多西他赛脂质体稳定性研究

论文摘要

多西他赛（docetaxel）是近年来开发的一种广谱抗癌药,对乳腺癌、肺癌、头颈癌等多种癌症有很好的治疗作用。脂质体（liposomes,LP）近年来广泛用作抗癌药物的载体,具有提高被包封药物稳定性、靶向性、长效性、降低使用剂量等特点。液态的脂质体是一种混悬液,在贮存过程中容易发生凝聚、融合,并导致所包合药物的泄露。因此,探索提高多西他赛脂质体稳定性的方法具有重要的意义。本论文围绕提高多西他赛脂质体稳定性问题,进行了以下几个方面的工作:（1）采用薄膜分散法制备了多西他赛脂质体。采用透析法分离游离药物和脂质体,计算脂质体的包封率、渗漏率。以包封率为指标,采用正交设计实验摸索多西他赛脂质体的最佳制备条件,结果表明脂质体的包封率可达87.32%。透射电镜观察脂质体大多为球形或椭圆形,动态光散射显示冻干前后的粒径分布范围都比较窄,说明体系的物理稳定性较好。（2）研究了冷冻干燥对脂质体稳定性的影响。在最佳制备条件的基础上,添加葡萄糖、蔗糖、壳聚糖等保护剂进行冷冻干燥,考察了冻干产品的形态、再分散性、均一性等指标,确定了添加保护剂的合适比例,分别为卵磷脂与葡萄糖、蔗糖、葡萄糖和蔗糖混合物的比例为1:1,卵磷脂与壳聚糖的比例为1:2。对冻干前后的样品进行透射电镜分析,利用电导法测定了相转化温度。结果表明,冷冻干燥前后粒子的分散性均比较好,冻干处理和添加保护剂均使粒子的尺寸变大。相转化温度测定结果显示,冷冻干燥对空白脂质体影响不大,但对载药脂质体影响显著,冷冻干燥后多西他赛脂质体的相转化温度提高20℃以上,稳定性明显提高。（3）研究了添加环糊精对多西他赛脂质体的影响。添加了α,β和γ三种环糊精,考察了脂质体的外观、再分散性、尺寸均一性等特性,发现以β-环糊精的添加效果最好。透射电镜分析表明,添加β-环糊精的脂质体颗粒较圆整,饱满;相转化温度测定结果显示,环糊精对冻干脂质体的相转变温度没有明显的影响,但对脂质体的药物渗漏率影响较大。脂质体混悬液保存30天时,添加环糊精的脂质体与未添加的脂质体相比,药物渗漏率下降了35%以上。添加环糊精有助于降低药物渗漏,提高脂质体的稳定性。（4）研究了添加PEG对多西他赛脂质体的影响,药物渗漏率测定结果表明,添加PEG可以有效降低脂质体的药物渗漏率,提高脂质体的稳定性。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 脂质体简介
• 1.1.1 脂质体的发现和发展
• 1.1.2 脂质体的分类及特点
• 1.1.2.1 脂质体的分类
• 1.1.2.2 脂质体的特点
• 1.1.3 脂质体制备方法
• 1.1.3.1 薄膜分散法
• 1.1.3.2 逆相蒸发法
• 1.1.3.3 乙醇注入法
• 1.1.3.4 冷冻干燥法
• 1.1.3.5 高压乳匀法
• 1.1.4 新型脂质体研究
• 1.1.4.1 热敏脂质体
• 1.1.4.2 磁性脂质体
• 1.1.4.3 pH 敏感脂质体
• 1.1.4.4 纳米脂质体
• 1.1.5 脂质体作为药物载体的应用
• 1.1.5.1 抗肿瘤药物载体
• 1.1.5.2 抗寄生虫药物的载体
• 1.1.5.3 抗菌药物载体
• 1.1.5.4 解毒剂载体
• 1.1.5.5 作为免疫激活剂
• 1.2 脂质体的稳定性
• 1.2.1 脂质体的物理稳定性
• 1.2.1.1 脂质体粒径的变化
• 1.2.1.2 包封率变化
• 1.2.2 脂质体化学稳定性
• 1.2.2.1 氧化
• 1.2.2.2 水解
• 1.3 提高脂质体稳定性的方法
• 1.3.1 冷冻干燥技术
• 1.3.2 环糊精包合技术提高脂质体的稳定性
• 1.3.2.1 提高易水解药物的稳定性
• 1.3.2.2 提高易氧化或光解药物的稳定性
• 1.3.2.3 提高药物在血浆中的稳定性
• 1.3.3 聚乙二醇（PEG）修饰提高脂质体的稳定性
• 1.4 多西他赛
• 1.4.1 多西他赛简介
• 1.4.2 多西他赛脂质体研究进展
• 1.5 本课题研究内容及意义
• 第二章 实验部分
• 2.1 实验仪器和试剂
• 2.1.1 主要实验仪器
• 2.1.2 主要实验试剂
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 溶液的配制
• 2.2.2 多西他赛脂质体的制备
• 2.2.3 实验确定多西他赛脂质体最佳配方
• 2.2.4 多西他赛脂质体药物含量及包封率
• 2.2.4.1 色谱条件
• 2.2.4.2 检测波长的确定
• 2.2.4.3 溶液的配制及标准曲线的建立
• 2.2.4.4 精密度实验
• 2.2.4.5 回收率实验
• 2.2.4.6 脂质体包封率的测定
• 2.2.4.7 脂质体分离方法
• 2.2.5 多西他赛脂质体冷冻干燥
• 2.2.5.1 冻干保护剂的加入方式
• 2.2.5.2 冻干保护剂的选择要求
• 2.2.5.3 保护剂的选择
• 2.2.5.4 含保护剂多西他赛脂质体的制备方法
• 2.2.6 环糊精包合对提高多西他赛脂质体稳定性研究
• 2.2.6.1 制备方法
• 2.2.6.2 环糊精种类的选择对多西他赛脂质体稳定性影响
• 2.2.6.3 高效液相色谱法测定环糊精-多西他赛脂质体渗漏率
• 2.2.7 PEG 化对提高多西他赛脂质体稳定性研究
• 2.2.7.1 制备方法
• 2.2.7.2 高效液相色谱法评价PEG-多西他赛脂质体的渗漏率
• 2.3 对多西他赛脂质体稳定性评价
• 2.3.1 电导法测定多西他赛脂质体相转化温度及制剂稳定性
• 2.3.2 透射电镜分析
• 2.3.3 动态光散射分析
• 2.3.4 高效液相色谱法测定渗漏率
• 第三章 结果与讨论
• 3.1 HPLC 检测方法
• 3.1.1 多西他赛标准曲线的建立
• 3.1.2 精密度实验
• 3.1.3 回收率实验
• 3.1.4 多西他赛脂质体的包封率实验结果
• 3.2 冷冻干燥法对多西他赛脂质体稳定性的影响
• 3.2.1 冻干保护剂剂的选择
• 3.2.2 形态学研究
• 3.2.3 粒径及其分布测定
• 3.2.4 脂质体相转化温度测定
• 3.3 添加环糊精（CD）对多西他赛脂质体的影响
• 3.3.1 CD-脂质体的特性
• 3.3.2 β-CD-脂质体的鉴定
• 3.3.3 β-CD-多西他赛脂质体的透射电镜图
• 3.3.4 β-CD-多西他赛脂质体相转变温度测定
• 3.3.5 高效液相色谱法测定脂质体混悬液的渗漏率
• 3.4 添加PEG 对多西他赛脂质体的影响
• 第四章 结论
• 参考文献
• 发表论文和科研情况说明
• 致谢