本文主要研究内容
作者丛玉婷,邢震宇,岳金荣,高相楠,张晓琳,柴晓杰（2019）在《盐藻钙依赖蛋白激酶基因DsCDPK的表达分析》一文中研究指出：以盐藻总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增了盐藻DsCDPK基因的cDNA序列,将其克隆到pMDTM19-T simple载体上,经测序获得的克隆片段全长1650 bp,与已发表的盐藻DsCDPK（GenBank:JQ964113）的编码区序列同源性达100%。将DsCDPK基因的开放阅读框与质粒pET-32a（+）连接,构建原核表达载体pET-32a-DsCDPK。将该重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导融合,蛋白在大肠杆菌BL21中得到成功表达。通过SDS-PAGE检测发现,融合蛋白为部分可溶性表达,将上清蛋白经过His柱纯化后获得了纯度较高的可溶性融合蛋白,Western杂交检测显示,融合蛋白能被抗His单克隆抗体特异性识别,初步证明该融合蛋白就是带有His标签的DsCDPK蛋白。采用实时荧光定量PCR方法分析了高盐胁迫下DsCDPK基因的表达模式。试验结果表明,盐藻DsCDPK基因为盐胁迫上调基因,在高盐（3.0 mol/L NaCl）胁迫下,DsCDPK基因表达量显著增加,盐胁迫1 h时表达量达到最高,为正常生长状况（1.0 mol/L NaCl）下的3倍,差异达到极显著水平（P<0.01）。该研究成果为进一步阐明盐藻钙依赖蛋白激酶基因的功能及作用机制奠定了基础。
Abstract
yi yan zao zong RNAwei mo ban ,li yong RT-PCRji shu kuo zeng le yan zao DsCDPKji yin de cDNAxu lie ,jiang ji ke long dao pMDTM19-T simplezai ti shang ,jing ce xu huo de de ke long pian duan quan chang 1650 bp,yu yi fa biao de yan zao DsCDPK（GenBank:JQ964113）de bian ma ou xu lie tong yuan xing da 100%。jiang DsCDPKji yin de kai fang yue dou kuang yu zhi li pET-32a（+）lian jie ,gou jian yuan he biao da zai ti pET-32a-DsCDPK。jiang gai chong zu zhi li zhuai hua dao da chang gan jun BL21zhong ,jing IPTGyou dao rong ge ,dan bai zai da chang gan jun BL21zhong de dao cheng gong biao da 。tong guo SDS-PAGEjian ce fa xian ,rong ge dan bai wei bu fen ke rong xing biao da ,jiang shang qing dan bai jing guo Hiszhu chun hua hou huo de le chun du jiao gao de ke rong xing rong ge dan bai ,Westernza jiao jian ce xian shi ,rong ge dan bai neng bei kang Hischan ke long kang ti te yi xing shi bie ,chu bu zheng ming gai rong ge dan bai jiu shi dai you Hisbiao qian de DsCDPKdan bai 。cai yong shi shi ying guang ding liang PCRfang fa fen xi le gao yan xie pai xia DsCDPKji yin de biao da mo shi 。shi yan jie guo biao ming ,yan zao DsCDPKji yin wei yan xie pai shang diao ji yin ,zai gao yan （3.0 mol/L NaCl）xie pai xia ,DsCDPKji yin biao da liang xian zhe zeng jia ,yan xie pai 1 hshi biao da liang da dao zui gao ,wei zheng chang sheng chang zhuang kuang （1.0 mol/L NaCl）xia de 3bei ,cha yi da dao ji xian zhe shui ping （P<0.01）。gai yan jiu cheng guo wei jin yi bu chan ming yan zao gai yi lai dan bai ji mei ji yin de gong neng ji zuo yong ji zhi dian ding le ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自水产科学的丛玉婷,邢震宇,岳金荣,高相楠,张晓琳,柴晓杰，发表于刊物水产科学2019年02期论文，是一篇关于杜氏盐藻论文,原核表达论文,实时荧光定量论文,盐胁迫论文,水产科学2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自水产科学2019年02期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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