中药复方头风愈滴丸血清药物化学研究

论文摘要

头风痛丸为治疗偏头痛的经典方,由白芷、川芎和绿茶三味药组成,具有祛风止痛的功效。该方以白芷为君药,解表散风,通窍,止痛;川芎为臣药,祛风燥湿,活血止痛;绿茶能清上而降下,防诸药过于温燥、升散,使升中有降,而为使药。头风愈滴丸为在头风痛丸基础上开发的新制剂。前期工作对头风愈滴丸进行了制剂及药效学研究,但是其药效物质基础还不明确。目的:以头风愈滴丸体内外成分的对比研究为切入点,研究其血中移形成分及有效成分的体内代谢过程,探索头风愈滴丸的药效物质基础,为该制剂质量标准科学性的提高及配伍理论的阐释奠定基础。方法:1.应用柱色谱、重结晶、1H-NMR、13C-NMR等技术方法对方中君药白芷进行化学成分的研究。2.应用HPLC指纹图谱技术对头风愈滴丸进行指纹图谱分析方法的研究。3.应用HPLC指纹图谱、GC-MS等技术对头风愈滴丸进行血清药物化学的研究,并在此基础上对血中移形成分为指标进行药动学研究,采用DAS ver1.0统计软件拟合药物动力学参数。结果:1、头风愈滴丸指纹图谱研究:对头风痛处方中君药白芷乙酸乙酯部位进行化学成分分离,得到7个化合物,为头风愈滴丸指纹图谱研究的定性分析提供佐证。建立了稳定可控的头风愈滴丸的HPLC指纹图谱分析方法,对比头风愈全方及复方中各单味药材的指纹图谱,对其主要成分进行对应药味的归属,初步阐明头风愈滴丸的主要组分,君药白芷占的数量最多,臣药川芎次之,使药绿茶最少。2、头风愈滴丸血清药物化学的研究:采用HPLC指纹色谱分析方法,研究给药头风愈滴丸的大鼠血中移行成分及其来源生药,发现13个移形成分,其中11个原型成分,2个为代谢产物,移行成分中白芷占到10个,与其君药的地位一致,结合体外指纹图谱研究结果,证明了头风痛配伍的科学性及白芷在方中的重要性。并通过GC/MS分析方法对头风愈滴丸血中移形成分进行研究,发现4个移形成分,有2个为原型成分。3、头风愈滴丸在大鼠体内的药代动力学研究:以头风愈滴丸中的镇痛有效成分欧前胡素为指标进行药动学研究,建立了HPLC法检测大鼠血清中欧前胡素的体内分析方法。测定不同时间点大鼠血清中欧前胡素的浓度,根据所得的血清药物浓度-时间曲线,采用DASver1.0房室模型统计软件拟合药动学参数,结果符合一室开放模型,吸收出现双峰现象,Tmax为3h,T1/2为2.95h,MRT为6.3h,Ka为6.087h-1,Ke为0.235h-1,AUC为6.3mg/L*h。结论:以头风愈滴丸体内外成分的对比研究为切入点,通过HPLC指纹图谱、血清药物化学和药动学的研究,初步阐释了头风愈滴丸的药效物质基础。为该制剂质量标准科学性的提高及配伍理论的阐释奠定了基础。创新点本研究在中医药整体观理论的指导下,充分认识到中药复方研究的复杂性,采用血清药物化学的研究思路,从体外成分和入血成分两个角度相结合的方法对头风愈滴丸进行研究,有利于更加科学的揭示中药复方药效物质基础及其配伍规律。同时采用体外跟踪分离目标成分来确定药效物质基础,具有体内筛选、快速、命中率高及符合中医药作用特点的优势,为阐明和发扬中医药理论体系提供新的研究途径和方法。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• 英文缩写词对照表
• 引言
• 正文
• 第一章 头风愈滴丸指纹图谱研究
• 1 白芷镇痛有效部位化学成分研究
• 1.1 药材及对照品
• 1.2 提取与分离
• 1.3 成分的定性鉴别及结构鉴定
• 2 头风愈滴丸指纹图谱研究
• 2.1 头风愈滴丸指纹图谱方法的建立
• 2.2 头风愈滴丸与方中各单味药指纹图谱的比较分析
• 3 小结
• 第二章 复方头风愈滴丸血清药物化学研究
• 1 血清色谱指纹图谱的建立
• 1.1 实验仪器、材料、动物
• 1.2 实验样品的制备
• 1.3 样品的测定
• 1.4 小结
• 2 血中移形成分分析
• 2.1 HPLC法分析血中移形成分
• 2.2 GC/MS分析血中移形成分
• 3 小结
• 第三章 头风愈滴丸中欧前胡素在大鼠体内的药动学研究
• 1 仪器、试药及动物
• 1.1 仪器
• 1.2 试剂与药品
• 1.3 实验动物
• 2 大鼠血清样品中欧前胡素的HPLC分析
• 2.1 色谱条件
• 2.2 欧前胡素系列标准溶液的配制
• 2.3 血清样品的预处理
• 2.4 分析方法的考查
• 3 头风愈滴丸中欧前胡素在大鼠体内的药动学研究
• 3.1 头风愈灌胃剂的制备
• 3.2 给药方案和血样的采集
• 3.3 实验结果
• 4 小结
• 第四章 总结与讨论
• 1 总结
• 1.1 头风愈滴丸体外指纹图谱的研究
• 1.2 头风愈滴丸血清药化学研究
• 1.3 头风愈滴丸中欧前胡素的药动学研究
• 2 讨论
• 2.1 创新和特色
• 2.2 存在的问题
• 2.3 展望
• 参考文献
• 附图
• 致谢
• 后置部分
• 文献综述
• 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果