黄荆与其变种牡荆内生真菌的多样性比较及其次生代谢产物研究

论文摘要

(Bionectria ochroleuca)均具有显著的抗真菌活性和抗肿瘤活性,而菌株T18抗肿瘤活性最为显著,其IC50均低于25μg/mL,且当浓度达到100μg/mL时,其对4种肿瘤细胞株的抑制率接近100%。对菌株T18（Bionectria ochroleuca）发酵产物和宿主黄荆进行醚溶成分的GC-MS检测。研究发现,两者含有菌株T18与宿主黄荆的醚溶成分含有相同的化合物——棕榈酸（n-Hexadecanoic acid）和二甲基苄醇（a,a-dimethyl-Benzyl alcohol）。对活性菌株T18进行化学成分研究,分离得到单体戊二酸甲酯等化合物,接下来的单体纯化和鉴定工作还在进行中。根据我们的研究得到了一些有意义的结果,主要包括以下四个方面：1.从两个产地黄荆和牡荆中分离得到了1341株内生真菌,鉴定为83个分类单元,归属到5纲14目25科40属,研究发现其内生真菌群落组成受植物种类的影响,具有宿主专一性。地理位置对内生真菌分布也有明显的影响,甚至影响程度要高于宿主种类对内生真菌分布的影响,这为揭示内生真菌的多样性和生态分布积累了科学素材；2.真菌Cladosporium tenuissimum均为两个产地牡荆中的优势菌种,在两个产地牡荆植株中出现的频率均较高且在黄荆中未分离到,它对牡荆内生真菌的分布影响较大,为本研究中牡荆特有的内生真菌；3.对内生真菌次生代谢物质的生物活性进行了检测,包括抗稻瘟霉模型初筛、体外抗真菌检测和体外抗肿瘤检测,发现若干具有明显生物活性的菌株,其中T4、T18和T52具有显著的抗真菌和抗肿瘤作用,T18对本研究中的四种肿瘤细胞株的IC50均低于25μg/mL,且当其浓度达到100μg/mL时,对4种肿瘤细胞株的抑制率接近100%,具有极显著的抗肿瘤活性；4.菌株T18的乙醚部位产生与宿主相同的两种成分——棕榈酸（n-Hexadecanoic acid）和二甲基苄醇（α, α-dimethyl-Benzyl alcohol）,而多数成分与黄荆醚溶成分不同,反映了内生真菌既能产生与宿主相同成分同时又具有丰富的次生代谢产物。综上所述,本课题为揭示内生真菌的生态分布规律以及开发应用黄荆与牡荆内生真菌及其活性产物提供了一定的实验基础。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一章 黄荆与牡荆内生真菌的分离、纯化和鉴定
• 1.1 实验材料、试剂及仪器
• 1.2 实验方法
• 1.3 实验结果与讨论
• 第二章 黄荆与牡荆内生真菌多样性的分析比较
• 2.1 实验材料与方法
• 2.2 数据分析
• 2.3. 实验结果
• 2.4 讨论
• 第三章 黄荆与牡荆内生真菌活性菌株的筛选
• 3.1 实验材料、试剂与仪器
• 3.2 实验方法
• 3.3 实验结果与讨论
• 第四章 活性菌株T18（Bionectria ochroleuca）次生代谢产物的研究
• 第一节 菌株T18（Bionectria ochroleuca）与宿主黄荆醚溶成分的比较
• 4.1.1 仪器与材料
• 4.1.2 实验方法
• 4.1.3 实验结果与讨论
• 第二节 菌株T18（Bionectria ochroleuca）代谢产物的分离与结构鉴定
• 4.2.1 材料和仪器
• 4.2.2 实验方法
• 4.2.3 实验结果与讨论
• 第五章 研究总结
• 综述 药用植物内生真菌次生代谢产物研究进展
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间科研成果情况
• 致谢