论文摘要
目的:应用人支气管上皮（BEAS-2B）细胞体外培养,探讨铀矿尘对BEAS-2B细胞的损伤、致突变及致癌作用,以进一步了解铀矿尘引起肺癌的可能机制。在观察铀矿尘对BEAS-2B细胞的损伤、致突变及致癌作用同时,采用二甲基亚砜（DMSO）进行干预,以了解DMSO在防护铀矿尘对机体损伤的保护作用。方法:本研究采用体外细胞培养条件下,将不同浓度的铀矿尘对BEAS-2B细胞进行染毒,5μm铀矿尘的浓度为0.5mg/ml,1.0mg/ml,1.5mg/ml,60-80nm铀矿尘的浓度为0.5mg/ml和1.0mg/ml,通过彗星试实验、微核实验、细胞恶性转化实验、锚着独立生长实验等,观察铀矿尘对BEAS-2B细胞的致突变和致癌作用。应用透射电镜观察铀矿尘对BEAS-2B细胞超微结构的损伤作用。应用免疫组化、PCR及PCR-SSCR方法检测铀矿尘致癌作用中p53、Ki-Ras基因的表达。结果:铀矿尘可使BEAS-2B细胞培养上清中LDH、ALP、GOT含量增加,与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）,在一定范围内有剂量反应关系,表明铀矿尘对细胞膜具有损伤作用。铀矿尘对BEAS-2B细胞DNA和染色体具有明显的损伤作用,表现为随着铀矿尘浓度的增高,出现细胞拖尾数、微核细胞数明显增加,彗星细胞拖尾率、微核率明显高于对照组,与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。铀矿尘染毒后第10代细胞时,可诱导BEAS-2B细胞能在软琼脂上形成克隆;铀矿尘可损伤BEAS-2B细胞超微结构损伤,如胞膜模糊或破裂,微绒毛减少或消失,细胞骨架紊乱,核膜模糊,核固缩,染色质沿胞核周边密集等改变。铀矿尘高浓度可诱导BEAS-2B细胞有较高的p53基因和蛋白表达,而且Ki-Ras基因可疑阳性表达。0.5%DMSO对铀矿尘所引起的BEAS-2B细胞损伤作用具有一定的保护作用。结论:1.铀矿尘在体外细胞实验中表现出对BEAS-2B细胞DNA和染色体具有损伤作用,增强细胞恶性转化能力具有潜在的致癌作用。2.铀矿尘可致BEAS-2B细胞p53蛋白和P53、Ki-ras基因表达增强。3.二甲基亚砜（DMSO）对铀矿尘诱发的BEAS-2B细胞损伤作用具有一定的保护作用。4.纳米级的铀矿尘对支气管上皮细胞造成损伤的危害性应值得高度关注。
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