论文摘要
目的:1) 探讨细胞色素 P4501A1(CYP1A1)和 CYP1B1 在人髓母细胞瘤细胞系 UW228-3 细胞内的表达情况;2) 观察白藜芦醇对 CYP1A1和 CYP1B1 基因表达的影响以及芳香烃受体(Aryl hydrocarbon receptor,简称 AhR)对这两个基因表达的影响;3) 研究在体情况下(in vivo),人髓母细胞瘤内 CYP1A1 的表达特点及其与芳香烃受体的关系。通过上述研究,进一步了解 1) 白藜芦醇抗髓母细胞瘤作用的机制和 2)CYP1A1 和 CYP1B1 与髓母细胞瘤生长、分化和凋亡之间的关系,以期加深对髓母细胞瘤细胞分子生物学特点的认识,为改善临床髓母细胞瘤的化疗现状提供新的实验室指标和理论根据。 方法:人髓母细胞瘤细胞系 UW228-3 培养于含 10%进口胎牛血清的 DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium)培养基中,分别用CYP1A1 的选择性抑制剂,alpha-naphthoflavone, 简称 α-NF(15μM)、CYP1A1 的选择性诱导剂 beta-naphthoflavone, 简称 β-NF(15μM)、白藜芦醇,resveratrol,简称 Res(100μM)及它们不同的组合(α-NF+Res,β-NF+Res)处理细胞,观察 α-NF 和 β-NF 对白藜芦醇诱导的人髓母细胞瘤细胞的分化和凋亡的影响;细胞形态学观察和免疫细胞化学染色用预先置于培养皿的细胞玻片进行;采用 Trypan Blue 计数法检测各实验组中细胞的增殖活性;免疫细胞化学和 RT-PCR 等方法系统地分析各实验组中 CYP1A1、CYP1A2、CYP1B1、AhR、GFAP(glial fibrillary acidic
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