论文摘要
第一部分Cdt1和Geminin在Jurkat细胞中的表达目的为探讨细胞复制允许因子Cdt1和复制抑制因子Geminin在白血病细胞中的表达。为白血病的发病机制、诊断治疗和预后判断提供依据。方法培养白血病细胞系Jurkat细胞,以处于对数生长期的Jurkat细胞作实验组;以正常人外周血淋巴细胞作对照组。利用RT-PCR方法检测细胞中Cdt1和Geminin mRNA的表达,进行半定量分析;利用流式细胞仪对细胞荧光强度进行定量分析,以检测细胞中的Cdt1和Geminin蛋白的表达。结果①处于对数生长期的Jurkat细胞Cdt1 mRNA及蛋白表达显著高于对照组（P＜0.05）。②处于对数生长期的Jurkat细胞Geminin mRNA及蛋白的表达显著高于对照组（P＜0.05）。结论①人T淋巴细胞性白血病细胞系Jurkat细胞,Cdt1的表达水平显著增高,可能与白血病细胞恶性增殖有关。②人T淋巴细胞性白血病细胞系Jurkat细胞,Geminin的表达水平显著增高,可能参与了白血病细胞恶性增殖。第二部分Cdt1和Geminin在K562细胞周期各时相中的表达目的为探讨细胞复制允许因子Cdt1和复制抑制因子Geminin在白血病细胞细胞周期各时相中的表达。方法培养白血病细胞系K562细胞,使用胸苷将细胞同步化。利用流式细胞仪检测K562细胞同步率（用PI染色）。同时用流式细胞仪检测细胞周期各时相细胞中的Cdt1和Geminin蛋白的表达,对细胞荧光强度进行定量分析。结果①K562细胞被胸苷阻断24h后,细胞蓄积在G1/S转换期,释放4h,细胞全部进入S期,释放12h细胞绝大部分进入G2/M期,释放24h,细胞重新恢复到对数生长期。②Cdt1和Geminin蛋白在K562细胞周期各个时相均有表达。③各时相Cdt1和Geminin在蛋白水平表达有显著差异（P＜0.05）在G1/S转换期最低,在G2/M转换期最高。结论①白血病细胞系K562细胞在细胞周期各时相中,Cdt1蛋白和Geminin蛋白均有表达。②Cdt1蛋白表达在K562细胞周期各时相分布异常,可能导致白血病细胞异常增殖。③白血病细胞K562细胞中,Geminin蛋白在细胞周期各时相分布大致正常。
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