APEX1在肝细胞癌的表达及其单核苷酸多态性与肝癌相关性研究

论文摘要

目的从mRNA和蛋白水平上,检测APEX1及HBV标志物在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况,探讨APEX1表达协同HBV标志物与HCC侵袭转移的关系及其意义。同时,通过检测100例福建省原发性肝细胞癌患者和100例福建正常人群APEX1单核苷酸多态性,探讨其与肝癌发生的相关性。方法利用组织芯片、免疫组织化学和原位核酸杂交技术,分别检测130例HCC、96例癌旁肝组织、46例远癌肝组织和29例肝内外转移灶中APEX1蛋白、HBsAg、HBcAg、APEX1mRNA和HBV DNA的表达情况,并分析其与各临床病理参数的关系及其意义;应用连接酶检测反应(ligase detection reaction,LDR)检测APEX1 Ile64Val、Asp148Glu及Gly241Arg 3个单核苷酸多态性位点,并进行连锁不平衡及单倍型分析,探讨该3个SNPs在福建肝癌人群中的分布情况,并分析其与该人群肝癌危险性的关系及其意义。结果1.免疫组化及原位杂交结果表明,APEX1在HCC、癌旁、远癌肝组织及正常肝组织的表达水平逐渐下降,差异有显著性(P<0.001);在HCC组织中,随病理学分级的升高,APEX1的表达逐步升高(P<0.05),与肿瘤无转移组比较,肿瘤转移组中APEX1表达明显升高,且肿瘤包膜组APEX1蛋白表达较包膜无浸润组明显升高(P<0.0001)。APEX1蛋白胞质胞核联合表达方式的比例在癌旁肝组织、远癌肝组织、HCC和转移灶组依次递增,差异具有显著性(P =0.001)。2. HBsAg和HBV DNA在远癌组和癌旁组的表达明显高于HCC组和转移组,差异具有显著性(P <0.001)。HBcAg在癌旁肝组织、远癌肝组织中的表达略高于HCC,但差异无显著(P>0.05)。除HBsAg表达与APEX1mRNA存在负相关,差异具有统计学意义(P=0.014)外,其余各指标之间均无关(P>0.05)。3.连接酶检测反应结果显示,Gly241Arg多态性与原发性肝细胞癌的发生密切相关(P=0.002),而Ile64Val和Asp148Glu多态性与肝癌的发生无关(P>0.05),Asp148Glu与Gly241Arg位点间存在着连锁不平衡(D’=0.519)。结论:1. APEX1与HCC恶性临床表型有密切关系。APEX1蛋白细胞质表达方式的出现,可能与肿瘤的侵袭、转移有关。APEX1过表达及蛋白的胞质表达可能与HCC的预后有关;2. APEX1的表达与HCC患者年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型等临床病理参数均无关;3. HBsAg和HBV DNA在HCC组的表达量明显低于远癌组和癌旁组;4. APEX1 Gly241Arg多态位点携带GA基因型人群可能对肝癌更易感,APEX1 Gly241Arg多态性可作为筛查肝细胞癌好发的危险因素;5. Ile64Val和Asp148Glu多态性与肝癌的发生无关。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一部分 APEX1 蛋白和 mRNA 在原发性肝细胞癌的表达及其临床病理意义
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 APEX1 基因单核苷酸多态性与肝癌相关性研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 全文小结
• 参考文献
• 致谢
• 综述