苦瓜单倍体诱导的初步研究

论文摘要

苦瓜（Momordica charantia L.）作为一种药食兼用的保健蔬菜,近年来受到消费者的青睐。随着人们对苦瓜需求的增加,对其育种目标提出了多元化的要求。然而,常规遗传育种方法存在育种周期长、难度大等问题,严重制约苦瓜的育种进程。而单倍体育种可以加快优良自交系的选育,显著提高育种速度。本研究以两种不同基因型的苦瓜品种Z-1-4×132-3-1、“翠妃”为实验材料,分析了花粉蒙导、化学药剂处理和未授粉子房离体培养等方法,对苦瓜单倍体诱导的影响,初步获得了如下结果：（1）用外源花粉对苦瓜子房进行蒙导法处理时,普通丝瓜（Luffa cylindrica roem.）的花粉刺激苦瓜子房生长的效果,要显著地优于黄瓜、冬瓜、南瓜、网纹甜瓜、瓠瓜等葫芦科作物。（2）用化学药剂处理苦瓜花粉时,80-100 mg/L的甲苯胺蓝溶液能显著地抑制苦瓜花粉正常萌发,导致花粉管异常,有利于刺激苦瓜子房进一步发育。1%-2%二甲基亚砜溶液能刺激30%的苦瓜子房进一步生长,但难以形成商品瓜。（3）比较了不同方法对苦瓜子房外植体的灭菌效果,结果表明用3%次氯酸钠溶液灭菌10 min的效果最好。此外,秋季的灭菌时间应短于春、夏季。（4）取苦瓜雌花开放前12个小时的未受精子房作为外植体,苦瓜子房块在含有1.0mg/L 6BA,1.0mg/L NAA的MS培养基中时,随着AgNO3浓度上升,能较快形成愈伤组织,以5 mg/L AgNO3最高,愈伤率达到90%以上。翠妃苦瓜子房对激素的敏感性大于Z-1-4×132-3-1。（5）取苦瓜雌花开放前12个小时的未受精胚珠作为外植体,接种在1/2MS预培养基上,35℃黑暗条件下热激4 d,胚珠明显膨大生长。将其转接至NAA浓度为0.5 mg/L、6BA浓度为1 mg/L、2,4-D浓度为4 mg/L的MS培养基上培养,获得的愈伤率最高,达到71%。CPPU对苦瓜未授粉子房没有明显刺激效应。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 缩略语表
• 1 前言
• 1.1 课题的提出
• 1.2 国内外研究进展
• 1.2.1 供体植株的基因型
• 1.2.2 接种时未受精子房和胚珠的发育时期（胚囊成熟度）
• 1.2.3 培养基对未受精子房和胚珠离体培养的影响
• 1.2.4 培养条件对未受精子房和胚珠的影响
• 1.2.5 供体植株的生理状态对未受精子房和胚珠的影响
• 1.2.6 单倍体植株倍性鉴定方法
• 1.2.7 再生胚囊植株的倍性水平
• 1.2.8 单倍体植株加倍的研究
• 2 本论文研究目的和内容
• 3 材料与方法
• 3.1 材料
• 3.2 方法
• 3.2.1 苦瓜花粉灭活处理
• 3.2.2 花粉活力检测
• 3.2.3 利用葫芦科近缘属花粉对苦瓜雌花进行蒙导法处理
• 3.2.4 甲苯胺蓝、马来酰肼、二甲基亚砜处理苦瓜雌花
• 3.2.5 苦瓜未受精胚珠的准备
• 3.2.6 接种外植体的灭菌准备
• 3.2.7 苦瓜处理后子房在不同激素和添加剂配比下的诱导培养
• 3.2.8 苦瓜未受精胚珠的预培养
• 3.2.9 苦瓜未受精胚珠的在不同激素和添加剂配比的诱导培养
• 3.2.10 数据处理
• 4 结果与分析
• 4.1 苦瓜花粉灭活处理结果
• 4.2 葫芦科近缘属花粉对苦瓜雌花进行蒙导处理结果分析
• 4.3 甲苯胺蓝、马来酰肼、二甲基亚砜处理苦瓜雌花结果分析
• 4.4 外植体灭菌处理结果
• 4.5 苦瓜处理后子房在不同激素和添加剂配比下的诱导培养
• 4.6 苦瓜未受精胚珠在不同激素和添加剂配比下的诱导培养
• 5 讨论
• 5.1. 苦瓜花粉灭活处理
• 5.2 葫芦科近缘属花粉对苦瓜雌花的影响
• 5.3 化学药剂对苦瓜子房的影响
• 5.4 灭菌试剂种类和浓度的选择
• 5.5 热激对苦瓜未受精胚珠的影响
• 5.6 基因型的影响
• 5.7 生长激素的影响
• 3对外植体分化的影响'>5.8 AgNO₃对外植体分化的影响
• 5.9 诱导苦瓜单倍体的潜在途径
• 参考文献
• 致谢