不同毒力的MDV引起的端粒酶活性变化及MDV特异序列在宿主细胞的定位研究

论文题目: 不同毒力的MDV引起的端粒酶活性变化及MDV特异序列在宿主细胞的定位研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 生物化学与分子生物学

作者: 韩烨

导师: 张玉静

关键词: 马立克氏病,端粒,端粒酶,病毒血症,整合

文献来源: 吉林大学

发表年度: 2005

论文摘要: 本研究首次定位了马立克氏病毒(MDV)整合在宿主细胞大、中染色体的端粒附近,从而提示马立克氏病(MD)的形成与宿主细胞端粒结构有着密切的关系。两种MDV 强毒株均引起MD 肿瘤病的发生,且鸡的端粒酶活性在没有临床症状和可视病变出现之前就被激活,并与病毒血症的动态呈显著正相关。马立克氏病淋巴瘤细胞系MDCC-MSB1 的高水平的酶活性,再次阐明端粒酶在禽类病毒性肿瘤疾病中的作用;同时对酶活性大小和催化亚基的表达强度做了相关分析。meq 基因是MDV 的主要致瘤基因,MDV 强毒株在潜伏感染阶段,可同时检测到meq 和L-meq 基因,而L-meq 的检出恰好是端粒酶水平较高的阶段。MD的发病进程、特别是MDV 的潜伏感染,在某种程度上与meq 基因的变化和端粒酶活性的动态具有一定关系;MDV 强毒株在CEF 上高次数传代,均未发生meq基因的改变。本文从宿主细胞和病毒本身入手,为阐明MD 的发病机理提供可靠的理论依据,这将有助于阐明人类肿瘤的发生机理,为预防和治疗肿瘤提供理论依据,必将产生较大的经济效益和社会效益。

论文目录:

前言

第一篇 文献综述

第一章 鸡马立克氏病的研究进展

1 病原学

2 发病机理

3 MDV 基因组及其主要致瘤基因的分子生物学研究概况

第二章 端粒和端粒酶的研究进展

1 端粒的结构与生物学特性

2 端粒酶的组成及其活性调节机制

3 端粒、端粒酶与肿瘤

第二篇 研究内容

第一章 MDV-meq 基因序列在MD 宿主细胞染色体上的整合

1 材料与方法

2 结果

2.1 鸡染色体标本的制备

2.2 MDV-1 致瘤基因meq 基因的部分特异片段的扩增

2.3 以 MDV-meq 基因的部分核苷酸序列为探针的原位杂交

3 讨论

3.1 MDV 基因组特征及特异性探针的选择

3.2 原位杂交技术在实验室诊断MD 中的意义

3.3 提高荧光原位杂交技术的操作

3.4 MDV-meq 特异序列定位MD 宿主细胞染色体的意义

4 小结

第二章 感染不同毒力的MDV 后鸡的端粒酶活性及其病毒血症的动态研究

1 材料与方法

2 结果

2.1 MDV 不同毒株的体外增殖特征的判定

2.2 MDV 不同毒株的致病性的差异

2.3 接种 MDV1 京-1 株、GA 株和 CV1988 的鸡脾脏端粒酶活性的检测

2.4 鸡感染不同毒株 MDV 后的病毒血症动态

3 讨论

3.1 MDV 强毒株的致病性

3.2 端粒酶活性测定方法的可靠性

3.3 病毒血症的消长

3.4 MD 的发生发展与端粒酶活性及病毒血症变化的关系

4 小结

第三章 马立克肿瘤细胞系与其它细胞(系)端粒酶活性的比较及TERT 基因的表达

1 材料与方法

2 结果

2.1 不同样本的端粒酶活性

2.2 TERT 基因的表达检测

2.3 端粒酶活性和端粒酶催化亚基表达的相关性

3 讨论

3.1 端粒-端粒酶”假说

3.2 利用 TRAP 反应研究端粒酶酶学性质的意义

3.3 TERT 基因的意义

3.4 总 RNA 提取与 RT 反应

3.5 正常和肿瘤细胞的端粒酶的调控

4 小结

第四章 鸡接种 MDV 强毒株后meq 基因的动态监测

1 材料与方法

2 结果

2.1 感染MDV 强毒株的鸡中meq 基因的检测

2.2 MDV 强毒株的体外高次数传代

2.3 感染京-1 株和 GA 株后鸡的端粒酶活性的检测

3 讨论

4 小结

结论

参考文献

攻博期间发表的论文及其他成果

中文摘要

英文摘要

致谢

个人简历

发布时间: 2005-08-26

参考文献

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