肢静脉血,PCR-RFLP方法对受试者进行全血OATP1B1基因分型,区别388G→A突变型与野生型纯合子（非突变）受试者,并从分型结果中选出符合药代入选标准的OATP1B1 388G→A突变型和野生型的受试者进入下阶段的匹伐他汀人体药代动力学的试验研究。3.对筛选合格的9名突变型和6名野生型受试者,分组按3×3拉丁方设计三周期交叉口服1、2和4mg匹伐他汀钙片,于服药前0.0和服药后0.25﹑0.50﹑0.75﹑1.0﹑1.5﹑2.0﹑3.0﹑4.0﹑8.0﹑12.0﹑24.0﹑36.0﹑48.0h采集系列静脉血样5mL,用所建立的LC-MS方法测定血浆浓度。4.根据所测的匹伐他汀血浆浓度数据,运用DAS2.0软件求算匹伐他汀主要药代动力学参数,分析匹伐他汀人体药代动力学特征,并比较OATP1B1基因突变组和基因野生组的匹伐他汀人体药代动力学特性的差异。结果1.建立的血浆中匹伐他汀的LC-MS测定方法具有较高的灵敏度和专属性,方法学均符合生物样本分析的要求。2.利用PCR-RFLP方法查明30名健康受试者OATP1B1的388G→A位点的基因分型,结果显示有21名为OATP1B1基因位点388G→A突变者,占全部健康受试者的70%,其余OATP1B1基因野生型纯合子占全部健康受试者的30%。3.证实了中国人体在1-4mg剂量范围内,基因野生组与OATP1B1基因位点388G→A突变组的匹伐他汀的药代动力学特征符合线性关系:基因野生组与基因突变组的三剂量组的Cmax、AUC0-48、AUC0-∞均随着剂量的增加而增大;对基因野生组与基因突变组的三剂量组的Cmax、AUC0-48、AUC0-∞与给药剂量进行相关性分析,有较好的正相关性,相关系数分别为0.9725、0.9989;0.989、0.9897;0.9936、0.9877。这表明在1-4mg范围内选择口服给药剂量是可行的。4.首次发现中国人体内的匹伐他汀药代动力学特征在OATP1B1基因位点388G→A突变组与基因野生型组间存在着显著的差异。OATP1B1基因位点388G→A突变组在1,2,4mg三个剂量中的Cmax、AUC0-48、AUC0-∞值均显著高于基因野生组,而Cl/F值则明显低于基因野生组:口服1mg的匹伐他汀后,基因突变组和基因野生组的Cmax分别为27.23±5.73,12.23±1.58ng·mL-1,p=0.000;AUC0-48分别为117.12±36.94,55.86±18.9 ng·h·mL-1,P=0.003;AUC0-∞分别为126.74±44.05,60.64±18.63 ng·h·mL-1,P=0.002; Cl/F分别为8.78±2.99,17.54±4.21L·h-1,P=0.000。口服2mg的匹伐他汀后,基因突变组和基因野生组主的Cmax分别为39.22±8.45,22.897±4.03ng·mL-1 , P=0.000 ; AUC0-48分别为182.19±86.46 ,100.422±21.194 ng·h·mL-1,P=0.024;AUC0-∞分别为199.64±98.70,108.116±24.94ng·h·mL-1 , P=0.026 ; Cl/F分别为12.46±4.79 ,19.21±3.74L·h-1,P=0.012。口服4mg的匹伐他汀后,基因突变组和基因野生组的Cmax分别为94.92±13.41,47.41±11.23ng·mL-1,P=0.000;AUC0-48分别为392.12±129.66,241.63±58.3 ng·h·mL-1,P=0.011;AUC0-∞分别为406.91±138.94,266.12±65.48ng·h·mL-1,P=0.022;Cl/F分别为10.98±3.97,15.73±3.93L·h-1,P=0.032。而Ka﹑Ke﹑t1/2﹑Tmax等药代动力学参数在基因突变组和基因野生组之间无明显差异。结论中国人体常见OATP1B1基因位点388G→A突变对匹伐他汀药代动力学过程有显著影响。相对OATP1B1基因野生组,OATP1B1基因突变组匹伐他汀的吸收程度增加,消除过程减慢。临床应用中应根据OATP1B1基因位点388G→A的突变情况指导匹伐他汀合理用药。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 引言
• 第2章 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 试验对象
• 2.1.2 主要试剂和耗材
• 2.1.3 主要药物
• 2.1.4 主要仪器设备
• 2.2 方法
• 2.2.1 LC-MS 测定方法的建立
• 2.2.2 OATP1B1 基因位点 388G→A 的突变分型
• 2.3 人体药代动力学试验
• 2.4 统计分析
• 第3章 结果
• 3.1 人血浆中匹伐他汀LC-MS 测定方法的建立
• 3.2 OATP181 第4 外显子388G→A 进行分型
• 3.3 OATP181 基因位点388G→A 突变组和野生组的药代动力学特征
• 3.4 临床观察
• 第4章 讨论
• 第5章 结论与展望
• 5.1 结论
• 5.2 展望
• 致谢
• 参考文献
• 附录 综述
• 攻读学位期间的研究成果