论文摘要
目的:通过观察头穴丛刺法对大鼠脑缺血再灌注(Cerebralischemia-reperfusion,CIR)后脑水肿和炎症反应的影响,探讨头穴丛刺法的脑保护作用及可能机制。方法:采用改良的线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型;将Wistar雄性大鼠随机分成3组:假手术组、脑缺血再灌注模型组(模型组)、脑缺血再灌注后头穴丛刺组(头穴丛刺组),各组随机分成再灌注后6h、24h、48h、72h、120h五个时间点对大鼠进行实验观察:(1)干湿重法测量各组大鼠各时间点脑水含量的变化;(2)HE染色法观察大鼠脑组织病理形态学改变;(3)免疫组织化学技术检测大鼠CIR后AQP4的表达及头穴丛刺法对其的影响;(4)酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组大鼠各时间点血浆TNF-α含量及头穴丛刺治疗对其的影响。结果:(1)与假手术组比较,大鼠脑缺血再灌注后不同时间点模型组、头穴丛刺组均出现不同程度的脑水含量升高,两两比较具有显著性差异(P<0.05);头穴丛刺组在再灌注后6h、24h、48h与模型组比较无显著性差异(P>0.05),72h、120h时均可见脑水含量明显减少,优于模型组,具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。(2)HE染色显示:假手术组脑组织结构完整,神经细胞、胶质细胞及毛细血管形态正常,各时间段均未见炎性细胞浸润及梗死灶出现;模型组缺血脑组织存在明显的水肿,神经元及胶质细胞肿胀、变性、坏死,可见炎性细胞浸润,以再灌注后48 h和72h为著;头穴丛刺组于再灌注后72h、120h较模型组神经细胞肿胀和间质水肿减轻,炎性细胞浸润降低,神经元数量及新生毛细血管增多。(3)免疫组化结果显示:与假手术组比较,模型组于再灌注后6h~72h,头穴丛刺组于再灌注后6h~120h,AQP4表达均出现不同程度的降低,两两比较具有显著性差异(P<0.05);与模型组比较,头穴丛刺组于再灌注后24h~120h可见AQP4表达降低,具有显著性差异(P<0.05)。(4)ELISA法测定血浆TNF-α含量结果显示:与假手术组比较,模型组和头穴丛刺组大鼠于6h~72h时间点血浆TNF-α含量明显升高,两两比较具有显著性差异;头穴丛刺组血浆TNF-α含量与模型组比较于再灌注后24h~72h均明显降低,有统计学意义(p<0.05,P<0.01)。结论:(1)头穴丛刺法能够明显降低脑缺血再灌注后大鼠脑水含量,减轻脑水肿。(2)头穴丛刺法能够减轻脑缺血再灌注后大鼠神经细胞肿胀和间质水肿以及炎症反应程度,促进缺血区损伤神经元的修复、胶质细胞和毛细血管的增生,从病理形态学角度揭示头穴丛刺法的神经解剖学可塑性。(3)头穴丛刺法能够调节脑缺血再灌注后大鼠AQP4的表达,减轻脑水肿。(4)头穴丛刺法能够降低轻脑缺血再灌注后大鼠血浆TNF-α水平,减轻缺血再灌注后炎症反应。
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