冬凌草甲素通过抑制IGF-1受体信号转导途径诱导人恶性黑色素瘤A375-S2细胞死亡

论文摘要

本实验室以前的研究表明，冬凌草甲素（oridonin）能诱导人恶性黑色素瘤A375-S2细胞凋亡。本文考察了oridonin在诱导A375-S2细胞凋亡时，可能潜在的对胰岛素样生长因子-1受体（IGF-1R）信号转导途径的抑制机制。IGF-1R是一种跨膜的受体型酪氨酸激酶，IGF-1R的激活具有拮抗凋亡和促进存活的作用。我们发现，IGF-1可以拮抗20μM oridonin诱导的A375-S2细胞凋亡，而不能拮抗40μM oridonin（IC50 at 24 h）诱导的A375-S2细胞凋亡；IGF-1介导的保护作用依赖于Ras癌基因蛋白或p38 MAPK（p38 mitogen activated protein kinase）的活化，而PI3K（phosphatidylinositol-3-OH kinase）或ERK（extracellular signal-regulated kinase）的活性对IGF-1的保护作用没有明显影响；Oridonin能剂量依赖性地下调A375-S2细胞IGF-1R的表达，抑制磷酸化p38 MAPK的水平。因此，oridonin对IGF-1R信号途径的抑制与其凋亡诱导作用有关。研究发现，在oridonin的促凋亡信号途径和IGF-1R的抗凋亡途径中，p53蛋白起着重要的调节作用。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 第一节 胰岛素样生长因子-1及其受体信号转导通路
• 一 蛋白酪氨酸激酶——抗肿瘤药物的新靶点
• 二 胰岛素样生长因子-1及其受体
• 1.胰岛素样生长因子-1
• 2.胰岛素样生长因子-1受体
• 三 IGFs系统与肿瘤
• 四 IGF-1R下游信号转导途径
• 1.PI3K-Akt/PKB信号转导途径
• 2.Ras蛋白
• 3.MAPK家族蛋白
• 第二节 冬凌草甲素诱导恶性黑色素瘤A375-S2细胞凋亡的研究进展
• 一 恶性黑色素瘤的研究进展
• 二 冬凌草甲素诱导恶性黑色素瘤A375-S2细胞凋亡的研究进展
• 1.肿瘤细胞的细胞凋亡及其分子机制研究进展
• 1.1 细胞凋亡的特征及生物学意义
• 1.2 细胞凋亡与肿瘤的关系
• 1.3 细胞凋亡的调控因素
• 2.冬凌草甲素诱导恶性黑色素瘤A375-S2细胞凋亡的研究进展
• 2.1 冬凌草甲素的抗肿瘤活性
• 2.2 冬凌草甲素诱导恶性黑色素瘤A375-S2细胞凋亡的研究进展
• 参考文献
• 第二章 冬凌草甲素通过抑制IGF-1R的表达诱导A375-S2细胞死亡
• 实验材料与方法
• 1.实验材料
• 2.实验方法
• 2.1 MTT法分析生长抑制率
• 2.2 形态学观察
• 2.3 DNA提取和DNA片段化分析
• 2.4 Western blot analysis（免疫印迹法）
• 实验结果
• 1.酪氨酸激酶对A375-S2细胞具有保护作用
• 2.IGF-1对A375-S2细胞的促增殖作用
• 3.IGF-1能够拮抗20μM oridonin诱导的A375-S2细胞凋亡
• 4.IGF-1拮抗genistein诱导的A375-S2细胞死亡
• 5.A375-S2细胞的存活依赖于IGF-1受体的活性
• 6.oridonin剂量依赖性地下调IGF-1R表达
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 第三章 冬凌草甲素抑制IGF-1R下游信号途径的机制研究
• 实验结果
• 1.IGF-1的保护作用依赖Ras激酶的活性
• 2.IGF-1的保护作用依赖p38 MAPK激酶的活性
• 3.免疫印迹法考察oridonin对p38 MAPK抑制作用
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 第四章 IGF-1R信号转导与凋亡信号转导之间相互作用的研究
• 实验结果
• 1.IGF-1不能拮抗Fas激动性抗体CH11诱导的A375-S2细胞死亡
• 2.IGF-1拮抗UV诱导的A375-S2细胞死亡
• 3.IGF-1抑制20μM oridonin诱导的p53上调
• 4.oridonin诱导IGF-1R下调依赖p53活性
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 第五章 总结与展望
• 致谢