红花—甘草药对体内效应物质基础研究

论文摘要

中医药在治疗心血管疾病方面具有悠久的历史和独特的优势。由于其自身组成的复杂性和临床遣方用药的灵活性，因此，基于传统中医药理论的现代新药开发研究就成为医学、化学、生物学等众多领域的热点问题。本研究依据中药组方原则，以血府逐瘀汤中具有“相使”关系的君药红花和使药甘草药对为对象，围绕其相互活性成分群的筛选展开系统工作，笔者的主要贡献如下：1.建立了SD大鼠含药血浆中（羟基红花黄色素A）HSYA的高效液相色谱分析方法。方法线性范围为：0.206.25mg·mL-1，检测限为0.10mg·mL-1，精密度、重现性和稳定性测定结果符合中国和美国食品药品鉴定所对生物样本检测方法的要求，证明该方法可用于HSYA药代动力学及复方活性成分群的筛选研究。2.采用拟定的高效液相色谱分析方法，研究了正常大鼠在分别灌胃红花和红花-甘草后血浆中HSYA的药代动力学过程，并运用代谢组学原理进行主成分分析及相关性分析。结果发现：①配伍甘草后HSYA的分布半衰期显著减小，提示甘草可以促进HSYA在体内分布。②PCA分析及相关性分析结果表明红花中的HSYA、内源性物质ES16、ES17、ES24是引起正常红花组和正常红花-甘草组间出现显著性差异的原因。3.研究了在血瘀症病理模型大鼠在分别灌胃红花和红花-甘草后血浆中HSYA的药代动力学过程，并运用代谢组学原理进行主成分分析及相关性分析，结果发现：①模型组配伍甘草后，HSYA的分布半衰期、药时曲线下面积和达峰浓度均增大，提示在模型组中甘草减慢了HSYA在体内的分布，增大了机体对HSYA的吸收。②PCA分析及相关性分析结果表明药材成分HSYA、内源性物质ES16、ES17、ES24是引起两组间显著性差异的主要原因。4.采用高效液相色谱-质谱联用技术对体内效应物质HSYA、ES16、ES17、ES24、ES48进行了定性分析。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 心血管疾病的危害及治疗现状
• 1.3 药对配伍研究现状和发展趋势
• 1.4 红花-甘草药对研究意义
• 1.4.1 红花的成分及药理研究
• 1.4.2 甘草的成分及药理研究
• 1.5 本文的研究内容
• 第二章 大鼠血浆中羟基红花黄色素 A 的 HPLC 方法学建立
• 2.1 仪器、试剂及其他
• 2.1.1 仪器
• 2.1.2 药品及试剂
• 2.1.3 动物
• 2.2 供试品溶液的制备
• 2.2.1 对照品溶液的制备
• 2.2.2 空白血浆供试品溶液的制备
• 2.2.3 空白加标血浆供试品的制备
• 2.3 分析方法
• 2.4 方法学考察
• 2.4.1 方法专属性及检出限
• 2.4.2 线性关系
• 2.4.3 提取回收率
• 2.4.4 方法回收率
• 2.4.5 精密度试验
• 2.4.6 稳定性试验
• 2.5 结论与讨论
• 2.5.1 液相色谱条件的选择
• 2.5.2 血浆制备方法的选择
• 2.5.3 方法学考察
• 2.5.4 结论
• 第三章 正常大鼠体内红花-甘草配伍药代动力学及作用物质基础研究
• 3.1 仪器、试剂及动物
• 3.1.1 仪器
• 3.1.2 药品及试剂
• 3.1.3 动物
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 药材供试品溶液的制备
• 3.2.2 动物实验设计
• 3.2.3 含药血浆供试品溶液的制备
• 3.2.4 色谱条件
• 3.3 实验结果
• 3.3.1 红花及红花-甘草药材提取液中 HSYA 的含量测定
• 3.3.2 正常组含药血浆中 HSYA 的含量测定
• 3.3.3 正常组含药血浆中 HSYA 的药代动力学研究
• 3.3.4 主成分分析
• 3.3.5 正常组含药血浆中内源性物质的相关性分析
• 3.4 讨论
• 3.4.1 正常组中甘草对红花中 HSYA 的药代动力学的影响
• 3.4.2 PCA 结果分析
• 3.4.3 正常红花组合正常红花-甘草组中各成分相关性分析对比
• 第四章 模型大鼠体内红花-甘草配伍药代动力学及作用物质基础研究
• 4.1 仪器、试剂及动物
• 4.1.1 仪器
• 4.1.2 药品及试剂
• 4.1.3 动物
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 造模方法
• 4.2.2 动物实验设计
• 4.2.3 含药血浆供试品溶液的制备
• 4.2.4 色谱条件
• 4.3 实验结果
• 4.3.1 模型组含药血浆中 HSYA 的含量测定
• 4.3.2 模型组含药血浆中 HSYA 的药代动力学研究
• 4.3.3 主成分分析
• 4.3.4 模型组含药血浆中内源性物质和代谢产物的相关性分析
• 4.4 讨论
• 4.4.1 模型组中甘草对红花中 HSYA 的药代动力学的影响
• 4.4.2 PCA 结果分析
• 4.4.3 模型红花组和模型红花-甘草组中各成分相关性分析对比
• 4.5 模型组与正常组结果对比
• 4.5.1 正常组与模型组中 HSYA 的药代动力学对比
• 4.5.2 正常组与模型组数据的 PCA 分析结果对比
• 4.5.3 正常组与模型组数据的相关性分析结果对比
• 第五章 红花-甘草体内效应物质的初步定性
• 5.1 仪器、试剂及动物
• 5.1.1 仪器
• 5.1.2 药品及试剂
• 5.1.3 动物
• 5.2 实验方法
• 5.2.1 动物实验设计
• 5.2.2 分析条件
• 5.3 结果与讨论
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 本论文中常用符号中英文对照
• 攻读硕士期间取得的学术成果
• 致谢