毛细管电泳技术研究及其在药物分析中的应用

论文摘要

本工作将毛细管电泳-电化学检测技术引入药物分析中,介绍了两种毛细管电泳分离技术的偶联方法,全文共分为四章。第一章主要是介绍了毛细管电泳的发展和特点,综述了毛细管电泳安培检测最新进展以及二维毛细管电泳在药物分析中的应用,并对本文的课题背景作了简要的介绍。第二章采用毛细管电泳电化学检测法分离了美托洛尔和普萘洛尔。建立分离测定三种心血管药物的胶束电动毛细管电泳分离方法,考察了背景电解质pH值,不同阴离子表面活性剂及有机添加剂对分离的影响。分离尼群地平、尼莫地平和硝苯地平的最佳条件为:运行缓冲溶液为pH9.10的30 mmol/L的N a2B4O7 ,1 mmol/L的Na2HPO4（内含23 mmol/L的SDS和3.3%甲醇）。建立了一种毛细管区带电泳（CZE）-毛细管胶束电动色谱（MECC）二维电化学分离检测五种心血管药物的方法,这五种药物分别为美托洛尔（MT）、普萘洛尔（PP）、尼群地平（NT）、尼莫地平（NM）和硝苯地平（NF）。介绍了一种新型的聚四氟乙烯管连接接口的制作方法,并用该接口构建了一类毛细管电泳二维分离技术平台。特别适合作为基于毛细管柱的二维及多维电泳联用中的接口,是目前二维及多维毛细管柱联用中一类较为新型、实用、理想的界面。以病人血清中该五种药物的分离为例,通过实验验证了该接口在二维毛细管电泳联用系统中的可行性和分离效能。可知测定的回收率在82.2 %～97.5 %之间,基本满足分析的要求,说明该法有望应用于实际动物血清样的NT、NM、NF、MT和PP的分解代谢检测。第三章建立了分离测定三种头孢类药物的高效毛细管电泳分离方法,考察了背景电解质pH值及毛细管半径对分离的影响。分离头孢氨苄,头孢羟氨苄和甲氧苄啶的最佳条件为:运行缓冲溶液为pH9.18的30 mmol/L的Na2B4O7 ,1 mmol/L的Na2HPO4。分离电压16 kV ,柱温25℃,电动进样5s ,检测电势-0.2V。三种药物在优化的实验条件下得到了基线分离。该方法对三种药物测定的线性范围为1.0×10-7-1.0×10-9 ng/mL,质量检测限达fmol。第四章我们首创发明了一种新型的建立在由乙腈诱导的场放大进样与等速电泳酸堆积效应相偶联的连续预富集方式毛细管电泳方法,该连续预富集毛细管电泳方法,通过一系列条件的优化,所达到的检测限比普通毛细管电动进样方法高出三个数量级（1,400倍）,分辨率和峰形都很好。其中,表他明的检测限达0.1 ng/mL,安纳巴松的检测限达0.3 ng/mL。从标准曲线知,用该方法,表他明的线性范围是1.3–600 ng/mL,安纳巴松的线性范围是4.9–900 ng/mL。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 前言
• 1.1 概述
• 1.2 毛细管电泳基本原理
• 1.2.1 一维毛细管电泳基本原理
• 1.2.2 多维高效液相色谱／毛细管电泳分离的原理
• 1.3 毛细管电泳分离模式
• 1.4 毛细管电泳的特点
• 1.5 毛细管电泳检测技术
• 1.6 应用
• 1.6.1 手性化合物的分离
• 1.6.2 环境分析中的应用
• 1.6.3 中草药分析中的应用
• 1.6.4 蛋白质及DNA 的分析
• 1.6.5 小分子与离子的分析
• 1.7 多维高效液相色谱／毛细管电泳研究进展及其在药物分析中的研究现状
• 1.7.1 多维毛细管电泳分离模式的研究进展
• 1.7.2 2D-CE 在药物分析中的研究现状
• 1.8 本论文研究的课题背景
• 1.9 参考文献
• 第2章 二维毛细管电泳检测分离五种心血管药物
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 仪器
• 2.2.2 材料与试剂
• 2.2.3 试验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 CZE 检测方法
• 2.3.2 MECC 检测条件
• 2.3.3 二维检测条件
• 2.4 结论
• 2.5 参考文献
• 第3章 毛细管区带电泳在线分离头孢类药物
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 仪器
• 3.2.2 材料与试剂
• 3.3 试验方法
• 3.3.1 CE／柱端安培检测
• 3.3.2 电泳分离条件
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 检测方法的选择
• 3.4.2 分离电压的影响
• 3.4.3 毛细管内径的选择
• 3.4.4 缓冲溶液的选择
• 3.4.5 检测cafalexin 的重现性、检测限和线性范围
• 3.4.6 定量及回收率
• 3.5 结论
• 3.6 参考文献
• 第4章 场放大进样准等速电泳偶联的酸堆积连续预富集毛细管电泳分析烟碱
• 4.1 引言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 实验装置
• 4.2.2 药品与试剂
• 4.2.3 实验步骤
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 分离条件
• 4.3.2 FASI 和pseudo ITP-AS 的样品预富集
• 4.3.3 线性范围和重现性
• 4.4 结论
• 4.5 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文目录