小鼠子宫内膜细胞MHC Ⅱ表达的研究

论文摘要

主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex , MHC）Ⅱ类分子是参与抗原递呈作用的主要物质,主要表达于免疫递呈细胞（APC）,在诱发免疫应答中起重要作用。研究显示,MHCⅡ抗原在小肠绒毛上皮细胞、呼吸道上皮细胞均有MHCⅡ抗原表达,提示上述细胞通过MHCⅡ类途径加工递呈抗原。目前对子宫内膜是否也具有非专职抗原呈递的细胞研究甚少。为了探讨MHCⅡ在小鼠子宫内膜中的表达和变化规律,试验应用免疫组织化学染色,检测了不同日龄小鼠子宫内膜组织和体外培养的小鼠子宫内膜细胞的表达及其变化,同时,测定了细胞外基质（extracellular matrix,ECM）胶上培养,雌二醇和孕酮激素刺激,病毒刺激的淋巴细胞条件培养液等因素对体外培养的小鼠子宫内膜细胞MHCⅡ表达的影响。获得以下结果:1.检测了10个不同日龄（出生后5 d,15 d,30 d,60 d,妊娠1 d,妊娠4 d,妊娠6 d,妊娠9 d,妊娠15 d,妊娠18 d）小鼠子宫MHCⅡ的表达水平。结果表明,检测的各日龄子宫内膜基质细胞和上皮细胞均有MHCⅡ表达,出生后5 d,15 d,30 d,第60天,随着日龄增加,表达依次增强,差异显著（P<0.05）。第60天,MHCⅡ表达最强,但进入妊娠期MHCⅡ表达减弱。在妊娠期,妊娠1 d,妊娠4 d,妊娠6 d,妊娠9 d这几组间MHCⅡ的表达无明显差异。而妊娠18 d与其它组均差异显著（P<0.05）,MHCⅡ表达量最弱。2.体外培养的原代小鼠子宫内膜基质细胞和上皮细胞在培养第2～4天时MHCⅡ表达呈阳性,随培养时间的延长,MHCⅡ的表达逐渐减弱,至第5天,MHCⅡ检测呈阴性。3.培养在铺有ECM胶上的小鼠子宫内膜基质细胞和上皮细胞在培养的第5天仍可检测到MHCⅡ的表达。添加雌二醇和孕酮,对细胞的MHCⅡ表达没有显著影响。4.体外培养第5天的小鼠子宫内膜基质细胞和上皮细胞培养液中加入病毒刺激的淋巴细胞条件培养液,可诱导其表达MHCⅡ。上述结果为阐明小鼠子宫内膜细胞在局部免疫-内分泌调节中的作用提供了试验依据。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 子宫内膜在局部免疫调节作用中的研究进展
• 1.1 生殖道粘膜免疫的研究概况
• 1.1.1 生殖道黏膜抗原递呈细胞（APC）
• 1.1.2 生殖道黏膜免疫的效应细胞
• 1.1.3 生殖道黏膜的免疫球蛋白
• 1.1.4 女性生殖道黏膜免疫的调节
• 1.2 子宫内膜上皮细胞在局部免疫调节中的作用
• 1.2.1 抗原递呈作用
• 1.2.2 子宫内膜上皮细胞通过分泌方式调节免疫
• 1.3 子宫内膜基质细胞对淋巴细胞的影响
• 1.3.1 通过上皮细胞对淋巴细胞间接发挥作用
• 1.3.2 对淋巴细胞的直接作用
• 1.4 淋巴细胞对子宫内膜的影响
• 1.5 研究方法
• 1.5.1 淋巴细胞转化试验
• 1.5.2 淋巴细胞转化试验在研究子宫内膜细胞局部免疫作用中的应用
• 1.5.3 子宫内膜细胞的测量指标及判定标准
• 1.5.4 套皿（插入式培养皿）在子宫内膜细胞与淋巴细胞关系研究中的应用
• 1.6 可进一步研究的方向
• 1.6.1 基质细胞在局部免疫中的作用
• 1.6.2 淋巴细胞对胚胎体外培养的影响
• 1.6.3 将淋巴细胞分纯进行共培养研究
• 第二章 MHC Ⅱ在小鼠子宫的表达
• 2.1 材料方法
• 2.1.1 主要试剂与仪器
• 2.1.2 实验动物和分组
• 2.1.3 小鼠子宫MHC Ⅱ表达的检测
• 2.1.4 显微摄影、图像分析及数据处理
• 2.2 结果
• 2.2.1 MHC Ⅱ在小鼠子宫中的表达及变化
• 2.2.2 MHC Ⅱ在小鼠子宫内膜上皮细胞和基质细胞的表达强弱差异
• 2.3 讨论
• 第三章 小鼠子宫内膜细胞的体外培养及其MHC Ⅱ的表达
• 3.1 材料方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 方法
• 3.2 结果
• 3.2.1 子宫内膜细胞的生长状态及鉴定结果
• 3.2.2 子宫内膜细胞在ECM 胶上的生长状态
• 3.2.3 体外培养的子宫内膜细胞MHC Ⅱ表达的测定结果
• 3.3 讨论
• 第四章 雌孕激素、病毒刺激的淋巴细胞条件培养液对体外培养的小鼠子宫内膜细胞MHC Ⅱ表达的影响
• 4.1 材料方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 方法
• 4.2 结果
• 4.2.1 雌、孕激素影响
• 4.2.2 病毒刺激的淋巴细胞条件培养液的影响
• 4.3 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介