茶多酚抗癌分子机制及其预防人类肝癌的基础实验研究

茶多酚抗癌分子机制及其预防人类肝癌的基础实验研究

论文题目: 茶多酚抗癌分子机制及其预防人类肝癌的基础实验研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 肿瘤学

作者: 崔英

导师: 张丽生

关键词: 茶多酚,肝癌,分子机制,凋亡,端粒酶,电镜,基因芯片,裸鼠,肝癌预防

文献来源: 广西医科大学

发表年度: 2005

论文摘要: 肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,肝癌的防治研究成为最富有挑战性的课题。绿茶及其主要组分茶多酚的抗癌作用日益引起广泛关注。茶多酚具有广泛的生物学特性和药理效应,能够抑制多种肿瘤的发生和发展。但茶多酚抗癌的确切机制尚未清楚,本课题从体外细胞实验、人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤模型、以及茶多酚预防人类肝癌的基础实验三个方面研究茶多酚的抗癌作用,应用DNA凝胶电泳、流式细胞仪、端粒酶检测、电镜、基因芯片、RT-PCR、免疫组化等现代分子生物学技术多方面探讨其作用机制。 体外细胞实验中,MTT法和集落形成实验显示,茶多酚可以明显的抑制Hep3B肝癌细胞的增殖和集落形成,随着茶多酚的浓度逐渐增加,其抑瘤作用递增,茶多酚对Hep3B肝癌细胞的半数抑制剂量IC50值为143μg/ml。肝癌细胞经茶多酚处理后,细胞形态发生变化。电镜观察:细胞出现凋亡现象。提取茶多酚处理的Hep3B肝癌细胞的DNA进行琼脂糖凝胶电泳显示典型的DNA梯状条带。流式细胞仪检测发现:茶多酚能引起细胞周期(G1期)阻滞,阻止受损细胞进入S期而抑制细胞过度增殖;茶多酚可以引起Hep3B凋亡,并呈现剂量—效应和时间—效应关系。采用茶多酚诱导Hep3B细胞分化后,端粒酶活性下降。用茶多酚处理24、48小时的Hep3B肝癌细胞及对照组细胞制备cDNA探针,进行Atlas cDNA array杂交,分析发现茶多酚上调死亡受体介导的凋亡通路相关基因TNF、TNFR、Caspase-9和Caspase-10,下调bcl—2等基因。用RT-PCR的方法验证部分结果,与Atlas cDNA array的分析结果一致。

论文目录:

中文摘要

英文摘要

前言

第一部分 茶多酚抗癌分子机制的体外实验研究

材料与方法

结果

讨论

小结

第二部分 茶多酚对人肝细胞癌裸鼠移植瘤模型作用的实验研究

材料与方法

结果

讨论

小结

第三部分 茶多酚预防人类肝癌的基础实验研究

材料与方法

结果

讨论

小结

总结

参考文献

综述

附图

附录1

附录2

致谢

发布时间: 2005-08-08

参考文献

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茶多酚抗癌分子机制及其预防人类肝癌的基础实验研究
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